抗人精浆特异蛋白血清的制备与纯化

本文报导检验混合斑中精斑ABO 血型所用抗人精浆特异蛋白(anti-human seminal peculiarprotein,ASPP)血清的制备及用溴化氢活化琼脂糖4B 为载体的亲和层析纯化抗血清方法,并指出纯化时的最佳条件。该血清可准确地分离混合斑中精斑的ABO 血型。     

PCR-RFLP法检验混合斑中精斑ABO血型及基因型

运用PCR-RFLP检验方法,对21份精斑样品、5份混合斑检材进行了检验,结果表明该方法能够很好地检测混合斑中精斑的ABO血型及基因型,有效地解决了非分泌型精斑的ABO血型及基因型,拓宽了混合斑中精斑的检验范围.     

混合液（斑）中精液（斑）ABO血型的分离检验

混合液(斑)尤其是精斑与阴道分泌液斑混合斑中精斑ABO血型的检验,迄今为止,仍是法医物证学界的研究难题.本文根据收集到的文献,从方法学上综述国内外这一方面的研究现状.     

人精子ABO血型抗原的免疫金银染色研究

<正> 在法医物证检验中,直接检测单个精子的血型抗原,是判定混合斑中精斑血型的重要手段之一。本实验应用先进的免疫金银染色技术(Immunogold-Silver Stainning,IG SS)来检测人精子ABO血型抗原。     

应用血膜热解离法检测体液斑ABO血型

血膜热解离法检验体液斑中的ABO型物质，具有操作简单、检验时间短、灵敏、特异性高等优点，而且与中和法相比具有节省检材的特点，在实际检验中取得了较好的效果。材料和方法一、实验材料1.已知血型的人唾液斑、精斑、阴道分泌物斑纱布各1（）份（从医院提取）；2抗A、抗B血清（淮北市公安局血清室提供）；3‘）型血痕纱布（采耳血涂在白绷带纱布上，室温保存，最长为1年）。二、实验方法（一）血膜热解离法检测体液斑ABt）血型l取ZCC长唾液斑、精斑、阴道分泌物斑纱线加入本理盐水3滴浸泡半小时或充分搅拌，取二满分别满于载被片两侧…     

精液和阴道液混合斑中异常B型物质的检验

精液和阴道分泌液混合斑ABO血型的检验多采用中和法与热解离法同时检验，通过两种方法互相印证，有利于正确判定混合斑中的精斑血型。在检验O型或A型阴道分泌液与A型精液的混合斑时，偶而出现异常的B型物质，这一现象在国外已有报道[1、2]。本人在检案中见到三例，现将检验情况报道如下：材料与方法一、混合斑检林本室1984～1993年检验的已确证血型为O型或A型精液和阴道分泌液混合斑擦拭纱布43例。其中O型女子与A型男子的混合斑13例，A型女子与A型男子的混合斑15例，A型女子与O型男子的混合斑9例，O型女子与O型男子的混合斑6例。二、…     

型特异性沉淀素血清检验人唾液斑精斑ABO血型的研究与应用

本文介绍了利用型特异性沉淀素血清环状沉淀法检验人唾液斑、精液斑ABO血型的方法与实验结果,并与中和试验及解离试验进行了比较。实验结果表明,本法操作简便,对多种干扰条件下的唾液斑、精斑均具有高度的型特异性,并能从分泌液与血液的混合斑中准确地鉴别出分泌液的血型。本法仅需0.4cm的分泌斑纱线即可进行血型鉴定,其灵敏度高于中和试验而略低于热解离试验,并能有效地检出陈旧分泌液斑中的型物质,因此适于在实际检案中应用。     

混合斑中女性物质的PCR检验1例

１９９８年９月２７日,海阳大闫家镇村民某某将一１３岁小女孩骗至家中强奸。技术人员在现场提取了一团可疑的卫生纸,其上检出精斑。但犯罪嫌疑人拒不交代罪行,对于现场附有精斑的卫生纸,犯罪嫌疑人称是其与妻子发生性行为时所用。经常规ABO血型检验,受害人和犯罪嫌疑人妻子的血型均为“A”型;犯罪嫌疑人为“O”型,卫生纸上检出精斑且含“A”型物质。利用二步消化法分别将混合斑中的女性物质与精子DNA提取出来,进一步做DNA检验,经HUMTH０１犤AATG犦n、HUMFABP犤AAT犦n、pMCT１１８、apoB位点扩增、电泳、银染,结果…     

用胶乳凝集抑制试验鉴定人类精斑

作者用人类精浆致敏的胶乳和人初乳吸收后的抗人精液血清,采用胶乳凝集抑制试验凹玻板法盲测了180份生物性斑痕,结果表明此法确证人类精斑的敏感性,准确性均高于精子检出法,而与抗 p30血清琼脂双向扩散结果一致,且可用于混合斑的检验,具有快速、准确、简便等优点。     

免疫抗A、抗B、抗H沉淀素血清的制备

本文介绍了用浓缩的分泌型人唾液免疫鸡,经吸收精制获得鸡抗A、抗B、抗H沉淀素血清的方法。用本法制备的抗血清,对相应血型人唾液的特异性沉淀价可达1:512倍以上,对非相应血型者的分泌液不出现非特异性沉淀反应。应用该血清进行环状沉淀试验、单向琼脂扩散试验等免疫学试验,可简便、准确地鉴定人唾液斑、精液斑等分泌液斑的ABO血型。     

根据阴道液中蛋白的SDS-PAGGE谱型鉴定阴道液斑及混合斑

根据阴道液蛋白 SDS-PAGGE 谱型的器官特异性,认定了保存于—30℃、4℃达3年及室温达9年的阴道液斑和保存于室温2个月的混合斑,初步应用于案例鉴定。     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅲ)——应用“Myo”DNA探针进行混合斑中精液的个体认定

本文利用蛋白酶K、SDS对精液和阴道液、精液和血液的混合斑进行前处理,除去女性阴道脱落上皮细胞和血液细胞成份获得精子。提取精子DNA,用“Myo”小卫星DNA探针杂交进行DNA指纹检验,获得了高度多态性的精子DNA指纹图谱,与同一个体血液DNA指纹图谱比较完全一致,实现了混合斑中精液来源的个体认定。在对20多起强奸案例混合斑的实际应用中,成功地认定了强奸罪犯。     

用酶标抗体免疫组化法测定性交后阴道内容物中精子的ABO血型

应用间接酶标抗体免疫组化法测出了53例新鲜精液、5例陈旧精斑及40例阴道分泌液中的精子与阴道脱落上皮细胞的ABO血型,30例精子与不同血型分泌型阴道分泌液孵育,未发现精子吸附阴道液中血型物质的现象,同时发现人类睾丸曲精细管中部份生精细胞、精子细胞,精子;直细精管部份上皮细胞、精液、精子;睾丸网大部份上皮细胞及副睾管中的精液与精子均含ABH抗原,故认为精子上的ABH抗原主要是精子固有抗原,13例性交后阴道内容物中精子的ABO型测定结果:7例与供者血型吻合,6例不吻合。6例中5例从O型精子中测出了女方分泌型阴道分泌液中的A或AB物质,1例B型精子未测出B及H抗原,文中对这种现象进行了讨论。     

ABO genotyping by polymerase chain reaction.

ABO blood group system's genotyping by polymerase chain reaction in genomic DNA level is developed. The positions of nucleotide 258 and 700 of cDNA from A transferase were used to distinguish A, B, and O alleles by restriction enzyme digestion. To identify the 258th nucleotide, a 199- or 200-bp DNA fragment was amplified by PCR and digested with Kpn I. For the 700th nucleotide, a 128-bp PCR amplified fragment was designed and digested with Alu I. By examining the DNA fragment digested patterns, ABO genotypes were easily determined. Results obtained using this method on 20 ABO-known peripheral blood samples showed that this new technique could provide accurate ABO genotype. Biologic forensic samples, such as, blood stains, saliva stains, semen stains, hair, bone tissue, and semen contaminated with vaginal secretion were also successfully typed. This rapid, sensitive and reliable method should be applicable not only in forensic identification but also in medical examination.     

应用抗人精液单克隆抗体检验混合斑中精液成份的ABH血型物质

用本文报道的方法检测了123份混合斑检材（新鲜混合斑60份，陈旧混合斑63份），对保存在一年内的混合斑中精液成份中的血型物质检出率可达100％。     

人类精子ABO血型抗原的间接免疫荧光研究

应用间接免疫荧光技术,对40份精子标本进行 ABO 血型抗原检测。A 型人精子上存在 A 抗原;B 型人精子上存在 B 抗原;AB 型人精液中,一部分精子带有 A 抗原,另一部分精子带 B 抗原。各血型人的精子均有 H 抗原。精子血型抗原为本身所固有,并非来源于精浆。不同人的精子血型抗原含量各不相等,与其供体是否为分泌状态或强弱无直接关系。精子 ABO 血型抗原主要存在于精子的颈部和顶体等区域。     

用等电聚焦酶免疫分析法检测人类精斑GC表现型

本文用IEF结合使用过氧化物酶标记第二抗体的酶免疫分析法检测了17名键康成年男性的精液(斑)和唾液斑及10名健康成年女性的阴道分泌液中的GC表现型。结果发现17份人类精斑均可测出三种GC蛋白普通表现型。在10份阴道液中测出一份样本的GC表现型,3份样本有不甚清楚的GC带,不能定型,其他样本均无GC带。17份唾液斑未测出GC。本法的灵敏度(0.675ng)比文献报道的用过氧化物酶标记第二抗体的酶免疫分析(5.6ng)高。     

A sandwich enzyme-linked immunosorbent assay for ABO blood typing of semen by using anti-p 84 monoclonal antibody as a marker of blood group substance in semen

A blood group substance (BGS), a protein with ABH antigenic activity, was isolated from human seminal plasma and designated as p 84 (Sato, 1995). We have developed a method for determining the ABO blood type of semen by performing a sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in which p 84 is captured with an anti-p 84 monoclonal antibody, and evaluated the specificity and sensitivity of this method. Although BGS activity was detected in semen sensitively by this method, it was not detected in saliva, urine, breast milk, blood or vaginal secretions. Since the concentration of p 84 in semen was independent of the secretion status, the status can be determined as non-secretor when p 84 but not BGS activity was detected. To determine the stability of BGS activity on p 84, dried stains of semen on filter paper were kept at 4, 26, and 37 degrees C for 8 months, 2 years and 1 month, respectively, and their BGS activities were examined. After 8 months at 4 degrees C, over 60% of the original BGS activity was recovered from the stain. The activity could be detected even from a square as small as 0.25 by 0.25 cm. After 1 month at 37 degrees C and 2 years at 26 degrees C, 31 and 20% of the BGS activity, respectively, still remained. It could be detected from the pieces of 1.0 by 1.0 cm and 0.5 by 0.5 cm squares, kept for 1 month at 37 degrees C and 2 years at 26 degrees C, respectively. Finally, semen was mixed with saliva or blood at varying volumetric ratios and used for the sources of dried stains. The BGS activity of p 84 could be detected in the stains until the ratio between semen and saliva or blood reached 1:4. We conclude that this sandwich ELISA offers a more sensitive and specific method for determining the ABO blood type of semen samples obtained from sexual assault victims than existing methods, such as the conventional absorption-elution and classical hemagglutination-inhibition tests.