小鼠骨骼肌细胞核DNA降解与死亡时间的关系

目的　监测小鼠死后骨骼肌核内DNA降解的情况 ,探讨死后细胞核DNA降解的一般规律。方法　建立小鼠死亡模型 ,在死后 72h内 ,以 12h的间隔取骨骼肌样本进行单细胞凝胶电泳 ,在荧光显微镜下测量彗星图像 ,并作统计学分析。结果　机体死后 ,骨骼肌细胞在电泳图像上出现了明显的彗星形拖尾 ,L/W比值随死亡时间而逐渐增大 ,二者呈一定的线性关系。结论　单细胞凝胶电泳技术可以应用于早期死亡时间推断。     

单细胞凝胶电泳分析死后小鼠骨骼肌细胞核DNA降解

目的研究小鼠死后骨骼肌细胞核DNA降解与死亡时间的关系。方法应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术结合荧光显微镜和专业的计算机图像分析技术,测定111只小鼠在死后72h内不同时间点骨骼肌细胞核DNA电泳形状的8项参数值,所得数据进行统计学分析。结果在个体死亡72h内,“彗星”的尾DNA含量比例、尾长、尾矩、O live矩、尾面积数值随时间的延长而增大;而“彗星”的头半径,头DNA含量比例和头面积数值则随时间的延长而减小。经对每个参数的测量值进行多项式运算,获得DNA降解趋势的二项式回归方程(P<0.001)和多元回归方程(P<0.0001),且均具有极显著性意义。结论在死后一定时间内,小鼠骨骼肌组织核DNA降解随死后经过时间的变化而呈一定规律性变化,DNA降解与死亡时间之间呈线性相关。     

死后组织DNA变化与死亡时间关系的研究

为调查死后组织DNA含量变化与死亡时间的关系,本文采用流式细胞仪对死后0～96小时(0～96hourpostmortem,hpm)大鼠的骨骼肌、脾、肾细胞DNA含量进行分析,结果表明,各组织显示了随死后间隔时间延长,含碎片DNA细胞增多,含完整DNA细胞减少的趋势;DNA降解系列组方图分析结果表明,脾组织降解速度明显快于肾和骨骼肌组织;骨骼肌在制成单细胞悬液过程中的人为损伤,可造成DNA提前降解.     

肌原纤维小片化指数与人体死亡时间的相关性

目的研究死后人体骨骼肌肌原纤维小片化指数(myofibril fragmentation index,MFI)与死亡时间的关系。方法采用双缩脲法测定室温下死后不同时间人体右肱二头肌和右股四头肌的全蛋白浓度,紫外分光光度计测定540 nm处的吸光度,得到骨骼肌MFI值。以死亡时间为自变量(x),MFI值为因变量(y),进行回归分析。结果在死后早期,人体骨骼肌MFI值随着时间延长逐步增高,之后趋于平缓,以12 h内最为显著。死后0~12 h,右肱二头肌回归方程为y=32.660+3.227 x(r=0.987 9),右股四头肌回归方程为y=32.380+3.495 x(r=0.983 9)。结论 MFI与死亡时间相关性强,结合法医实践经验,对于死后早期(尤其12 h内)死亡时间推断具有良好的应用前景。     

大鼠骨骼肌细胞DNA含量变化与死亡时间关系的研究

目的大鼠骨骼肌细胞DNA的定量研究及其方法探讨。方法使用DNA特殊组化染色和计算机图象分析技术 ,对死后不同时间 (0～ 96h)、不同环境温度下的大鼠骨骼肌细胞核DNA含量变化进行分析。结果骨骼肌细胞在死后 12h出现核着色变淡、着色面积变小 ,并随死后时间延长呈持续性下降 ,最终完全消失。结论死后DNA降解率与死后时间呈线性规律关系。图像分析技术对骨骼肌DNA含量测定具有良好的实际应用前景     

蛋白质降解与死亡时间推断的初步研究

目的观察大鼠肝脏肌动蛋白、微管蛋白在死后不同时间的降解情况,为死亡时间的推断寻找客观依据。方法大鼠麻醉致死后置于21℃温度控制系统模拟死后18d的改变,在不同时间点剪取肝脏组织抽提蛋白质,利用westernblot技术检测肌动蛋白、微管蛋白的降解变化并对产物进行半定量分析。结果大鼠肝脏肌动蛋白在死后8d尚可检测,死亡10d后检测不到;在死后2d,α微管蛋白已检测不到,但可检测到β微管蛋白,死亡4d后,β微管蛋白也检测不到。结论肌动蛋白、微管蛋白的死后降解存在差异,其在肝脏组织保存时间的不同可作为死亡时间推断的参数。     

应用DNA3’末端转移推测死亡时间

目的根据机体死后组织细胞DNA降解规律,研究其与死亡时间之间的关系.方法SD大鼠处死后,在不同死亡时间段取肝、肾、脾组织提取DNA.根据DNA3′末端转移的方法(TdT法)将dUTP结合到DNA的3′末端,检测反应剩余的dUTP量,从而推测机体死后不同时间段DNA的降解情况.结果经对剩余dUTP检测发现,dUTP的剩余量随死亡时间延长而减少,说明DNA降解与死亡时间存在一定的关系.结论根据机体死后DNA降解规律可用于早期死亡时间的推测.     

大鼠肝脏和骨骼肌DNA降解与死亡时间的关系

目的　本研究的目的是了解大鼠肝脏和骨骼肌DNA降解与死亡时间的关系。　方法　实验选择 2 1只大鼠 ,分为 7组 ,每组 3只 ,一组即时处死作为对照 ,余六组处死后 ,分别于死后 2、4、8、12、2 4、36小时分别取肝脏、骨骼肌各一块 ,福尔马林固定 ,切片 ,Feulgen染色法染色 ,自动图像分析仪测量 ,统计学处理数据。　结果　DNA降解的幅度在不同时间存在不一致的现象。　结论　肝细胞DNA的降解与死亡时间在统计学上存在回归拟合关系     

大鼠死后骨骼肌细胞核DNA降解的彗星电泳检测

目的探讨彗星电泳检测大鼠死后骨骼肌细胞核DNA降解碎片与死后时间的关系。方法建立SD大鼠死亡模型,18只雌性大鼠断颈处死,在25.1℃分别于死后6、12、24、36、48、60提取大鼠骨骼肌组织进行彗星电泳,荧光显微成像系统采集图像,同时获取多个分析参数(Comet4.0),并进行统计学处理。结果在死后6～48h,彗星尾长(TL)在死后各时间点的均数依次为11.56±0.10、17.76±0.18、18.82±0.21、21.68±0.18和23.33±0.07;Oliver尾矩(TM)在各时间点的均数依次为1.63±0.46;2.12±0.90;2.15±1.03;2.22±0.76;3.35±0.80;尾DNA(TDNA)在各时间点的均数依次为29.57±8.42;32.36±10.92;30.11±12.55;37.81±12.03;54.76±8.60。结论细胞DNA降解随着死后时间的延长而增加;彗星尾长用于推断死后时间优于Oliver尾矩和尾DNA。     

大鼠肝脏和骨骼肌DNA降解与死亡时间的关系

目的本研究的目的是了解大鼠肝脏和骨骼肌DNA降解与死亡时间的关系 . 方法实验选择21只大鼠,分为7组,每组3只,一组即时处死作为对照 ,余六组处死后,分别于死后2、4、8、12、24、36小时分别取肝脏、骨骼肌各一块,福尔马林固定,切片,Feulgen染色法染色,自动图像分析仪测量,统计学处理数据. 结果 DNA降解的幅度在不同时间存在不一致的现象. 结论肝细胞 DNA的降解与死亡时间在统计学上存在回归拟合关系.     

大鼠死后心肌骨骼肌细胞肌动蛋白变化及与死亡时间的关系

目的　探讨大鼠死后心肌骨骼肌细胞肌动蛋白的变化及其与死亡时间的关系。方法　采用免疫组化S P法和IBSA图像分析系统 ,观测大鼠死后不同时间心肌骨骼肌抗肌动蛋白单克隆抗体 (HHF3 5 )染色变化。结果　在大鼠死后 5 4h内 ,心肌骨骼肌呈不同程度的HHF3 5缺染 ,其面积随死后时间的延长而增大。经对IBSA图像分析数据进行方差分析 (F心肌 =5 88 2 7,F骨骼肌 =3 5 1 2 5 ,P <0 0 5 ) ,具有显著性差异 ;经逐步回归分析 (r心肌 =0 943 ,r骨骼肌 =0 95 8,P <0 0 5 ) ,具有正相关关系。所建方程y心肌 =-3 0 5 68+1 0 0 3x1,y骨骼肌 =-2 4 897+0 986x2 (X为HHF3 5缺染面积均数 )具有统计学意义。结论　在一定时间内 ,大鼠死后不同时间心肌骨骼肌细胞HHF3 5缺染面积 ,随死后时间的延长而增大。     

Postmortem investigation of serum myoglobin levels with special reference to electrical fatalities

The serum myoglobin levels of 58 fatalities were investigated with special reference to correlations of the myoglobin-concentrations with the postmortem interval, the site of blood sampling and the cause of death (especially concerning death caused by electric current). An increase of the myoglobin values with the passage of postmortem time is obvious. The topographical sampling site plays an important role; the highest concentrations are found adjacent to striated muscles (i.e. in blood from the heart or the femoral vein). There was no significant correlation of myoglobin values and death by electric current.     

The effect of electricity on the myoglobin content of the human heart and skeletal muscles

The myoglobin content of heart muscles was examined by the indirect immunoperoxidase method in eight autopsy cases where death was due to electricity. Seven cases showed a considerable release of myoglobin from the myocardial fibers. In experimental comparison, the heart muscles and skeletal muscles from nine cases where death was natural were exposed to electricity, and considerable deletion of myoglobin was also demonstrated. We believe that the findings of ischemia or thermal effects due to electricity were the cause of the release of myoglobin. Because the demonstration of myoglobin is preferable to estimation of the damaged areas of muscles by hematoxylin-eosin staining, this examination may be more advantageous in forensic examination of death by electricity.     

Fatal malignant hyperthermia--delayed onset and atypical course

A case of malignant hyperthermia (mh) in a 27-year-old man is described. In a first anaesthesia using isoflurane and succinylcholine, the end-tidal CO(2) rose from 39 to 49 mmHg 2.75 h post-intubation and the body temperature rose to 39.8 degrees C 14 h post-intubation but was normal again the next day. In a second anaesthesia using the same medication, the maximal end-tidal CO(2) was 44 mmHg and the body temperature rose to 39 degrees C after 9 h. After 4 days, the fever rose to 40 degrees C, and to 42 degrees C when death occurred 10 days after the second anaesthesia. Masseter spasms or muscle rigidity were never present. According to the death certificate, death was due to multi-organ failure from sepsis. At autopsy, the skeletal muscles were pale and oedematous. Histology demonstrated focal necroses in the skeletal muscles, shock kidneys with myoglobin excretion and myoglobin clots in small blood vessels of the lungs. Hence, the postmortem diagnosis "malignant hyperthermia" was established but accusations of medical maltreatment were rejected because of the atypical and protracted clinical course and because uncharacteristic signs of malignant hyperthermia were attributable to the clinically suspected sepsis.     

大鼠死后肌动蛋白降解与死亡时间的相关性

目的观察大鼠死后不同时间心肌、肝、脾、肺、肾、脑和骨骼肌肌动蛋白（actin）的降解规律,为晚期死亡时间（postmortem interval,PMI）的推断寻找客观指标。方法28只SD大鼠随机分为7组,经机械性窒息致死后．分别置于20℃恒温箱内,于0、24、48、72、96、120和168h后剖取以上器官,应用免疫印迹技术检测各组织内actin的含量,SPSS11．5软件对所得数据进行方差分析。结果大鼠死后上述各器官actin含量均随PMI的延长而逐渐下降,与PMI相关,决定系数（R2）均在0．75以上。但actin在上述各器官内的降解速度有显著差异（P〈O．05）,在脑组织中降解速度最快,其余依次为肺、脾、肝、肾、心肌和骨骼肌。结论尽管大鼠死后心肌、肝、脾、肺、肾、脑和骨骼肌actin的降解规律具有组织差异性,但是actin在上述组织中的含量变化与PMI相关．有助于较晚期PMI的推断。     

单细胞凝胶电泳检测大鼠死后肝细胞核DNA降解

目的应用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测大鼠死后肝细胞核DNA降解规律,分析与死亡时间的关系,为早期死亡时间的推断提供新的方法。方法在大鼠死后30h内,每隔3h取肝组织样本进行单细胞凝胶电泳,用共聚焦显微镜摄取彗星图像,应用彗星图像分析软件(IM I1.0)进行图像分析,并作统计学分析。结果死后大鼠的肝细胞在电泳图像上出现明显的彗星形拖尾,其尾长(TL)、尾矩(TM)在一定的时间范围内(0~18h)随死亡时间的延长而逐渐增大,二者均与死亡时间(PM I)呈现一定的相关回归关系。结论单细胞凝胶电泳技术可应用于早期死亡时间的推断。     

The electric conductivity indices of the skeletal muscles in the dynamics of the posttraumatic period]

In order to determine the time of inflicting mechanical trauma, values of electric conduction of skeletal muscles were measured taking into consideration postmortem interval and temperature of an object tested. Electric conduction of traumatized and intact muscles was determined within 0, 6, 12, 24, 48 and 72 hr of posttraumatic period directly after death (the 1st series of observations) and in different postmortal periods. The results of investigations disclose presence of certain time-course changes in parameters of electric conductivity of skeletal muscles depending on time of posttraumatic period.     

Differences in morphological age-related dental changes depending on postmortem interval.

Morphological methods for age estimation from teeth have been developed and applied to samples without taking the postmortem interval into consideration. We studied differences in morphological age-related changes between fresh extracted teeth and teeth from human skeletal remains in order to develop appropriate dental age estimation methods according to the time after death. Forty-three permanent teeth from dental patients were compared to 37 teeth obtained from human skeletal remains with a postmortem interval from 21 to 37 years. Morphological age-related changes were investigated by measuring variables on intact and half-sectioned teeth. A new computer assisted image analysis procedure to avoid subjectivity was developed to measure variables in sectioned specimens. Dental color, translucency length, attrition, cementum apposition, and secondary dentin showed higher values in teeth from human skeletal remains than in fresh extracted teeth. Variables obtained by morphometric analysis of computer-generated images (tooth length, tooth width, root length, and root area) showed higher values in fresh extracted teeth than in teeth from skeletal remains. The postmortem interval affects age-related morphological changes, and therefore different methods should be used for teeth of unknown postmortem interval.     

大鼠死后心肌和肺脏微管蛋白降解规律的初探研究

目的探讨大鼠死后心肌和肺脏微管蛋白（tubulin）的降解规律与死亡时间（PMI）的关系。方法大鼠经切断股动脉致失血性休克处死后，置于RXZ智能型人工气候箱内，实验条件设定为：20℃恒温，湿度50％。分别于大鼠死后0、1、2、3、5和7d时剖取心肌和肺脏组织，应用Western-Blot法检测心肌和肺脏tubulin的含量，并对所得数据进行统计学分析。结果Tubulin在正常大鼠心肌和肺内高表达，死后1d时其含量已开始下降，至死后7d时仍可检测到微管蛋白的存在，但tubulin在肺脏内的降解速度快于心肌。两种组织内tubulin含量随PMI变化的回归方程及相关系数分别为：心肌Y=-1726．Ix＋14083，r=0．9684；肺脏Y=-1439．89x＋12041，r=0．9808。结论大鼠死后心肌和肺脏tubulin的含量逐渐减少，与PMI具有相关性。