ABO基因型检验及其法医学应用研究

目的采用ＰＣＲ技术对ＡＢＯ血型系统进行基因型检验。方法选择最佳扩增条件进行四引物复合扩增,用限制性内切酶ＫｐｎＩ和ＡｌｕＩ分别酶解扩增产物,电泳分离、银染显色法检验ＡＢＯ基因型。结果对２７０例血斑、２０例混合斑、２０根毛发（有毛囊）、１２份唾液斑等不同的生物检材进行了分型,与血清学方法检验结果相符。结论该方法能够应用于法医学的检验     

应用免疫酶组化法测定混合斑中精子ABO型

应用免疫酶组化法测定混合斑中精子ＡＢＯ型李荣华，吴梅筠华西医科大学法医血清学教研室（６１００４１）精液与阴道液混合斑的检验，一直是强奸案件中的棘手问题之一。传统的中和试验由于不能排除阴道分泌物中ＡＢＨ物质对精液ＡＢＯ血型测定结果的干扰，个人识别能力有...     

ABO血型异常遗传的亲子鉴定案

ＡＢＯ系统是人类发现最早的血型系统 ,其血清学分型简便、稳定、可靠 ,一般ＡＢＨ抗原检测结果都符合孟德尔遗传规律 ,因此ＡＢＯ血型系统是亲权鉴定中使用得最早、最多、最经典的多态性遗传标记［１］。本文报道一例ＡＢＯ血清学分型结果与孟德尔遗传规律矛盾、但ＤＮＡ多态性分析结果却不排除亲权关系的亲子鉴定案例。１简要案情一出生后三个月的男孩因需要输血而检验出其血型为Ａ型 ,同时检出父亲的血型为Ｂ型 ,母亲的血型为Ｏ型。该对夫妇被告知他们之间不会生出Ａ型的小孩 ,逐怀疑医院换错婴儿 ,而要求进行亲子鉴定。２检验结果分别抽…     

荧光标记复合扩增对中国汉族群体8个STR基因座的多态性

应用ＳＴＲ复合扩增技术对ＦＢＩ推荐的 8个ＳＴＲ基因座 ,即Ｄ5Ｓ818,Ｄ13Ｓ317,Ｄ7Ｓ82 0 ,Ｄ16Ｓ539,ｖＷＡ ,ＴＨ0 1,ＴＰＯＸ ,ＣＳＦ1ＰＯ ,进行荧光复合扩增 ,其产物经ＡＢＩ377ＸＬ序列分析仪检测 ,对 110名中国汉人无关个体进行频率调查 ,为大规模ＤＮＡ数据库的建立提供有益探索。1　材料和方法1 1　实验材料无关个体血样来自本室日常检案积累 ;扩增及检测试剂购自美国ＰＲＯＭＥＧＡ公司 ;ＡＢＩ377ＸＬ序列分析仪。1 2　实验方法〔1、2〕　1 2 1　ＤＮＡ模板的制备　 5%ｃｈｅｌｅｘ10 0 (Ｂｉｏ ｒａｄ)2 0 0ｍｌ处理 ,56℃孵…     

ABO血型的基因型与法医学应用

ＡＢＯ血型系统是 1 90 1年由Ｌａｎｄｓｔｅｉｎｅｒ首先发现的第一个人类遗传标记。由于ＡＢＯ血型抗原不仅存在于组织细胞 ,也存在于体液中 ,抗原相对稳定 ,保存较持久 ,分型已标准化 ,群体资料丰富 ,故在法医学上一直有着重要的地位。传统的ＡＢＯ分型采用血清学方法 ,但其抗原属糖蛋白易失活 ,自然界中广泛存在类似的物质 ,都会影响检验效果。因ＤＮＡ特殊结构 ,使得稳定性比蛋白更高 ,是携带遗传信息的物质 ,因此 ,从ＤＮＡ水平对ＡＢＯ基因进行分型更能准确地反映个体的差异 ,尤其是ＰＣＲ技术对微量检材的检验 ,ＡＢＯ血型系统的分…     

检验A、B、H血型物质指示红细胞的研制

采用单克隆抗Ａ、抗Ｂ、抗Ｈ抗体致敏人Ｏ型红细胞 ,所获得的检验人体液 (斑 )的Ａ、Ｂ、Ｈ指示红细胞 ,为检验人体液斑迹的ＡＢＯ血型提供了一种新的试剂。在制备过程中 ,抗体载体的选定、致敏所需抗体的浓度和致敏环境的酸碱度都直接影响指示红细胞的凝集效价。经过反复实验探索 ,选择出了理想的条件。1　材料与方法1 1　人Ｏ型红细胞的醛化取多人份混合的人Ｏ型红细胞 ,用生理盐水充分洗涤后 ,将压积红细胞用 4℃预冷 ,含 0 5%戊二醛的ＰＢＳ缓冲液稀释成 10 %的悬液 ,作用 30ｍｉｎ后 ,2 0 0 0ｒ/ｍｉｎ离心 2 0ｍｉｎ ,弃上清液 ;将压…     

武汉汉族群体FOLP23、TPOX及GABRB15基因座遗传多态性研究

目的 研究ＴＯＬＰ２３、ＴＰＯＸ及ＧＡＢＲＢ１５的多态性及法医学应用价值。方法 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离及银染带技术对武汉地区汉族２００例无关个体作ＦＯＬＰ２３、ＴＰＯＸ及ＧＡＢＲＢ１５位点分型调查。结果 ＦＯＬＰ２３、ＴＰＯＸ及ＧＡＢＲＢ１５位点分别检出６、５和５个等位基因,获得汉族人群基因频率分布。三位点基因型频率分布符合Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡。位点杂合度分     

直接扩增法在血痕、肋软骨和唾液检材中的应用

目的采用Identifiler Direct PCR试剂盒直接扩增法进行棉签擦拭血痕、肋软骨和烟蒂唾液斑DNA分型检验,并评价其应用价值。方法收集棉签擦拭血痕、烟蒂各20份,肋软骨10份,采用Identifiler Direct PCR试剂盒进行直接扩增及分型检验,以相同检材采用磁珠法/Chelex-100法提取模板DNA后扩增检验结果作为对照,对两组所得结果进行比较分析。结果棉签擦拭血痕和肋软骨一次检测完整分型率均为100%,分型结果与对照组一致;烟蒂上唾液斑有2份检材第一次未能完整分型,调整方法再次检验后获分型成功。结论实际检案中的棉签血痕、肋软骨和烟上唾液斑,采用直接扩增法检测,方法简单、快速、稳定、检材用量小,可在实际检案中选择使用。     

DNase-I纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA

目的研究脱氧核糖核酸酶I(DNase-I)纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA的方法在法医学中的应用。方法收集79份性犯罪案件混合斑检材,分别用DNase-I纯化结合碱性裂解法和差异裂解法提取精子DNA,采用STR荧光标记复合扩增体系进行16个STR基因座分型,并比较检验结果。结果应用DNase-I纯化结合碱性裂解法提取精子DNA,64例检材分型成功;应用差异裂解法提取精子DNA,57例检材分型成功;两种方法比较结果存在显著性差异(P=0.039),DNase-1纯化结合碱性裂解法提取精子DNA的STR分型成功率更高,成本低廉。结论DNase-I纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA可提高检验成功率,操作简便,快速,易于自动化,适于法医学个体识别鉴定。     

DNase-Ⅰ纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA

目的研究脱氧核糖核酸酶I(DNase-I)纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA的方法在法医学中的应用。方法收集79份性犯罪案件混合斑检材,分别用DNase-I纯化结合碱性裂解法和差异裂解法提取精子DNA,采用STR荧光标记复合扩增体系进行16个STR基因座分型,并比较检验结果。结果应用DNase-I纯化结合碱性裂解法提取精子DNA,64例检材分型成功;应用差异裂解法提取精子DNA,57例检材分型成功;两种方法比较结果存在显著性差异(P=0.039),DNase-1纯化结合碱性裂解法提取精子DNA的STR分型成功率更高,成本低廉。结论DNase-I纯化结合碱性裂解法提取混合斑精子DNA可提高检验成功率,操作简便,快速,易于自动化,适于法医学个体识别鉴定。