禽流感及其研究动态

禽流感及其研究动态薛景山（拱北动植物检疫局珠海５１９０２０）禽流感（ＡｖｉａｎＩｎｆｌｕｅｎｚａ，ＡＩ）是由禽流感病毒（ＡＩＶ）引起的一种烈性传染病，几乎所有野生及家养禽类都可感染。当鸡感染高致病性ＡＩＶ时，常被称为鸡瘟（ＦｏｗｌＰｌａｑｕｅ，第一届...     

禽流感的研究进展

禽流感(Avianinfluenza,AI)又称鸡瘟(Fowlplague)、真性鸡瘟、欧洲鸡瘟,是由正黏病毒科、流感病毒属的A型流感病毒(AIV)引起的禽类的一种传染性疾病,鸡、火鸡、鸭和鹌鹑等家禽及野生鸟类均可感染。因宿主和病原的不同,发病情况多种多样。高致病性禽流感病毒可引起鸡群中100%的鸡发病,75%以上的病鸡死亡;无致病性禽流感病毒不引起任何症状,仅能从感染鸡的血清中检测出禽流感病毒抗体;禽群感染温和型禽流感病毒后,临床上仅表现为精神沉郁,采食减少,有呼吸道症状,排黄绿色稀粪,产蛋下降,零星死亡。根据禽流感病毒的致病性强弱,可将禽流…     

禽流感的诊断技术与防制措施

禽流行性感冒 (ａｖｉａｎｉｎｆｌｕｅｎｚａ ,ＡＩ)简称禽流感 ,是由正黏病毒科流感病毒属Ａ型流感病毒引起的禽类传染病。高致病性禽流感 (ＨＰＡＩ)被国际兽疫局 (ＯＩＥ)列为Ａ类传染病。禽流感病毒 (ＡＩＶ)可感染几乎所有野生禽及家禽 ,且和其他动物的流感有紧密联系 ,甚至威胁着人类的健康[1] 。ＡＩ的暴发和流行 ,给养禽业造成了巨大的经济损失。所以 ,世界各国对ＡＩ的早期诊断和防治都很重视。近年来随着诊断技术的不断改进和发展 ,血清学试验技术和分子生物学技术在ＡＩ的快速诊断、流行病学调查、免疫监测以及病原学研究等方面…     

禽流感实验室诊断方法(待续)

禽流感（ＡＩ）是Ａ型流感病毒引起的一种禽类传染病。禽流感病毒（ＡＩＶ）可感染几乎所有野生及家养禽类。ＡＩ是国际兽疫局规定的Ａ类动物传染病，所以世界各国对ＡＩ的检疫都非常重视。我国以往由于未发生过高致病性ＡＩ，因而兽医界对其关注甚少，在ＡＩ研究方面也都...     

用口蹄疫非结构蛋白鉴别康复动物与注射疫苗动物的研究及应用

1996年 ,Ｂｒｏｗｎ等从口蹄疫病毒 (ＦＭＤＶ)感染的组织液中发现了病毒感染相关 (ｖｉｒｕｓｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ,ＶＩＡ )抗原 ,即ＦＭＤＶ非结构蛋白 3Ｄ ,并建立了琼脂免疫扩散 (ＡＧＩＤ)试验 ,用于进出境动物检疫 ,以区分ＦＭＤＶ感染动物和注射疫苗动物。之后Ｐｉｎｔｏ等在用ＡＧＩＤ试验进一步研究注射灭活疫苗动物的ＶＩＡ抗体时发现 ,注射疫苗前和接种一次疫苗的动物血清ＶＩＡ抗体均为阴性 ,而重复接种福尔马林灭活疫苗或ＡＥＩ灭活疫苗的动物 ,其血清中都不同程度的含有ＶＩＡ抗体。这一结果对用ＡＧＩ…     

用间接荧光抗体试验检测鸡肾型传染性支气管炎抗原的研究

建立检测鸡肾型传染性支气管炎抗原的间接荧光抗体试验（ＩＦＡ），其抗体感作时间Ⅰ抗以５０～６０ｍｉｎ，Ⅱ抗以３０～４０ｍｉｎ最佳。该法具有良好的特异性，可检测出人工感染鸡肾型传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ａｕｓｔ－Ｔ，ＨＮ９３０１，ＴＪ９３０１，ＢＪ９３０１毒株后的抗原；对自然发病病例检测结果，阳性符合率高于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和气管环中和试验法     

禽流感的诊断和预防

禽流感 (ＡｖｉａｎＩｎｆｌｕｅｎｚａ ,ＡＩ)是由Ａ型流感病毒引起的一种禽类疾病。该病病毒属于正粘病毒科 ,鸡、火鸡、鸭、鹅均可感染。禽类感染后 ,可表现为亚临床症状、轻度呼吸系统疾病、产蛋量下降或急性全身致死性疾病1　临床症状及病理变化1.1　临床症状　禽流感的潜伏期为几小时到几日不等 ,其长短与病毒的致病性高低、感染强度、传播途径和易感禽的种类有关。症状可涉及呼吸道、消化道、生殖道及神经系统 ,一般没有特征症状 ,通常表现体温升高 ,精神沉郁 ,食欲减少 ,消瘦 ,母鸡产蛋量下降 ,咳嗽 ,喷嚏 ,呼吸罗音 ,甚至呼吸困难…     

口蹄疫病毒的混合种

口蹄疫 (ＦＭＤ)是偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病 ,可以感染多种偶蹄家畜及野生动物 ,对畜牧业生产危害极大 ,是影响动物产品 (包括动物 )国际贸易的主要疾病之一。其病原为口蹄疫病毒 (ＦＭＤＶ) ,具有 7个血清型 ,型间互不交叉保护 ,型内各毒株间抗原变异大[1] ,这给ＦＭＤ的预防带来极大的困难。因此 ,研究ＦＭＤＶ的变异及其机理 ,对更好的预防以至消灭本病有重要意义。1　ＦＭＤＶ的分子结构及抗原性1.1　ＦＭＤＶ的分子结构　ＦＭＤＶ属于小ＲＮＡ病毒科 (Ｐｉｃｏｒ ｎａｖｉｒｄａｅ)、口蹄疫病毒属 (Ａｐｈｔｈｏｖ…     

禽肺病毒病简介

禽肺病毒 (Ａｖｉａｎｐｎｅｕｍｏｖｉｒｕｓ ,ＡＰＶ)又称火鸡鼻气管炎病毒 (Ｔｕｒｋｙｒｈｉｎｏｔｒａｃｈｅｉｔｓｖｉｒｕｓ ,ＴＲＴＶ) ,属于副粘病毒科肺病毒亚科肺病毒属。禽类受感染后可引起呼吸道症状、头部肿胀和产蛋率下降等症状 ,其中火鸡或表现为急性呼吸道疾病 ,或仅表现采食量减少和产蛋率下降。ＡＰＶ也是肉用鸡肿头综合征(Ｓｗｏｌｌｅｎｈｅａｄｓｙｎｄｒｏｍｅ ,ＳＨＳ)的主要病原。1　发生情况ＡＰＶ于 1978年首次发现于南非共和国 ,随后从法国、南非、英国、中国台湾、日本等国家和地区的呼吸道疾病和 /或肿头综合…     

贵州省传染性法氏囊病病毒野毒株核酸及结构蛋白比较研究

采用氯仿抽提、聚乙二醇沉淀，再经差速离心和蔗糖密度梯度离心，从病变法氏囊组织中提取出较纯的传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）。病毒核酸电泳分析表明，４株ＩＢＤＶ分离株均由双节段ＲＮＡ组成，大小基因片段的电泳迁移率毒株间无差异。ＳＤＳ—ＰＡＧＥ分析表明，ＩＢＤＶ分离株均由４条主要的结构蛋白带组成。近年从免疫鸡群中分离的地方强毒ＪＨ株及引自中监所的血清Ⅰ型强毒Ｊ＿１Ｃ＿７株，其主要结构蛋白带与早年分离的ＩＢＤＶ野毒株相似，电泳迁移率也基本一致。同时观察到毒株间各蛋白带相对百分含量的变化。     

禽脑脊髓炎琼脂扩散沉淀抗原制备与应用的研究

应用禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）ＶａｎＲｏｅｋｅｌ株和内蒙古禽脑脊髓炎（ＡＥ）自然病鸡分离毒株（ＡＥＶ－ＮＨ９３７株）分别接种鸡胚，制出ＡＥ琼扩沉淀抗原。经实验室和部分鸿场应用结果表明，该抗原具有良好的特异性。抗原效价为１：３２，可检出不同日龄、品种和不同发病期的人工感染鸡和自然发病鸡血清中的ＡＥ抗体，结果可靠，方法简便，可以推广应用。     

传染性法氏囊病病毒Ⅰ型变异株的分离鉴定及其多价弱毒苗免疫试验

先后在江苏、浙江、四川等８省（区）从临床患传染性法氏囊病的鸡群中采集法氏囊病料，分离到３２个野毒株，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定，其中１７株病毒为传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ），应用交叉中和试验，将分离毒株分为５个亚型，用ＩＢＤＶⅠ型标准变异株高免血清作中和试验鉴定，其中５个分离毒株有较高中和价，初步定为ＩＢＤＶⅠ型变异株。将其在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）上连续传代致弱，与标准Ⅰ型弱毒株联合制成多价弱毒疫苗，免疫试验表明多价弱毒疫苗具有良好的免疫效果，免疫组攻毒１００％保护，对照组攻毒死亡率为９２％     

禽脑脊髓炎病毒琼扩抗原的制备及其在评价鸡群抗体水平中的应用

以标准的禽脑脊髓炎（ＡＥ）病毒ＶＲ毒株和分离的野毒株分别感染ＳＰＦ鸡胚，取其病料组织制成琼脂扩散抗原。在含２０％ＮａＣｌ和０．５％苯酚的０．８％琼脂凝胶中，用这种抗原以琼脂扩散试验检测ＡＥ抗体，结果稳定，特异性强，方法简便迅速。     

斑点免疫金银染色法检测鸡传染性支气管炎病毒抗原的研究

用建立的斑点免疫金银染色（ＤｏｔＩＧＳＳ）法检测鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）抗原,确定兔抗ＩＢＶ血清工作浓度为１∶４００,ＳＰＡ胶体金探针的工作浓度为１∶８０,该法对纯化ＩＢＶ抗原的最低检出量为０．４３１４ｎｇ／点。用ＤｏｔＩＧＳＳ与斑点酶联免疫吸附试验（ＤｏｔＥＬＩＳＡ）同时检测１５只人工感染ＩＢＶ鸡的气管、肺、肾病料,ＩＢＶ阳性检出率均为１００％;对３２份疑似ＩＢＶ感染鸡病料检测,ＩＢＶ阳性检出率分别为３４．５％和３１．０％,阳性符合率为９３．３％（Ｐ＞０．０５）。     

H9型禽流感毒株免疫对H5型禽流感抗体检测的干扰试验

利用禽流感病毒(AIV)美国H9型毒株、江门H9型毒株和广东某厂家生产的含AIV毒株的几种禽用商品疫苗分别免疫40日龄的肉用鸡.通过首免和超免疫后采集首免血和超免疫血分离血清,分别用自制H5型抗原(美国毒株)、广州H5型抗原(香港毒株)和中国农业科学院哈尔滨兽医研究所H5型抗原对上述免疫鸡血清进行血凝抑制试验(HI),测定这些H9型毒株免疫的抗血清对H5型抗体检测的影响.试验结果表明,单纯的H9型毒株免疫的抗血清不构成对H5型抗体检测的影响.而含AIV抗原的商品疫苗免疫的鸡血清部分显示H5型抗体阳性,说明某些商品疫苗中含H5型抗原.用美国H5型毒株免疫的鸡血清进行反向验证试验,也未发现对H9型抗体检测的影响,表明H5和H9型AIV不存在同源抗原,因而在二者抗体检测中不存在相互干扰的问题.     

深圳地区鸭禽流感的诊断

国内对禽流感的研究起步较晚,对该病诊断方法研究得更少。为防止高致病性禽流感(即真性鸡瘟)传进我国,为口岸检疫建立禽流感诊断方法,本试验参照美国国家兽医诊断实验室的做法,通过对家鸭进行病毒分离和琼脂扩散试验,以诊断A型禽流感及了解深圳地区禽流感的分布情况。     

阳离子脂质体的制备及其与禽流感病毒HA基因作用的研究

用超声波法制备了ＤＣｃｈｏｌ阳离子脂质体,研究了阳离子脂质体与禽流感病毒（ＡＩＶ）保护性抗原血凝素（ＨＡ）基因重组质粒ｐＳＶＨ７复合物的特性。电子显微镜观察表明,阳离子脂质体与ｐＳＶＨ７形成复合物后,脂质体发生聚集、膜融合,脂质体直径变大,并出现了多层结构脂质体;通过检测脂质体在２４８ｎｍ处的吸光度变化,研究了脂质体与ｐＳＶＨ７质粒复合物形成及膜融合的动力学过程,脂质体ＤＮＡ复合物是在最初１～１５ｍｉｎ内形成的,其主要作用是静电吸引力,ＮａＣｌ和ＳＤＳ也能引起阳离子脂质体的融合。     

鸡腺胃型传染性支气管炎的诊断及病毒分离鉴定

天津市部分鸡场发生一种以病鸡极度消瘦、拉稀和死亡为主要特征的传染病，经鉴定确诊为鸡腺胃型传染性支气管炎（ ＧＩＢ） ，并分离出ＩＢＶ ＪＢ９７０２ 株，ＨＡ 效价为２１２，ＥＩＤ５０ 为１０ －６．８１／０ ．２ ｍ Ｌ。病毒干扰试验中，ＩＢＶＪＢ９７０２ ＋ ＮＤＶ ＬａＳｏｔａ接种鸡胚ＨＡ 效价为２４～６ ，ＬａＳｏｔａ 接种鸡胚ＨＡ 效价为２１０～１１ ；用ＩＢＶ ＪＢ９７０２ 病毒液１∶１０ 稀释后感染经ＩＢＶ Ｈ１２０ 弱毒疫苗免疫雏鸡，发病８／１０ ，死亡３／１０ 。     

美国再次爆发禽流感

(一)禽流感在美国的发生情况 1985年12月28日,美国宾夕法尼亚州一群7200只肉用鸡发病,怀疑为禽流感,该鸡群已于1986年1月10日被扑杀。 1986年1月11日分离到H_5N_2亚型禽流感病毒。这株病毒与1983～1984年导致许多禽群毁灭的毒株属同一血清型。到1986年3月止,至少有15群家禽经血清学试验和病毒分离证实发生了禽流感,5个销售点的家禽存在禽流感的迹象(宾夕法尼亚州5群,纽约州1群、4个销售点、新泽西州3群、康涅狄格州1个销售点、马萨诸塞州1群)。可见,这次爆发比上一次更为凶猛,危害性可能更大。这一次美国农业部只是提供技术鉴定和流行病学调查与实验室诊断的帮助,尚未组织防疫工作队。     

胶乳凝集试验在鸡传染性法氏囊病诊断中的应用

应用鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体（ＩＢＤＶ－ＭｃＡｂ）致敏的聚苯乙稀胶乳，建立了检测ＩＢＤＶ抗原和抗体的胶乳凝集（ＬＰＡ）和胶乳凝集抑制（ＬＰＡＩ）试验。ＬＰＡ可检测出６ｍｇ／Ｌ的ＩＢＤＶ蛋白。比较了ＬＰＡ、直接萤光抗体试验（ＤＦＡ）和琼脂扩散沉淀试验（ＡＧＰ）三种方法检测ＩＢＤＶ抗原的特异性、敏感性和相关性，明确了ＬＰＡ和ＤＦＡ的检出率高于ＡＧＰ，ＬＰＡ和ＤＦＡ检测结果的符合率为８６％。