亲子鉴定中D8S1179基因座等位基因丢失分析1例

1案例资料1.1简要案情田某,女,36岁,因落户需要,要求对其与女儿进行亲权鉴定。1.2检验方法采用Chelex法抽取血样样本DNA;分别用Power Plex21试剂盒（普洛麦格（北京）生物科技有限公司）、GoldeneyeTM20A试剂盒（北京基点认知公司）进行复合PCR扩增;用3130XL遗传分析仪（美国AB公司）进行毛细管电泳,用GeneMapperIDv3．2软件进行基因型分析。     

导致D5S818等位基因丢失的突变确认1例

正1案例资料1.1简要案情在日常一例二联体父女鉴定的检案中,我们采用Power Plex~?21试剂盒(Promega公司,美国)进行亲子鉴定过程中,发现D5S818基因座存在等位基因丢失情况。1.2实验方法采用常规Chelex-100法提取争议父和孩子的基因组DNA;分别使用Power Plex~?21试剂盒、Golden Eye~(TM)20A试剂盒(北京基点认知技术有限公司)和AGCU Expressmarker 22试剂盒(无锡中德美联公司)进行STR复合扩增;扩增产物通过3130型遗传分析仪(Applied Biosystems公司,美国)进行毛细管电泳,Gene Mapper ID v3.2.1软件分析各基因座的基因型。     

常染色体STR基因座三带型5例

正1材料和方法1.1材料材料为本物证鉴定室受理的8172例健康无关个体血斑样本。1.2主要仪器和试剂使用Goldeneye?Duplex试剂盒(基点认知技术有限公司)、Power Plex~?21(Promega)、Global FilerTM试剂盒(美国AB公司)进行常染色体STR分型检测。采用血卡直接扩增的方法在9700型PCR仪(美国AB公司)进行复合扩增,扩增体系10μl。使用3500基因分析仪(美国AB公司)和GeneMapper~?ID-X 1.4软件进行电泳和数据分析。     

X-STR联合常染色体STR用于亲缘关系鉴定1例

1 案例1．1简要案情某年7月27日夜,某乡镇家庭作坊失火。消防救援后,发现3例烧焦炭化的尸体,2例疑似为姐妹,1例疑似为姐姐的儿子．提取各尸体肋软骨和姐妹的父亲鲁某血样要求进行亲缘关系鉴定比对。1．2检验按行业标准GA／T383—2002中Chelex 100法提取基因组DNA,分别用AGCU、X-12、AGCUEx22、AGCU 21＋1（无锡中德美联生物公司）和Identifiler、Sinofiler试剂盒（美国AB公司）,采用10μL体系按照试剂盒说明书进行PCR扩增,扩增产物在3130遗传分析仪（美国AB公司）上毛细管电泳检测,用Gen—eMapperlDv3．2软件进行基因分析。     

D21S11稀有等位基因落入相邻基因座1例

正1案例1.1简要案情建立基因档案,送检血液样本一份。1.2初次检验采用Chelex-100法提取DNA,Amp FSTR~SinofilerTM试剂盒(美国AB公司)进行PCR复合扩增,扩增体系和热循环反应按试剂盒说明书进行,扩增产物在3130xl遗传分析仪(美国AB公司)电泳,Genemapper ID v3.2软件分析结果。D21S11基因座表现为纯合子,D7S820基因座显示为5/8/11三带型,     

3种STR试剂盒在二联体亲缘鉴定中联合应用1例

1案例资料 1．1样本及检验方法 要求进行亲缘关系鉴定的王某（男,42岁）和李某（女,13岁）的血液样本各1份。采用Chelex．100法提取模板DNA。分别采用Identifiler试剂盒（ABI公司,美国）、PowerPlex 21试剂盒（Promega公司,美国）、STRtyper-10G试剂盒（珠海科登生物工程有限公司）进行分型检验。     

天津汉族人群D19S433和D2S1338基因座遗传多态性

采用AB I AmpFlSTR IdentifilerTM荧光标记复合扩增试剂盒,AB I-310型DNA序列分析仪,对200名天津地区汉族无关个体血样D19S433和D2S1338基因座遗传多态性进行调查,现报告如下。1材料与方法200份天津地区汉族无关个体血样系本实验室日常检案积累。采用Chelex-100法提取血样DNA[1];PCR扩增、电泳检测及数据收集均按AB I公司操作手册进行。用AB I-GeneScan、Genotype软件分析DNA分型,并制成COD IS表格,导入DNA数据分析处理系统,进行统计学计算,得到D19S433、D2S1338基因座的等位基因频率和相关统计学数据。2结果与讨论天…     

河南汉族人群16个Y-STR基因座遗传多态性

<正>1材料与方法采集208名河南汉族无关男性个体的血样,用Chelex-100法提取。采用Yfiler试剂盒(美国AB公司)对16个Y-STR基因座进行PCR扩增。PCR产物在3130XL型遗传分析仪(美国AB公司)上进行毛细管电泳,GeneMapper ID v3.2软件进行基因分型。等位基因频率用直接计数法。基因多样性(gene diversity,GD)按照公式GD=n(1-ΣPi2)/(n-1)[1]计算,其中n为检测的样本数,Pi为第i个等位基因的频率。     

国产法医DNA检验试剂耗材检测DNA标准品的准确性研究

目的利用法医DNA标准品对自主研发的法医DNA检验试剂耗材进行电泳检测准确性的实验考查。方法实验平台分为2个：平台1全部由美国AppliedBiosystems公司进口的3130xl遗传分析仪、16道电泳毛细管与甲酰胺、电泳缓冲液、凝胶构成;平台2由AppliedBiosystems公司进口的3130xl遗传分析仪、16道电泳毛细管与本实验室研发的甲酰胺、电泳缓冲液、凝胶构成。在实验平台上对allelicladder、内标等标准品以及阳性对照9947a的STR复合扩增产物进行电泳检测,利用GeneMapper软件对电泳结果进行分析。结果自主研发的法医DNA检验试剂耗材可与国外进口的3130xl遗传分析仪配套使用,构建的实验平台对法医DNA标准品的检测结果准确无误。结论自主研发的甲酰胺、电泳缓冲液、凝胶等法医DNA检验试剂耗材检测准确性达到了国外同类产品水平。     

广州地区汉族人群PentaD及PentaESTR基因座频率

应用ＰｏｗｅｒＰｌｅｘＴＭ16ｓｙｓｔｅｍ (Ｐｒｏｍｅｇａ)荧光标记复合扩增试剂盒对广州地区汉族无关个体进行遗传多态性调查 ,报道如下。1　材料和方法1 1　实验材料广州地区汉族 170份无关个体血样取自广州市中心血站 ,男性 90例、女性 80例。30个家系样本取自本室采集的已确定亲生关系的家系。1 2　主要仪器与试剂970 0型热循环仪、ＡＢＩ 377 96全自动测序仪(ＰＥ公司 )。ＰｏｗｅｒＰｌｅｘＴＭ16ｓｙｓｔｅｍ荧光标记复合扩增试剂盒 ,内标 (Ｐｒｏｍｅｇａ公司 )。凝胶试剂 (ＰＥ公司 )。1 3　计算机分析系统电泳收集软件ＡＢＩＰ…     

河南地区人群3个基因座的基因频率分布

从血痕、血液、精斑中提取DNA对河南地区随机人群CSFIPO、TPOX和TH01基因座（CTT）进行了基因频率分布调查,现报道如下。1材料与方法137例血样取自河南省血液中心和本实验室检案材料;精斑为本实验室检案积累。采用Chexelx－100处理法提取DNA模板,混合斑中DNA的提取采用两步消化法（‘］。复合扩增采用Promega公司Geneprint试剂盒试剂,按试剂盒说明书操作。扩增产物用4％聚丙烯酸胺变性凝胶分离,恒功率40W电泳1．sh。检测用eromesa公司银染试剂盒,按其说明书操作。通过凝胶中标本扩增带与Promege公司提供的全等位基因标准…     

X-STR分型在特殊二联体亲子鉴定中的应用1例

1 案例 1.1简要案情 两名男子委托本鉴定所对他们与1名女孩是否存在亲生血缘关系进行鉴定. 1.2检验过程 本鉴定所采集3人指血,Chelex-100法提取DNA,采用PowerPlex(R) 21系统(美国Promega公司)检测20个常染色体STR基因座以及1个性别基因座,采用Investigator Argus X-12试剂盒(德国QIAGEN公司)检测12个X-STR基因座,以上扩增均在9700型基因扩增仪(美国AB公司)上完成,扩增体系和条件均按照使用说明书操作,扩增产物在3130遗传分析仪(美国AB公司)上进行毛细管电泳,用GeneMapper ID v3.2软件进行基因分型.     

兰州地区汉族人群15个STR基因座多态性

本研究采用AmpFeSTRIdentifilerTM（美国AB公司）荧光标记复合扩增系统,对兰州地区1 500名汉族无关个体进行基因分型,获取了15个STR基因座在兰州地区的相关群体遗传学数据．为该地区汉族人群法医学个体识别和亲权鉴定提供基础数据．现报道如下。     

二代测序在二联体亲子鉴定中的应用3例

正1案例和方法1.1简要案情我中心接收的案件中需进行二联体亲子鉴定情况3例(1号父,1号子;2号父,2号子;3号父,3号女)。1.2检验方法1.2.1毛细管电泳STR分型检测使用AGCU EX22试剂盒(无锡中德美联生物技术有限公司)进行STR复合扩增,使用3500XL基因分析仪(Thermo Fisher公司)和GeneMapper~?ID-X v1.5软件进行电泳和数据分析。     

疑难父系半同胞亲缘关系鉴定1例

1案例资料 1.1 简要案情 被鉴定人甲,父亲已故.被鉴定人乙因遗产继承纠纷申请与甲作同父异母亲缘关系鉴定. 1.2 DNA分型检验 采用Chelex-100法提取甲、乙、甲母、甲姐、甲弟共5人血样模板DNA,应用Applied Biosystems(R) Y、Identifiler体系(AB公司)、STR TyperTM 10体系(珠海科登公司)、AGCU 21+1STR(无锡中德美联公司)进行复合扩增,产物在310型遗传分析仪(AB公司)上进行电泳分型,结果经GeneMapper ID v3.2软件判读.     

河南汉族人群27个Y-STR基因座遗传多态性

目的 调查27个Y-STR基因座在河南汉族男性人群中的遗传多态性.方法 应用Yfiler（R） Plus试剂盒,对河南地区1100名汉族男性无关个体血样进行PCR扩增,3500XL型遗传分析仪电泳检测,GeneMapper-ID-X软件进行等位基因分型.结果 1100名男性共检出1098种不同的单倍型,其中1094种为单一型,另有3种单倍型均检出2例,HD（单倍型）值为0.999995;27个Y-STR基因座的GD值为0.3833～0.9663.结论 27个Y-STR基因座多数在河南汉族男性人群中有较好分布,对法医学应用和人类群体遗传学研究具有重要价值.     

16个X-STR基因座的连锁不平衡检验和突变率调查

目的：检测X染色体上16个STR基因座的连锁不平衡情况,并对其遗传稳定性进行调查。方法从华东汉族群体选取女性无关个体500名、家系885个,提取血样DNA,利用自主研发的IDtyperX-16试剂盒对16个X-STR基因座进行多重PCR扩增和毛细管电泳分型,使用PowerMarker v3.25软件对基因座进行连锁不平衡检验,并分析各个基因座的突变率。结果16个X-STR基因座彼此之间不存在连锁不平衡现象;有10个基因座检见突变,其中DXS6809和DXS7132的突变率均高达0.0048。结论对于IDtyperX-16试剂盒中的16个X-STR基因座,在亲权鉴定中应用时可运用乘积原理计算似然率,但若遇到不符合遗传规律的情形（尤其是DXS6809、DXS7132基因座）,应考虑存在突变的可能。     

19个常染色体与4个Y染色体STR复合扩增体系的建立

目的建立19个常染色体STR及Amelogenin和4个Y染色体STR基因座复合扩增体系,并对其效能进行评估。方法用五色荧光标记20＋4Y—STR基因座,建立同步扩增检测体系,用ABI3130XL遗传分析仪对扩增产物进行电泳,GeneMapperID3．2软件进行基因分型;检测体系的灵敏度、均衡性、稳定性、特异性、同一性和稳定性,并观察混合、降解及微量检材的分型情况。结果采用本文体系,DNA模板量在0．05～1．00ng时,分型准确,均衡性、特异性好;混合、降解及微量检材分型正确。该19个常染色体STR基因座的累计个人识别率大于0．999999999,三联体累计非父排除率达0．999999985,Y—STR单倍型多态性为0．592。结论本文建立的复合扩增体系分型准确,稳定,在法医学案件检验及数据库建设等方面有良好的应用前景。     

3个STR基因座在上海汉族人群中的基因频率分布

采用美国Promega公司的GeneprintSTRSystemFFv试剂盒,对HUMF13A01、HUMFESFPS、HUMVWA基因座在上海地区汉族人群中的基因频率分布进行了调查。1材料与方法取上海地区汉族无关个体的鲜血或血痕,刑案涉及的血痕、精斑、肌肉等组织,采用Chelex．100快速抽提法或酚一氯仿抽提法提取DNAoPCR扩增反应在25．OPI体系中进行t‘）。采用GenePrintSTRSystemFFv试剂盒（P。明a,USA）,每反应混合物含：IOXPCR缓冲液（500mmol／LKCI;100mmoVLTris－HCI,pHg．oil％TritonX－100;15mmoVLMgClz;Zmmol／LeachdNTP）2…     

STR基因座荧光标记复合扩增检测及其法医学应用

目的建立荧光标记复合扩增检测4个STR基因座的方法,应用于法医学亲权鉴定与个人识别。方法用6-FAM标记D3S1754引物,HEX标记D4S2366和D12S375引物,TMR标记D1S549引物,PCR复合扩增,310基因分析仪电泳自动收集电泳结果数据,GeneScanAnalysisSoftware3.7NT计算扩增产物片段相对大小,Genotyper誖3.7NT软件进行样本基因型分型。将该方法应用于法医学亲权鉴定与个人识别。结果建立了荧光标记复合扩增检测4个STR基因座基因型的方法,具有良好的稳定性和较好的灵敏度,分型结果准确。结论研究建立的方法操作简便,分型结果稳定可靠,可用于遗传多态性研究和法医学亲权鉴定与个人识别。