用基质分散固相萃取法用于人血中有机磷农药检测

目的建立基质分散固相萃取方法用于检测人体血液中有机磷农药。方法利用C18、PSA和石墨化碳为吸附剂,采用基质分散固相萃取与GC/MS法相结合检测人体血液中甲胺磷、敌敌畏、甲拌磷、乐果、叔丁硫磷、甲基对硫磷、马拉硫磷等8种有机磷农药。结果 8种有机磷农药分离效果良好,回收率在71.46%～96.09%之间,检出限在0.26～4.52ng之间。结论基质分散固相萃取方法提取血中有机磷农药操作简单、快速准确。     

有毒生物碱阿托品的检验现状

阿托品是一种抗胆碱药,可用于有机磷农药中毒的抢救,但因其本身具有毒性和致幻性,常被滥用并导致中毒甚至死亡,又可被添加至可卡因等毒品中。目前,阿托品的主要检测方法有气相色谱、液相色谱和毛细管电泳,本文综述了这几种方法检测阿托品的现状。     

汉族与藏族群体PON基因座遗传多态性

有机磷农药是广泛应用于农业生产的有效杀虫剂 ,也作为杀菌剂或杀鼠剂与人类日常生活密切相关 ,常引起各种性质的中毒事件发生。对硫磷(parathion)是具有代表性的剧毒有机磷农药 ,其在体内生成对氧磷 (paraoxon ,POX) ,使毒性进一步增加[1] 。人肝脏合成的对氧磷酶 (paraoxonase ,PON)可分解对氧磷 ,并降低其毒性。由于PON基因的突变 ,编码合成具有多态性的两种同工对氧磷酶 ,使酶的分解活性存在差别[2 ] 。PON基因座多态性很有可能成为法医学个体识别和亲子鉴定的一个有价值的遗传标记 ,在中毒程度鉴定分析中也有参考价值。鉴于国内还…     

抗体芯片竞争抑制法检测尿液中吗啡含量

目的建立抗体芯片竞争抑制法检测尿液中吗啡含量的方法。方法将吗啡单克隆抗体固定在用琼脂糖包被的芯片上,与含有吗啡的尿液检材和Cy3荧光标记-吗啡-BSA复合物进行竞争抑制反应,共聚焦扫描仪采集反应图像并进行分析。结果吗啡单克隆抗体及Cy3-吗啡-BSA的最佳浓度是31.25μg/m l、12.50μg/m l,检测线性范围0.01~10ng/m。回收率在91.2%~109.2%之间,尿液检测限为0.02ng/m l。甲基苯丙胺、安非他明与吗啡抗体之间无交叉反应,与可待因有一定的交叉反应。结论抗体芯片竞争抑制法检测尿液中的吗啡含量具有灵敏度高,特异性好、操作简单、高通量等优点,可用于法医毒物检测、戒毒效果监测。     

有机磷农药薄层分析选用显色方法应注意的问题

本文介绍作者对薄层分析中三种不同显色法的显色效果与有机磷农药化学性质关系的一些体会。一、硫代磷酸酯类显色方法硫代磷酸酯类显色剂（即：氯化钯法、二氯配氯亚铵－溴法等）是有机磷农药薄层分析中最常用的显色方法。其显色原理是通过试剂对农药成为中的硫代磷酸酯的化学反应而显色。然而某些有机磷农药可在空气中氧化或在体内某些酶的作用氧化下，硫代磷酸酯中的硫将被氧取代，此时，采用检验硫代磷酸酯的显色方法，就不能检出。应当再选择乙醇－氢氧化钠显色确定有否硫代磷酯。二、对硝基酚显色法本法系对某些有机磷农药的特有官能团…     

水中微量有机磷农药的检验

<正> 有机磷农药是目前广泛应用的杀虫剂。司法检验常遇到利用有机磷农药对水井,水池,鱼塘等场所进行投毒的案件,这类案件送检的水样一般含量甚微。本文介绍利用Sep—Pak C_(18)小柱富集水中几种微量有机磷农药,用毛细管气相色谱法检测。     

生物检材中有机磷农药的检验概述

从有机磷农药的性质、生物检材中有机磷农药的提取净化和分析检测等方面概述了生物检材中有机磷农药的检验研究现状。     

植物酶在解剖组织中有机磷、氨基甲酸酯农药检测中的应用

本文报导了有机磷和氨基甲酸酯检测的一个新的酶抑制法.该法基于有机磷和氨基甲酸酯化合物对植物酶水解底物2,6-二氯乙酰靛酚的抑制作用.本法简单,快速,适于农药中毒的现场检验.其最小检出量分别为0.2～1μg/μ1和1～2μg/ml.     

鱼塘水中常见有机磷农药的测定

<正>建立鱼塘水萃取和分析有机磷农药的方法，用于鱼塘水、井水、地面水、地下水及工业废水中的有机磷农药测定。 1 试剂与仪器 1．1 试剂 标准品 甲胺磷、DDV、氧乐果、甲拌磷、乐果、二嗪农、久效磷、杀螟松、马拉硫磷、倍硫磷、对硫磷、杀朴磷、乙硫磷。以上标准由公安部物证中心提供。分     

用荧光光度法测定人尿硒含量

硒和硒化合物为有毒物质 ,进入机体后 ,主要在体内与巯基酶结合 ,抑制体内胱氨酸 ,蛋氨酸等生化过程。体内过量的硒与低分子的谷胱甘肽、辅酶Ａ、辅酶Ｑ结合后 ,使这些细胞代谢过程的辅酶抑制[1] 。硒主要经尿排出体外 ,正常人尿中含有微量硒。为检测硒和硒化合物中毒 ,本文用荧光光度法测定人尿硒含量 ,取得了较好的检验结果 ,为硒化合物中毒尿硒含量测定提供检验依据。1　材料和方法1 1　主要仪器和试剂Ｆ 30 0 0荧光分光光度计 (日本 ) ,聚四氟乙烯高压消解器。硒标准溶液 :称量金属硒 ,用分析纯硝酸加热溶解 ,制备成 1ｍｇ/ｍｌ硒标准溶…     

QuEChERS提取法提取血液样品中常见毒物的应用

正QuEChERS提取法是基于分散固相萃取法的原理,于2003年由美国农业部Anastasisdes和Lehotay提出的一种用于提取水果、蔬菜样品中有机磷农药的前处理方法 ~([1-2])。后经不断改良,发现该方法不仅限于水果、蔬菜样品中有机磷农药的提取,还可以广泛应用到谷物、粮油、肉食中农药及其他药物的提取~([3]),而成为美国和欧盟等国家非常推崇的提取法。尽管该方法快速、简单、经济、高效、皮实、环保,但它在提     

毛干及自然脱落毛囊复合扩增Amel及13个STR基因座检验的实验研究

刑事案件案发现场往往会遗留有毛发。人为拔下的毛发 ,毛囊用常规方法一般可成功检见Amel及STR基因座 ,达到同一认定 ,毛干可进行mtDNA检验。自然脱落毛囊一般不能进行Amel及STR基因座检验。Barbaro等报道 ,通过增加循环圈数的方法分别扩增同一个单位点STR基因座 4～ 5次后 ,采用激光荧光仪检测 ,综合分析结果 ,可以确定 3～ 4cm长1根毛干Amel及 8个STR基因座 ,这种检测方法已用于实际案件检验[1] 。我们受该文启发 ,较为系统的研究了毛干及自然脱落毛囊复合扩增Amel及 13个STR基因座 ,报道如下。1　材料与方法1 1　检材及样本自…     

酶促试纸条测定唾液中乙醇含量的研究

生化酶促反应使试纸与含有乙醇的液体接触后显色,根据颜色的不同确定被测液体中的乙醇含量,依此研制出酶促试纸条。通过志愿者实验,同时收集血液和唾液, 比较酶促试纸条测定唾液中乙醇含量与顶空气相色谱检测血醇和唾醇的结果。考察酶促试纸条的影响因素。通过提高缓冲液浓度至0.6mol/L和减少乙醇氧化酶的量改进酶促试纸条,使相同乙醇浓度的酸碱两种唾液间的差异显著缩小。所研制的酶促试纸条具有成本低、操作简便、快速的优点。     

血液中64种常见有机氯菊酯类农药的快速筛查

目的建立人体血浆中64种有机氯菊酯类农药多残留的气相色谱（GC）快速筛查分析方法。方法空白人体静脉抗凝血用乙腈沉淀蛋白,乙酸乙酯∶环己烷（v/v,3∶1）进行液液萃取净化,使用HP-5色谱柱,采用气相色谱进行定性、定量分析。对方法进行优化并进行方法学评价。结果 64种农药在0.001~0.1μg/mL范围内线性关系均良好,相关系数在0.990 1~0.999 9之间。检出限在0.001~0.15μg/mL范围内,方法定量限在0.001~0.5μg/mL之间,回收率总体于80%~110%之间,相对标准偏差小于15%,方法检出限总体于0.01μg/mL以下,日内精密度在1.5%~11.5%之间,日间精密度在2.9%~13.9%之间。结论本文建立的人体血浆的农药多残留快速筛查测定法,符合农药残留分析方法的要求,可在相关研究和实践中选用。     

改良酶免疫技术检测精斑ORM_1型

血清类粘蛋白（orosomucoid，ORM），属人类血清a1球蛋白，分子量41kd。Tokita等（1963）[1]首次发现ORM遗传学多态性后，Yuasa等[2]应用等电聚焦成功检测ORM；和ORM；两座位产物[2]。Harada（1989）．、苟清（1993）等分别于1989年和1993年应用等电聚焦技术检测了精斑ORM；的表型[4,5]，在此基础上，本文作者对苟清等[4]的精斑ORM；型检测方法作了改进，采用类似Sonthern转移方法提高酶谱带转移效率，显色中用一抗和酶标二抗处理过程中增加震荡步骤，以提高抗体结合速率，缩短检测时间，提高检测灵敏度，获得满意效果，现报告如下…     

X染色体DXS101、HumDXS6807基因座初步研究

本文对200名浙江汉族无关女性个体分别进行DXS101和HumDXS6807基因座检测,为X染色体在法医学中的应用提供基础数据。1材料与方法1.1实验材料200名无关汉族女性个体的血样均来自浙江全省各地,系本实验室日常检案积累。1.2实验方法采用Chelex-100快速法[1]提取DNA。DXS101和HumDXS6807基因座引物,由上海生工生物工程公司合成[3,4];PCR扩增按参考文献[2],其中DXS101和HumDXS6807引物浓度分别为0.5mmol/L和0.3mmol/L。构,并按国际法医血液遗传学会DNA委员会推荐的命名原则进行命名[5]。产物检测方法参照文献[2],在ABI3100型基因…     

磁力搅拌超声乳化微萃取用于血清中有机磷农药的检测

目的将涡旋搅拌与超声乳化技术相结合,建立了磁力搅拌结合超声辅助乳化微萃取新方法。方法使用一套自制前处理装置,将所建立的方法应用于血清中的7种有机磷农药的前处理过程中,并联用GC/MS对其进行了检测。考查了影响方法萃取效率的若干因素,确定了最优条件:90μL甲苯作为萃取剂;磁力搅拌转速为200rpm;超声萃取时间为2 min。结果在此条件下,针对血清中的7种有机磷农药的相对回收率为83%~109%,RSD为3.5%~5.6%,检出限为0.08~1.6μg/L。结论该方法操作简便、快速、准确,适合于血清中有机磷农药的测定。     

衣服口袋中毒鼠强残留规律的研究

毒鼠强是剧毒杀鼠药,俗名424、又名鼠没命等,化学名四亚甲基二砜四胺,分子式C4H9N4O4S2,分子量240.6,呈稳定的封闭、多交叉环状结构,难溶于水、在常见有机溶剂中的溶解度也较小,代谢缓慢,有报道称毒鼠强在植物中可存在4年[1]。毒鼠强的检验研究报道较多,检验方法较为成熟,有GC法、GC/MS法、HPLC法等[2～5],毒鼠强的残留特性研究也有报道,如指甲中毒鼠强的检验等[6],但对可作为物证样本检测的衣服口袋中毒鼠强的残留特征还没有进行系统研究。在购置和使用毒鼠强过程中,行为人会选择方便、隐蔽的贮运方式,如放入衣服口袋就是最常用的携…     

人体组织/体液来源的法医学鉴定

生物检材的组织/体液来源鉴定是法医学检验的重要内容之一。法医学组织/体液鉴定的方法较多,无论是基于酶促反应或免疫学检测的传统鉴定方法,还是光谱法或近年来基于mRNA、microRNA或DNA甲基化差异的分子生物学组织鉴定技术,均各有特点。本文就各种法医学组织/体液鉴定方法的特点及其法医学应用价值作一简要综述。     

中国汉族和藏族CYP2E1基因RsaI/PstI基因座遗传多态性

CYP2E1(Cytochrome P450 2E1,CYP2E1)是二甲基亚硝胺D-脱甲基酶,它主要参与激活小分子致癌物如苯、四氯化碳和亚硝胺等,同时参与酒精的氧化代谢和产生自由基而启动脂质过氧化[1,2]。本文调查了CYP2E1 RsaI/PstI基因座在中国汉族和藏族群体中的频率分布,为法医学实践提供必需的基础数据。1材料和方法1.1样品162名无血缘关系健康中国汉族个体和119名藏族个体血液样品为中国医科大学法医学院法医血清学教研室保存的样品。1.2方法DNA制备按常规酚-氯仿法[3]抽提,冷无水乙醇沉淀法提取基因组DNA。引物合成按参考文献[4]给出的序列合成…