精子富集柱分离技术的研究

目的在传统差异裂解法基础上,研究建立新的混合斑检材中精子分离技术。方法根据精细胞的结构特点,研制精子富集柱。取混合斑检材经第一步消化后的混合液,加入精子富集柱中离心,使DNA等小分子物质透过,而精细胞被特异性黏附和拦截在富集层中。采用本文技术和常规裂解方法对12份混合斑检材中精子进行分离,分离后精子DNA采用Identifiler试剂盒进行PCR扩增和电泳检测。结果混合斑检材经精子富集柱分离后均获得单一男性精子的STR分型结果,而12份检材用常规裂解方法分离,其中有6份检材女性成分去除不完全或未能检出精子STR基因型。结论本研究建立的精子富集柱分离技术适用于常见混合斑检材中精子的分离,特别适合对含有大量女性混合物而精子量较少检材的分离提取。     

应用PCR-SSP方法进行ABO基因分型的研究

<正> ABO基因座位于第9号染色体上。它由7个外显子组成,第7外显子的两处碱基置换形成等位基因A和B,第6外显子的单碱基缺失形成等位基因O。90年代初,Yamamoto报道了ABO基因的核苷酸顺     

人类DRB基因单核苷酸多态性研究

目的建立一种对单核苷酸多态性(SNPs)位点进行复合检测的方法,并对人类DRB基因的单核苷酸多态性进行研究。方法 应用荧光标记双脱氧核苷酸进行单碱基延伸反应,同步检测人类DRB基因10个单核苷酸多态性位点。结果 应用该方法检验了人类标准细胞株K562、9947A及其他法医学常见生物检材,包括血斑2份、精斑5份、烟蒂8份、毛发3份,各样品间未发现相同的单核苷酸多态性组合单倍型。DNA模板需要量仅为0.5~1.0ng。结论 该方法是对微量生物物证进行个体识别鉴定的理想方法。同时还可为法医学及其他研究领域进行单核苷酸多态性分析提供快速、高效的技术手段。     

混合血迹中不同个体成份逐一分离识别的研究

目的研究法庭科学混合血迹物证中不同个体成份逐一分离、识别的问题,建立适合混合血迹个体识别的分析技术。方法采用PCR-SSCP及测序技术,选择m tDNA D-loop区的HVI 16030~16481区域452 bp片段作为分析目标,对中国汉族两无关个体、三无关个体混合血迹进行分析。结果100份两个体混合血迹样品m tDNA 452bp的PCR产物经SSCP电泳分离,结果有95份样品完全分离开,分离成功率达95%;30份三个体混合血迹样品452 bp片段经SSCP电泳分离,结果有26份样品有1~3个个体完全分离开,分离成功率达84%。对其中3份两个体混合血样、2份三个体混合血样SSCP电泳分离后的谱带进行回收、测序分析,两个体混合血样每一份均可准确获得其中单一个体序列及以另一个体主要成份(峰值比达4∶1以上)的序列结果;三个体混合血迹中不同个体成份可以达到初步分离,1份可准确确定单一个体序列。对两个体不同比例混合样品SSCP分析,结果可以检测到较少成份的最低比例为20∶80。结论本研究建立的PCR-SSCP及测序分析混合血迹综合技术,是对混合血迹中不同个体成份逐一分离、识别的一种有效技术手段。     

廉洁自律的好榜祥——记优秀共产党员、宣城市地方税务局局长杨茂庆

当“班长”不当“家长” 杨茂庆担任宜城市地税局局长近四年,被干部群众称为“民主班长”。一次,市直某企业为减免地方税收任务,由经理亲自出马夜访杨茂庆局长,希望他在减免地方税申请书上签个字,并表示一定投桃报李。但是杨茂庆局长回绝了。同时他又派人到该公司调查了解,帮助企业分析经营形势,并选择该公司作为该局重点挂钩企业,使该企业一举扭亏增盈。1996年,该局在机关经费和房屋紧张的情况下,准备拨款3万元用于局档案库房装修、设备购置和装备更新。他及时召开局党组“一班人”会议,讨论如何使档案库建设高标准、规范化。当时有人支持,也有人反对。意见不能统一时,有人对杨局长说:“你是班长,拍了板就算数。”但是杨茂庆回答说:“我是班长,不是家长,重大事情的出台,都要集体研究决定,不能搞一人说了算。”几天后,他特意请市档案局专家亲自指导,比较合理地解决了局档案库房的建设问题。据了解,几年     

根据Y-染色体特异DNA序列鉴定牙齿性别

人类牙齿的性别鉴定,是法医学个体识别中的一个重要部分。作者们应用限制性内切酶 HaeⅢ、Sau3A 水解60颗牙髓 DNA,琼脂糖凝胶电泳分离酶解片段,在紫外灯下直接观察。根据 Y-染色体特异 DNA 序列,3.4kb 长片段的有无,判断牙齿的性别。为牙齿性别的法医学鉴定提供了一种简单、准确的新方法。     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅰ)

应用 MYO DNA 探针对中国人进行了 DNA 遗传指纹图检验。从两个家系16人及100个无关个体中取肘静脉血提取 DNA,用限制性内切酶 HinfⅠ或 HaeⅢ水解,1%琼脂糖凝胶电泳分离,经 Southern印迹转移,MYO DNA 探针杂交,获得了清晰可辨的 DNA 指纹图谱。结果每个个体在3.0Kb 以上均能检出10条以上杂交区带,个体间的相关概率<4×10~(-9),由杂交区带构成的图谱是个体特异的,杂交区带遵循孟德尔的显性遗传方式由亲代向子代遗传;具有 DNA Fingerprints 的特点。对两起亲子鉴定的案例进行指纹图检验,孩子所存在的杂交区带,除来自母亲外,其余可在嫌疑父亲带中找到,肯定了孩子与嫌疑人的父子关系。MYO DNA 探针在亲子鉴定与个人识别的法医学鉴定中有着重要的实用价值。     

用Y—染色体特异DNA探针鉴识微量干血痕性别的研究

法医鉴识干血痕性别,通常是用盐酸阿地平染色观察 Y—小体的方法。重组 DNA 技术的发展与应用,为法医物证检验开辟了新的领域。本文用 Y—染色体特异 DNA 探针鉴识干血痕性别的成功,为法医的血痕性别签定,提供了一种新的检验方法。     

生物素掺入反向杂交法在法医学中应用的研究

建立了一套快速、准确检测人类 HLA－ DQA基因的反向杂交检测技术,可准确判定 HLA－ DQA基因位点的 6个等位基因即 0101、 0102、 0103、 0201、 0301、 0401。调查了中国北方汉族人群中 200例无关个体的 HLA－ DQA基因频率及基因型的频率分布,杂合度 (H)为 0.75,个体识别能力 (DP)为 0.928。采用生物素直接掺入 PCR扩增的方法, 1ng的 DNA样品即可准确判型。对血液、血斑、精斑、精液与阴道液的混合斑、肌肉组织等检材进行检测,效果良好。在刑事案件及亲子关系鉴定中应用,准确地判定了检材的 HLA－ DQA基因型,为侦察破案提供了科学依据。将此项技术商品化,完成了试剂盒的研制。     

东北4个民族15个STR多态性及与相关人群遗传关系调查

STR分型已被广泛应用于法庭科学中的个体识别与亲权鉴定,本文对东北地区满族、蒙古族、朝鲜族和汉族人群的STR基因座遗传多态性进行调查,并与相关人群遗传学数据进行比较分析,希望能为该地区少数民族个体的法医学鉴定提供遗传学数据,并为民族起源、迁徙等相关研究提供分子生物学依据。1材料与方法 1.