wiazrd clean up在混合斑DNA检验中的应用

目的 建立一种快速、简单、有效的混合斑DNA检验方法。方法 在100例检案中，利用wizard clean up直接对于精子消化液进行纯化浓缩。采用profiler plus试剂盒进行复合扩增，产物经ABI310基因分析仪检测。结果 从混合斑中成功获得精斑10个STR位点的DNA分型。结论 wizard clean up处理混合斑，能有效去除女性成份，得到精斑DNA进行分型。     

wizard clean up在混合斑DNA检验中的应用

目的建立一种快速、简单、有效的混合斑DNA检验方法。方法在100例检案中,利用wizardcleanup直接对精子消化液进行纯化浓缩。采用profilerplus试剂盒进行复合扩增,产物经ABI310基因分析仪检测。结果从混合斑中成功获得精斑10个STR位点的DNA分型。结论wizardcleanup处理混合斑,能有效去除女性成份,得到精斑DNA进行分型。     

混合斑中无精子精斑DNA检验的研究

在日常性侵犯案件的DNA 检验中,经常遇到无精子精斑的混合斑,按照常规的二步消化分离法提取DNA进行STR检验则难以成功,对于此类案件常常不予检验,不能充分发挥DNA在案件中的证据作用.籍针对此类案件以Y-Plex6试剂盒对无精子精斑及其混合斑进行了检验,取得成功,现报道如下:     

精斑确证试验中阳性对照样本的制作方法

在法医日常办案检验中,人们往往只关注可疑精斑、混合斑的最终DNA分型结果,而放松对精斑确证试验的质量要求。实际上,确证试验是必要和不可缺少的,其结果对侦查破案也有重要的价值,     

DNA IQTM System试剂盒在精斑检验中的应用

在性犯罪案件中,常常遇到混合斑的DNA检验,其中精子DNA的提取是检验的关键。本研究利用DNA IQTM System试剂盒在精斑检验中取得了良好的效果,现报道如下。     

一种改良的精斑涂片DNA检验方法

目的建立一种有效的精斑涂片DNA检验方法。方法以本实验室平时积累的91例精斑涂片为研究对象,采用chelex法提取,结合硅珠法纯化浓缩,提高DNA浓度后进行PCR扩增和STR分型。结果尽管涂片上精子量较少,但chelex法的DNA提取率较高,且硅珠法可以纯化并浓缩模板DNA,本文建立的方法兼具了这两种提取方法的优点,成功率较高。结论精斑涂片可以作DNA检验,在法医检案中具有较高的应用价值。     

染色混合精斑涂片DNA检验方法的研究

建立了染色混合精斑涂片DNA的提取方法,通过两步扩增的技术与垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染色法,成功检测了3个STR位点.结果显示,所有染色涂片DNA分型均与对照血样一致,苏木素-伊红(HE)染色比酸性复红-美蓝(Baecchi)染色对DNA的降解作用要小;涂片灵敏度检验可达到少于10个精子,且室温保存一年以内的涂片其灵敏度光显著差异.该方法简单、快速、可靠,为染色混合精斑涂片的PCR分析提供了新方法.     

X-STR在精斑混合检材检验中的法医学应用

目的应用X和Y染色体STR分析含有相同父系祖先个体DNA的混合检材。方法用差异裂解法提取混合检材基因组DNA,用PowerPlex 21试剂盒、GoldeneyeTM DNA身份鉴定系统27Y试剂盒、SureID?PathFinder扩增荧光检测试剂盒和GoldeneyeTM DNA身份鉴定系统17X试剂盒检测混合检材。结果根据X-STR和Y-STR单倍型成功鉴别具有相同父系祖先的嫌疑人,确定混合检材中存在4个男性个体DNA。结论 X-STR可以应用于检验精斑混合检材,结合Y-STR数据可区分相同父系男性个体,并辅助判断混合检材中男性个体的数量。     

PCR-RFLP法检验混合斑中精斑ABO血型及基因型

运用PCR-RFLP检验方法,对21份精斑样品、5份混合斑检材进行了检验,结果表明该方法能够很好地检测混合斑中精斑的ABO血型及基因型,有效地解决了非分泌型精斑的ABO血型及基因型,拓宽了混合斑中精斑的检验范围.     

Maxwell 16裂解纯化法提取陈旧精子DNA的应用

目的利用Maxwell 16裂解纯化法从保存8年以上陈旧精斑检材中获取精子DNA。方法 8份陈旧精斑检材采用Maxwell 16裂解纯化法提取精子DNA,并采用Powerplex○R21试剂盒进行复合扩增,产物用AB3130型遗传分析仪检测,结果与常规方法进行对比。结果成功获得8份陈旧精斑检材精子STR分型。结论差异裂解配合Maxwell 16裂解在陈旧精斑检材精子DNA检验中效果明显。     

精斑检材的3种提取方法比较

在日常检案中,精斑检材提取,常规应用Chelex-100法和酚/氯仿抽提法获得精子DNA。Chelex-100法耗时短,提取的精子的DNA量多,但所含的杂质也多,常影响扩增结果。酚/氯仿抽提法获得精子的DNA纯度高,但抽提过程中要用到有毒的化学制剂,消化、抽提耗时长,且抽提过程易造成DNA损失。本文直接应用磁珠法裂解提取精子DNA,获得优于Chelex-100法的高纯度的DNA,且把精斑的提取时间从酚/氯仿抽提法的2~3d缩减到7~8h。同时尝试了一步消化后的精斑检材,使用DNA自动工作站进行DNA提取,大大提高了办案效率。1材料与方法1.1精斑检材性犯罪案件中含…     

DNA检案中混合拭子提取方法的优化

正在强奸案中,阴道拭子作为犯罪证据,其重要性不可替代。通常精斑预实验阳性的阴道拭子检材即为混合斑的拭子,分离检验方法是采用差异裂解法(两步法)先除去精子外的其他细胞DNA,保留精子DNA[1],再通过DNA IQTMSystem提取精子DNA,获得纯精子的DNA图谱。但在实际操作中,混合斑中的阴道上皮细胞和精子DNA未作定量检测,使用该方法提取精子DNA时,往往会出现女性DNA去除不干     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅱ)——应用‘Myo’小卫星探针进行血斑、精斑、个体组织的个体认定

应用‘Myo’小卫星 DNA 探针,Southern 印迹杂交技术,对血斑、精斑、同一个体不同组织进行 DNA 指纹图分析,均获得清晰的图谱。同一个体的血斑与血液、精斑与精液以及不同的组织其 DNA 指纹图谱完全相同。可以根据斑痕或组织与嫌疑个体的血液或某一组织 DNA 的指纹图谱比对以做出同一认定。50μl 血液量的血斑、5μl 精液量的精斑可以获得清晰易辨的指纹图谱。五年的精斑、两年的血斑亦可做出与同源个体新鲜精液、血液完全一致的 DNA 指纹图谱。对杀人、强奸杀人、碎尸等不同案件的血痕、精斑、不同组织碎块进行了 DNA 指纹图检验,均做出了正确的个体认定。本方法的应用为我国法医物证检验提供了新的分析手段,使个体认定得以实现。     

混合斑中女性物质的PCR检验1例

１９９８年９月２７日,海阳大闫家镇村民某某将一１３岁小女孩骗至家中强奸。技术人员在现场提取了一团可疑的卫生纸,其上检出精斑。但犯罪嫌疑人拒不交代罪行,对于现场附有精斑的卫生纸,犯罪嫌疑人称是其与妻子发生性行为时所用。经常规ABO血型检验,受害人和犯罪嫌疑人妻子的血型均为“A”型;犯罪嫌疑人为“O”型,卫生纸上检出精斑且含“A”型物质。利用二步消化法分别将混合斑中的女性物质与精子DNA提取出来,进一步做DNA检验,经HUMTH０１犤AATG犦n、HUMFABP犤AAT犦n、pMCT１１８、apoB位点扩增、电泳、银染,结果…     

混合液（斑）中精液（斑）ABO血型的分离检验

混合液(斑)尤其是精斑与阴道分泌液斑混合斑中精斑ABO血型的检验,迄今为止,仍是法医物证学界的研究难题.本文根据收集到的文献,从方法学上综述国内外这一方面的研究现状.     

DNA扩增技术用于轮奸案检材的检验

轮奸案物证检材的精斑成份往往来自多个个体，检验时相互干扰，影响环节较多。所以，对轮奸案精斑检材的提取检验及结果分析有很多问题值得探讨[1]。本文作者根据检案实践，对轮奸案件的检材搜集、DNA提取、分型等方面应注意的问题进行分析。实例资料例1．1993年1月至1994年3月，某市发生十几宗少女被轮奸系列案，其中一宗案件现场搜到18份卫生纸团。经检验，11份有人精斑。先后抓获谭某、奥莱等10名嫌疑人，疑犯均否认与案件有关。经DNA检验，其中2份卫生纸上精斑APO、DIS80、P33．6、D17530、HUMTH01、FABP等6个位点基因型均与…     

应用EZ-tape胶带分离提取混合斑精细胞

在强奸案件中的DNA检验往往需要将混合斑中男性精子与女性阴道上皮细胞彻底分离.常规方法是剪取载体及其上面附着的混合斑迹一起进行差异裂解分离出精子细胞与女性阴道上皮细胞.在实践中,由于载体的介入可能会带来不利因素,加大了混合斑分离的难度,往往得不到男性精斑的DNA分型或者得到的是混合DNA分型.本研究根据混合斑的形成特点,利用EZ-tape胶带既不破坏载体又可多次粘取载体表面混合斑迹的特性,巧妙地克服了载体带来的诸多不利因素,提高了男性精子的检出率.     

利用Y-STR检验侦破杀人抛尸案1例

1 案例 1.1案情 某年7月22日8:00许,某县公安局110指挥中心接到群众报警,称某县一桥下水中发现一具被床单包裹并捆绑的男尸.尸体已高度腐败,取肋软骨备检.在层层包裹的床单夹层中,发现一小片卫生纸,经仔细观察发现纸上留有某种斑迹,遂对该斑迹进行血斑和精斑预试验,结果精斑预试验呈阳性.提取该精斑得到一男性DNA,和死者基因型不同,这为破案又找到一个新的突破口,必须在查找尸源的同时查找精斑的身源.     

河南地区人群3个基因座的基因频率分布

从血痕、血液、精斑中提取DNA对河南地区随机人群CSFIPO、TPOX和TH01基因座（CTT）进行了基因频率分布调查,现报道如下。1材料与方法137例血样取自河南省血液中心和本实验室检案材料;精斑为本实验室检案积累。采用Chexelx－100处理法提取DNA模板,混合斑中DNA的提取采用两步消化法（‘］。复合扩增采用Promega公司Geneprint试剂盒试剂,按试剂盒说明书操作。扩增产物用4％聚丙烯酸胺变性凝胶分离,恒功率40W电泳1．sh。检测用eromesa公司银染试剂盒,按其说明书操作。通过凝胶中标本扩增带与Promege公司提供的全等位基因标准…     

分析DNA亲缘关系侦破强奸杀人焚尸案1例

1案情2005年某日,某地发现一具无名女尸,头面部被焚烧,容貌被毁,全身赤裸。尸检发现死者生前有性行为,并提取了阴道及肛门拭子。对提取的阴道及肛门拭子进行精斑及STR检验,肛门拭子检出精斑及STR分型,阴道拭子未检出精斑。为查找尸源,取可疑父亲王某血样与尸体血样进行常染色体STR检验,结果显示死者血样DNA基因型与王某血样DNA基因型符合生物学单亲遗传关系。为排除重点嫌疑人,将尸体肛门拭子DNA基因型与多名重点嫌疑人