法医物证学miRNA分析的研究进展

在种属和体液鉴定及降解检材等特殊案件的分析时,转录水平的miRNA所具有的生物属性及表达特点,使其能够发挥基因组DNA所不具备的价值。本文通过概述法医物证学miRNA研究的现状,对法医miRNA分析的研究策略和法医物证学应用前景进行了综述,以期为法医miRNA分析的应用研究提供借鉴。     

同卵双生子外周血miRNA表达差异初步研究

目的探索同卵双生子外周血miRNA表达谱差异,筛选并验证可用于鉴别同卵双生子的miRNA。方法应用全基因组miRNA芯片检测同卵双生子外周血中的miRNA表达谱并进行表达差异分析,利用荧光定量PCR对表达丰度高并且存在差异的miRNA进行验证。结果同卵双生子外周血中检测得到509种miRNA,其中96种miRNA在外周血表达量较高并在同卵双生子中存在差异,并且荧光定量PCR结果与芯片结果一致。结论本研究初步证实了miRNA可作为同卵双生子鉴定的潜在标记,为开发同卵双生子鉴定新方法提供了思路。     

同卵双生子外周血DNA甲基化谱的差异

目的通过比较不同个体外周血DNA甲基化谱的差异,评估DNA甲基化在同卵双生子个体甄别中的应用价值。方法在知情同意基础上获得22对同卵双生子外周血样。抽提基因组DNA后进行重亚硫酸盐转化．采用Illuraina公司的人27k甲基化微珠芯片检测基因组27578个CpG位点的甲基化程度（启值）。依据常染色体CpG位点的序值,采用欧氏距离计算方法计算同卵双生子间以及同性男ll的无关个体间的表观遗传距离。比较同卵双生子对与无关个体对两组不同人群间的表观遗传距离差异。结果同卵双生子对人群以及无关个体对人群中的男性个体对与女性个体对的表观遗传距离差异均无统计学意义（P值分别为0．0695和0．4825）。同卵双生子对的表观遗传距离显著低于无关个体对人群（中位数：6．02νs7．20,P=0．0002）．但两组人群的表观遗传距离均显著大于4．00（P〈0．0001）。结论同卵双生子间的外周血DNA甲基化谱差异显著．DNA甲基化是进行同卵双生子个体甄别的有效生物学标记。     

全基因组扩增技术应用于法医学的进展

全基因组扩增(whole genome amplification,WGA)技术是一种对全部基因组序列进行非选择性扩增的技术。对微量模板DNA的检验,一直是法医物证学特别关注和急需解决的难题之一。近年来,对WGA技术的的研究发展日渐深入,研究成果有望应用于法医DNA检验中各类微量检材的检验。本文综述了WGA技术在法医物证学中的研究进展和应用前景,为法医物证工作者提供参考。     

生物信息学在法医学中的应用与展望

自DNA指纹技术应用于司法实践的报道以来,法医DNA分析发挥着越来越重要的作用。近年来,随着基因组学高通量测序技术的快速发展,生物信息学分析手段也逐渐开始与法医学应用结合,极大地扩展了法医物证的分析能力。本文综合阐述了法医遗传学所涉及的基因组、表观组以及转录组生物信息分析相关研究现状以及发展趋势。     

1对同卵双生新生儿DNA甲基化谱差异分析

目的 探索1对同卵双生新生儿之间DNA甲基化谱的差异.方法 应用甲基化免疫共沉淀结合高通量测序法对1对同卵双生新生儿的DNA甲基化谱进行检测,分析基因组DNA甲基化特点及其之间的差异,筛选适用于法医学分析的甲基化位点.结果 两样本各获得7300万原始测序序列(raw reads)数据,与人类基因组参考序列比对,各得到4800万和5000万唯一比对reads,其中大部分分布在重复区域,且在Alu序列分布最为广泛.两样本DNA甲基化富集区域(peak)各检测到257 362条和197 272条,基因组覆盖率分别为6.53％和5.29％,分布在基因组不同区域,以中间内含子区含量最多.分析两样本甲基化差异区域得到2205条差异的甲基化序列,其中595条位于基因区域,1610条位于基因间区,从中筛选出113条序列,用于进一步深入研究其法医学应用价值.结论 本研究初步证实了DNA甲基化用于同卵双生子鉴定的可行性,为筛选同卵双生子DNA甲基化差异位点提供了基础数据.     

强奸案中的DNA证据

强奸案中DNA证据有哪些作用1．确定案犯确定案犯是DNA证据首要的也是最重要的作用。目前用于法医DNA分析的STR基因座在人类基因组中分布广泛,适用于陈旧降解及微量生物检材的分析。以目前常规用于DNA检测的16个STIR基因座复合扩增试剂盒而言,除同卵双生子之外,没有两个人的DNA分型结果一致。所以,通过对现场犯罪分子遗留的精斑、唾液、血迹等生物物证的检测分析并与嫌疑人进行比对,就可以直接认定。STR基因座判型准     

法医 STR 的快速检验方法

以 STR 复合扩增检测为代表的法医 DNA 分型技术以其灵敏度高、核心序列小、可复合扩增、方法易于标准化等优势,已经成为当前法庭科学 DNA 检验的主要手段,在各国刑事案件侦破和民事案件解决中发挥了重要的作用。本研究在国内外实验室法医 STR快速检验方法[1]的基础上,从生物物证 DNA 免提取扩增检验、生物物证 DNA 快速提取检验、生物物证 DNA快速扩增、利用新型检测设备快速检测及使用 Gen-eMapper ID－X 软件快速分析5个方面进行归纳。     

法医蛋白质组学研究进展与展望

随着质谱仪灵敏度的提升、蛋白质序列数据库的完善以及数据分析方法的成熟,蛋白质组质谱技术发展迅速,为其在犯罪调查应用奠定了良好的技术基础。蛋白质序列含有关于基因型的信息,而且蛋白质的表达水平与表型相关。因此,当生物物证没有DNA或者DNA降解非常严重,DNA检验技术无法实施或检验结果不佳时,对蛋白质序列和表达水平的检验就具有了独特的应用价值,如在毛发法医个体识别、体液斑迹组织来源等方面,可作为DNA检验技术的有效补充手段。本文综述了法医蛋白质组学的主要技术方法、法庭科学应用研究的最新进展以及在案件实际应用转化仍需重点研究的问题。     

DNA甲基化在法医DNA分析中的应用

表观遗传学在生命的发生、发展过程中起着十分重要的作用。DNA甲基化作为表观遗传的一个重要方面,不仅参与多种基因的表达调控,与机体的发育、肿瘤发生等密切相关,而且具有可遗传性、相对稳定性、亲缘特异性、基因组中含量丰富等特点,已证实适用于法医DNA分析。本文对近年来DNA甲基化在印迹基因、同卵双生子鉴定、年龄、性别推断方面的研究与应用进行回顾与综述,以期为在法医学及相关领域中应用提供参考。     

microRNAs及其法医学应用前景

microRNAs(miRNAs)是一类内源性的非编码小分子RNA,平均长度约22nt,广泛存在于各种真核细胞中,并参与调节细胞生长发育、分化、凋亡、衰老、疾病及肿瘤的发生等众多重要生命活动。基于其生物学功能,miRNAs可能在法医学体液来源鉴定、个体年龄推断、同卵双生子甄别等方面具有广阔的应用前景。     

DNA甲基化在法医学中的应用前景及其检测方法新进展

DNA甲基化是一种重要的表观遗传标记。新近的一些研究表明,DNA甲基化在二联体亲权鉴定、同卵双生子法医学个体甄别等案例中可能具有一定的应用前景,可作为STR或SNP等经典遗传标记的有益补充。目前基于甲基化敏感的限制性核酸内切酶、重亚硫酸盐转化以及甲基化CpG结合蛋白等原理已建立了一系列的DNA甲基化检测方法。甲基化敏感的单核苷酸引物延伸、实时荧光PCR、甲基化特异性PCR、甲基化特异性多重连接反应依赖性探针扩增、光纤微珠芯片等位点特异性DNA甲基化检测方法都可用于已知CpG位点甲基化状态的检测并可能在法医学实验室具有一定的应用前景;AIMS、HELP、COMPARE-MS等通过对基因组范围内的DNA甲基化扫描分析,可发现具有潜在法医学应用价值的DNA甲基化位点。     

人类反转座核元件甲基化研究进展

人类反转座核元件LINE-1序列和Alu序列甲基化水平的变化与多种疾病的发生、发展有密切的联系,因此是相关疾病,尤其肿瘤和癌症预测、诊断、治疗及预后的新标记。近年来,二者在法医学方面的研究也逐渐展开,主要集中在同卵双生子的鉴别、年龄的鉴定、组织的鉴定等方面,有望成为法医DNA分析领域新一代的遗传标记。本文综述LINE-1序列和Alu序列甲基化在医学、法医学等领域的研究进展,希望能为相关研究和应用提供参考。     

Detection of microRNAs in DNA Extractions for Forensic Biological Source Identification

Molecular‐based approaches for biological source identification are of great interest in the forensic community because of a lack of sensitivity and specificity in current methods. MicroRNAs (miRNAs) have been considered due to their robust nature and tissue specificity; however, analysis requires a separate RNA extraction, requiring an additional step in the forensic analysis workflow. The purpose of this study was to evaluate miRNA detection in blood, semen, and saliva using DNA extraction methods commonly utilized for forensic casework. RT‐qPCR analysis revealed that the tested miRNAs were consistently detectable across most tested DNA extraction methods, but detection was significantly reduced compared to RNA extracts in some biological fluids. DNase treatment was not necessary to achieve miRNA‐specific results. A previously developed miRNA panel for forensic body fluid identification was evaluated using DNA extracts, and largely demonstrated concordance with results from samples deriving from RNA extracts of semen, blood, and saliva.     

同卵双生子甄别策略探讨

同卵双生子(MZ)之间存在抗体库差异、甲基化修饰差异和基因突变体差异,甲基化修饰差异的比较可望成为甄别MZ的手段之一,抗体库差异和基因突变体差异比较的方法在甄别MZ方面亦有潜在价值.当前,对MZ的表现遗传以及基因突变等领域的研究还很有限,而抗体库技术的应用方法也有待探讨,因此MZ识别技术的应用前景和发展空间需要进一步摸索与完善.     

Binary logistic regression models enable miRNA profiling to provide accurate identification of forensically relevant body fluids and tissues

Numerous studies have demonstrated the ability to identify the body fluid of origin of forensic biological stains using messenger (mRNA) profiling. However, the size of the amplification product used in these assays (100–400 bases) may not be ideal for use with environmentally degraded samples. MiRNA profiling represents a potential alternative to mRNA profiling, since the small size of the miRNAs (∼22 bases) might still permit their detection in degraded stains. Previously, we reported the first study involving the forensic use of microRNA (miRNA) profiling, which required screening of 452 candidates. Since our initial screening, hundreds of novel miRNAs have been identified. We have therefore evaluated additional miRNA candidates to further improve the sensitivity and specificity of the body fluid assays. Consequently we have expanded our body fluid identification panel to include 18 miRNAs (comprising 5 original and 13 novel miRNAs). This panel permits the identification of all forensically relevant body fluids and, uniquely, includes miRNAs for the identification of skin.Using normalized miRNA expression data, we constructed body fluid specific binary logistic regression models to permit an accurate identification of the body fluid of interest. Using the developed models, we have obtained 100% accuracy in predicting the body fluid of interest.     

microRNA的检测技术及其法医学应用前景

microRNA（miRNA）是一类由18～25个核苷酸构成的非编码小分子RNA，在转录后水平调控基因的表达。miRNA的表达具有高度保守性、时序性和组织特异性。随着其检测技术的逐渐成熟，miRNA被引入到法医学的研究中。新近研究表明，miRNA在法医学体液鉴定、种属鉴定和PMI推断等方面有一定的应用前景。本文简述miRNA检测技术的发展，并对其在法医学中的应用及前景进行综述，以期为相关研究及实践提供参考。     

中外法庭科学标准化研究现状比较与发展趋势

近年来,我国法庭科学发展迅猛,开始受到广泛关注和重视。经过多年的研究和推动,标准化正逐步深入到法庭科学的日常实践中,通过制定和实施标准规范,确保法庭科学结果质量,更好发挥科学技术在执法司法中的重要作用。标准化研究是法庭科学标准化工作的重要环节,也是推动法庭科学标准化发展的基础和动力。国内外法庭科学研究者都高度重视法庭科学标准化研究,许多新理念、新思想、新方法不断涌现。本文从标准定位、标准化对象、标准颗粒度、标准体系、质量控制、国际标准化六个方面对当前中外法庭科学标准化研究的现状进行了深入全面的归纳和比较,指出了国内外在法庭科学标准化研究方面的相似和差异,并对法庭科学标准化研究的未来发展趋势进行了分析,以求为推动我国法庭科学领域标准化工作高质量发展提供借鉴和参考。