桃红四物汤含药血清对缺糖缺氧损伤PC12细胞的保护作用

目的 探讨桃红四物汤含药血清对缺糖缺氧（oxygen glucose deprivation，OGD）损伤的PC12细胞的保护作用及其机制。 方法 采用连二亚硫酸钠（Na2S2O4）联合低糖培养基建立体外OGD致PC12细胞损伤模型；分别给予不同浓度的桃红四物汤含药血清，以MTT法检测细胞存活率，倒置显微镜观察细胞形态学变化；检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性及丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量；观察Hoechst33258染色后的细胞形态学变化；Western blot法检测给药后细胞Caspase-3蛋白的表达。 结果 与空白血清对照组相比，经OGD损伤后，细胞活力显著降低，桃红四物汤含药血清可减轻PC12细胞形态损伤，显著提高SOD活力，降低MDA和LDH含量，降低Caspase-3蛋白表达；Hoechst 33258染色结果表明桃红四物汤含药血清能降低OGD诱导的细胞凋亡。 结论 桃红四物汤含药血清对OGD诱导的PC12细胞损伤具有保护作用，其机制与提高SOD活力和降低MDA含量有关。     

苓桂术甘汤含药血清对过氧化氢诱导的乳鼠原代心肌细胞氧化应激损伤及细胞凋亡的影响

目的 观察苓桂术甘汤含药血清对H2O2诱导的心肌细胞氧化应激损伤及细胞凋亡的影响。方法 建立H2O2诱导的心肌细胞氧化应激损伤模型，将心肌细胞随机分为正常对照组、H2O2模型组、空白大鼠血清（20%）组、苓桂术甘汤含药血清（5%、10%、20%）组，用苓桂术甘汤含药血清（5%、10%、20%），分别预处理心肌细胞12 h后，加入100 μmol/L H2O2继续培养6 h，用MTT法测定心肌细胞存活率，比色法检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化酶（glutathione peroxidase ，GSH- Px）活性及丙二醛（malonic dialdehyde，MDA）水平，用荧光核染色法观察细胞凋亡形态学变化，流式细胞术（Annexin Ⅴ- FITC/PI）检测细胞凋亡率，荧光探针法测定氧自由基水平。结果 与正常组比较，模型组心肌细胞活力明显降低（P<0.05），氧自由基、LDH活性及MDA水平均显著升高（P<0.05），SOD及GSH- Px活性均显著降低（P<0.05），细胞核浓染数目增加，细胞凋亡率明显升高（P<0.05）；与模型组比较，苓桂术甘汤含药血清组心肌细胞活力明显升高（P<0.05），GSH- Px、SOD活性均显著升高（P<0.05），LDH活性，氧自由基、MDA水平均显著降低（P<0.05），心肌细胞核浓染减少，细胞凋亡率明显降低（P<0.05）。结论 苓桂术甘汤能够清除细胞内氧自由基，抑制心肌细胞凋亡，增强细胞活性，对心肌细胞氧化应激损伤具有保护作用。     

不同发汗条件对发汗丹参中丹参酮类含量的影响

目的 探究不同发汗条件对发汗丹参中丹参酮类含量的影响,筛选丹参的发汗条件。方法 以发汗堆积量(A)、发汗环境温度(B)、发汗时间(C)3个条件因素水平,采用正交设计方法对同一批次丹参鲜品进行发汗处理,采用高效液相色谱法对发汗丹参中丹参酮类（丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ）的含量进行测定。结果 不同的发汗条件因素对发汗丹参中丹参酮类的含量有显著影响,不同发汗条件因素对丹参酮类的影响依次为发汗环境温度(B)、堆积量(A)、发汗时间(C)。结论 丹参酮类的含量受不同的发汗条件影响显著,为制定丹参药材产地初加工技术标准及其标准操作流程提供实验基础和参考依据。     

新藤黄酸对大鼠肝微粒体细胞色素P450亚型酶活性的影响

目的 采用“Cocktail”探针药物法考察新藤黄酸对大鼠肝微粒体细胞色素P450(cytochrome P450，CYP450)亚型酶活性的影响。 方法 将新藤黄酸与6种亚型酶(CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A4)对应的特异性混合探针药茶碱、双氯芬酸钠、奥美拉唑、右美沙芬、氯唑沙宗和咪达唑仑与大鼠肝微粒体孵育，采用高效液相色谱法同时检测肝微粒体中6种探针底物的相对酶活性并计算其半抑制浓度（half maximal inhibitory concentration, IC50）。 结果 不同浓度新藤黄酸作用后大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4酶活性相比较，差异均具有统计学意义，且随着新藤黄酸的浓度增高，各种酶的活性呈现明显的降低趋势。通过抑制曲线计算得到新藤黄酸对CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4的IC50值分别为4.18、45.61、10.02 μmol/L，对CYP1A2、CYP2C9、CYP2E1的IC50值均大于100 μmol/L。 结论 新藤黄酸对CYP2C19酶活性有中等抑制作用，对CYP3A4酶活性有弱抑制作用，但对CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6、CYP2E1酶活性没有抑制作用。     

补阳还五汤黄酮类有效成分在Caco-2细胞单层模型的转运特征及对CYP450酶活性的影响

目的 研究补阳还五汤3个黄酮类有效成分（羟基红花黄色素A、毛蕊异黄酮、芒柄花素）在Caco-2细胞单层模型中的转运特征及其在大鼠肝微粒体中对CYP450酶亚型活性的影响。方法 MTT法研究药物在Caco-2细胞单层模型的安全浓度范围，以Caco-2细胞单层模型研究黄酮类有效成分的双向转运机制，以表观渗透系数（Papp）为检测指标，考察时间、浓度以及P-gp抑制剂维拉帕米对转运的影响，利用Cocktail探针法研究药物对CYP450亚型的体外抑制作用。结果 从顶侧（apical, AP）到底外侧（basolateral, BL）（AP→BL），芒柄花素、毛蕊异黄酮的Papp>10-6 cm/s，表明其吸收性良好，羟基红花黄色素A的Papp为10-6 cm/s，表明其吸收性一般；且三者的转运量随浓度升高和时间延长而显著升高，BL→AP的转运量与AP→BL的转运量的比值小于1.5，其中芒柄花素、毛蕊异黄酮的转运都受到P-gp外排蛋白的外排作用；补阳还五汤黄酮类有效成分明显降低了CYP2E1、CYP1A2酶探针底物的代谢量(P<0.05)。结论 3种黄酮类有效成分在Caco-2细胞模型的转运方式均为被动转运，毛蕊异黄酮与芒柄花素明显受到P-gp的外排作用，补阳还五汤黄酮类有效成分可以增加主要通过CYP2E1、CYP1A2酶代谢的药物浓度。     

大鼠脾虚证与血清甲状腺激素及下丘脑、胸腺细胞核T3受体关系

目的：探讨脾虚证与血清甲状腺激素及下丘脑、胸腺细胞核T3受体的关系。方法：成年SD大鼠32只了随机分为4组（每组8只）：A组（正常组）、B组（脾虚组）、C组（治疗组）、D组（自复组）。采用放射配基分析法，测定各组大鼠血清T3、T4、FT3、FT4、 γ－T3 及下丘脑、胸腺细胞核T3受体的含量。结果：B、D组大鼠血清T3、T4、FT3、FT4含量均较A、C组低，有显差异（P＜0.05或P＜0.01）；各且间血清γ－T3 含量无显性差异；B、D组下丘脑、胸腺细胞T3受体含量较A、C组低，有显差异（P＜0.01）。结论：血清甲状腺激素及下丘脑、胸腺细胞核T3受体的水平降低，可导致甲状腺激素生物效应低下，经由神经内分泌免疫调节环路，削弱免疫功能，这可能是脾虚证的一种重要病机。     

针刺对睡眠剥夺受试者面部红外热成像的影响

目的 观察针刺对睡眠剥夺受试者面部新陈代谢热的影响。方法 将64例健康青年受试者随机分为4组：正常睡眠组（A组）、睡眠剥夺组（B组）、睡眠剥夺与小醒脑开窍针法配合申脉、照海穴针刺治疗组（C组）和睡眠剥夺与非经非穴针刺治疗组（D组）。A组保持正常睡眠状态，对B、C、D组同时进行24 h睡眠剥夺，次日应用红外热成像技术检测4组受试者面部热值，及观察C、D组针刺治疗后面部热值的变化。结果 红外热成像图显示，A组面部呈温热状态，B、C、D组面部呈高热状态。A组热值显著低于B组、C组和D组（P<0.05）。B、C、D 3组热值多重比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。C、D组针刺治疗后面部热值均较治疗前显著下降（P<0.05），但C组治疗后面部热值降低值显著大于D组（P<0.05）。结论 睡眠剥夺可导致面部热值升高，小醒脑开窍针法配合申脉、照海穴针刺能够降低睡眠剥夺者面部较高热值，且疗效优于非经非穴针法。     

桃红四物汤对脑微血管内皮细胞-PC12细胞共培养体系缺糖缺氧再灌注损伤模型的保护作用

目的 观察桃红四物汤对脑微血管内皮细胞-PC12细胞共培养体系缺糖缺氧再灌注损伤模型的保护作用。方法 采用氧-葡萄糖剥夺再恢复的方法诱导脑微血管内皮细胞（brain microvascular endothelial cells, BMECs）和PC12细胞共培养体系的缺糖缺氧再灌注损伤模型，并通过流式细胞仪检测PC12细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平，酶联免疫吸附法检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性，采用Western Blot法检测Bcl-2、Bax和缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）的表达水平。结果 桃红四物汤促进PC12细胞的活力，抑制细胞凋亡和ROS的产生，抑制MDA的活性，增强SOD和GSH-Px的活性，上调HIF-1α和Bcl-2的表达并下调Bax的表达。结论 桃红四物汤对脑缺血再灌注损伤的保护作用可能与抗氧化作用有关。     

酸枣仁皂苷A对脂多糖诱导星形胶质细胞C6氧化损伤的保护作用

目的 采用脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导星形胶质细胞C6的氧化应激模型，以研究酸枣仁皂苷A（Jujuboside A，JuA）的抗氧化活性。方法 体外培养大鼠星形胶质细胞C6。采用MTT法检测各组细胞的存活率，采用Western blot法检测星形胶质细胞标记蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）的活化情况，采用Griess还原法测定细胞上清液中一氧化氮（nitric oxide，NO）水平，采用流式细胞术检测各组细胞中活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平，采用ELISA测定各组细胞内丙二醛（malondialdehyde，MDA）和谷胱甘肽（L-glutathione，GSH）水平以及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性。结果 0.125～50 μmol/L JuA对C6细胞存活率无明显影响（P＞0.05）；1 μg/mL LPS可以明显升高C6细胞GFAP蛋白表达水平，显著升高细胞上清液中NO和细胞内ROS、MDA水平，降低细胞内GSH水平和SOD活性，差异均有统计学意义（P＜0.05）。与LPS组比较，12.5、25、50 μmol/L JuA可以明显抑制LPS诱导的GFAP表达，降低细胞上清液中NO水平，降低细胞内ROS、MDA水平，升高细胞内GSH水平和SOD活性，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 JuA对LPS诱导的星形胶质细胞氧化损伤具有一定的保护作用。     

糖调节受损及2型糖尿病患者血糖波动的特点

目的 研究糖调节受损及不同糖化血红蛋白（glycosylated hemoglobin A1c, HbA1c）范围2型糖尿病患者（type 2 diabetes mellitus, T2DM）的动态血糖波动特征。方法 采用动态血糖监测系统(continuous glucose monitoring system，CGMS)，根据连续2次口服葡萄糖耐量试验结果，选取正常对照组24例，空腹血糖受损组22例，糖耐量减低组23例，新诊断T2DM组62例，T2DM组再根据HbA1c水平分为T2DM A、B、C 3组。比较各组CGMS动态血糖数据。结果 ①日内血糖波动：与正常对照组比较，空腹血糖受损组、糖耐量减低组和T2DM组平均血糖（mean blood glucose, MBG）、血糖水平标准差（standard deviation of blood glucose, SDBG）、日内平均血糖波动幅度（mean amplitude of glycemic excursions, MAGE）均显著升高(P<0.05，或P<0.01)；随着HbA1c升高，T2DM A、B、C组MBG逐渐升高，差异有统计学意义(P<0.01)；T2DM B组患者和T2DM C组SDBG显著高于T2DM A组(P<0.01)；T2DM A、B、C 3组之间MAGE比较，差异均有统计学意义(P<0.01)。②日间血糖波动：与正常对照组比较，空腹血糖受损组，糖耐量减低组和T2DM A、B、C组日间血糖平均绝对差（absolute mean of daily difference，MODD）均显著升高(P<0.05)；随着HbA1c升高，T2DM A、B、C组MODD逐渐升高，但组间差异无统计学意义(P>0.05)。③HbA1c水平与MBG相关，但与MAGE、MODD均无相关性。结论 ①随着糖调节受损程度的加重，日内血糖波动及日间血糖波动逐渐增加。②HbA1c不同的患者其日内及日间血糖波动无明显差异。     

颈项针组方规律及临床应用文献分析

目的 探讨颈项针的组方规律、疗法特点和临床适应证。方法 对1994—2012年间111篇运用颈项针的临床报道文献进行分析、对比。结果 颈项针的组方遵循一定的规律，刺激量大于一般针刺法，临床应用疗效肯定，尤其对脑源性疾病，精神、神经系统疾病，运动系统疾病有较好疗效。结论 应在临床实践中开展规范化的技术操作，拓展颈项针应用范围，为临床研究打下基础。     

头穴久留针治疗血管性痴呆30例

目的 观察头穴久留针治疗血管性痴呆（vascular dementia，VD）的临床疗效。方法 将60例VD患者随机分为治疗组和对照组，每组各30例，治疗组运用头穴久留针法针刺治疗，对照组采用常规针刺法治疗，〖JP2〗治疗8周后观察并比较两组患者简明精神状态量表（mini mental state examination，MMSE）评分、Blessed痴呆量表（Blessed dementia scale，BDS）评分、Barthel指数（Barthel index，BI）及临床疗效。〖JP〗结果 治疗组临床疗效显著优于对照组（P<0.05）；两组治疗后MMSE、BDS评分及BI均较治疗前显著升高（P<0.01），但治疗组治疗前后MMSE、BDS、BI差值均显著大于对照组（P<0.01）。结论 头穴久留针法治疗血管性痴呆疗效确切，优于常规针刺疗法。     

温针灸合中药辨证治疗椎动脉型颈椎病30例

目的 探讨温针灸治疗椎动脉型颈椎病（cervical spondylosis of vertebral artery type,CSA）的临床疗效。方法 运用前瞻性随机对照试验,将60例CSA患者随机分为治疗组和对照组,每组各30例,治疗组采用温针灸配合中药辨证治疗,对照组采用普通针刺配合中药辨证治疗。2个疗程后,观察两组临床疗效、中医证候评分、以及颈性眩晕症状与功能评分。结果 治疗组临床疗效显著优于对照组（P<0.05）,治愈率显著高于对照组（P<0.05）;治疗后两组中医证候评分显著升高（P＜0.01）,且治疗组显著高于对照组（P＜0.01）。与治疗前比较,治疗后两组颈性眩晕症状和功能评分均显著升高（P＜0.05,或P＜0.01）,且治疗组颈性眩晕症状和功能评分及其治疗前后差值显著高于对照组（P<0.01）。治疗后治疗组眩晕、旋颈试验、日常生活及工作评分显著高于对照组（P＜0.05,或P＜0.01）。结论 温针灸对CSA具有较好的疗效,在改善中医证候、提高日常生活及工作能力方面明显优于普通针刺。     

耳针辨证治疗脑卒中后失眠40例

目的 观察耳针治疗脑卒中后失眠的疗效。方法 将80例脑卒中后失眠患者随机分为对照组40例和治疗组40例，分别给予安眠药治疗和耳针治疗。结果 对照组和治疗组总有效率分别为67.5%、92.5%，两组总有效率比较，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 耳针辨证治疗脑卒中失眠具有较好的临床疗效。     

芒针透刺督脉组穴联合平衡区电针治疗脑卒中后小脑性共济失调临床研究

目的 观察芒针透刺督脉组穴联合平衡区电针对脑卒中后小脑性共济失调患者的临床疗效，并探讨其与脑血流速度、脑血流阻力的关系。方法 将60例脑卒中后小脑性共济失调患者随机分为治疗组、对照组，每组30例。对照组予以平衡区电针治疗，治疗组在对照组的基础上联合芒针透刺督脉组穴，每日1次，每次留针30 min，两组均治疗2周。两组治疗前后分别采用国际合作共济失调评定量表（international cooperative ataxia rating scale，ICARS）、Berg平衡量表（Berg balance scale，BBS）评定患者的平衡能力，采用改良Barthel指数（modified Barthel index，MBI）评定患者生活自理能力，采用经颅多普勒超声检测两组患者椎动脉和基底动脉的收缩期峰值血流速度（ peak systolic velocity，PSV）和搏动指数（pulsatility index，PI）。结果 与治疗前比较，两组患者治疗后ICARS评分和椎动脉、基底动脉PI均显著降低（P＜0.05）；BBS、MBI评分和椎动脉、基底动脉PSV均显著升高（P＜0.05）；且治疗后治疗组ICARS评分和椎动脉、基底动脉PI降低程度以及BBS、MBI评分和椎动脉、基底动脉PSV升高程度均显著大于对照组（P＜0.05）。结论 芒针透刺督脉组穴联合平衡区电针疗法可显著改善脑卒中后小脑性共济失调患者平衡功能及生活自理能力。     

通调针刺法配合心理干预治疗脑卒中后抑郁疗效观察

目的 评估通调针刺法联合心理干预对脑卒中后抑郁的疗效。方法 将60例卒中后抑郁患者随机分为治疗组（30例）和对照组（30例）,对照组予以抗抑郁药物治疗,治疗组予以通调针刺法联合心理干预处理,比较两组患者临床疗效及治疗前后汉密尔顿抑郁量表（Hamilton depression scale,HAMD）评分、Barthel指数（Barthel index,BI）。结果 与治疗前比较,两组治疗后HAMD评分均显著减少（P<0.05）,BI均显著增加（P<0.05）;两组HAMD评分、BI差值比较,差异有统计学意义（P<0.05）。两组临床疗效分布比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 通调针刺法配合心理干预能有效改善脑卒中后抑郁患者抑郁症状和日常生活自理能力。     

芒针透刺督脉治疗脑卒中后肌张力障碍临床研究

目的 观察芒针透刺督脉治疗脑卒中后肌张力障碍的临床疗效。方法 将60例脑卒中后肌张力障碍患者随机分为观察组和对照组，每组30例。观察组采用芒针透刺督脉法治疗，对照组采用常规针刺法治疗。两组患者均治疗2个疗程，共21 d。分别采用改良Ashworth 痉挛量表（modified Ashworth scale，MAS）、临床痉挛指数（clinic spasticity index，CSI）评价患者肌张力情况；采用简化的Fugl-Meyer运动功能评分（Fugl-Meyer motor assessment，FMA）及改良巴氏指数（modified Barthel index，MBI）评价患者的活动能力。并用MAS分级评定标准对两组患者进行疗效评定。结果 观察组临床疗效明显优于对照组（P＜0.05）；与治疗前比较，两组患者治疗后MAS、CSI评分均明显降低（P<0.05），FMA、MBI评分均显著升高（P<0.05）；观察组患者MAS评分下降程度明显大于对照组（P<0.05），FMA、MBI评分升高程度显著大于对照组（P<0.05）。结论 芒针透刺督脉可改善脑卒中后肌张力障碍患者的肢体痉挛状态，提高患者的生活质量。     

穴位注射配合普通针刺治疗脊髓损伤60例

目的 观察穴位注射配合普通针刺疗法对脊髓损伤患者运动和感觉功能的影响。方法 将60例脊髓损伤患者随机分为对照组和治疗组，每组30例。对照组采用普通针刺治疗，治疗组加用穴位注射疗法。治疗前后分别采用美国脊髓损伤委员会(American Spine Injury Association, ASIA)脊髓残存分级标准评定两组脊髓功能，观察并比较两组患者的轻触觉、针刺觉和运动评分。结果 治疗后两组ASIA残存分级均较治疗前显著改善（P<0.05），治疗后两组轻触觉、针刺觉、运动评分均较治疗前显著升高（P<0.01），治疗组在升高轻触觉、针刺觉、运动评分方面显著优于对照组（P<0.05，或P<0.01）。结论 穴位注射配合普通针刺能有效改善脊髓损伤患者的运动、感觉功能。     

针刺对海洛因复吸大鼠脑组织GRP78和CRT表达的影响

目的 观察针刺百会、大椎穴对海洛因复吸大鼠脑组织糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78，GRP78）和钙网织蛋白（calreticulin，CRT）的影响，探讨针刺干预海洛因脑损伤的机制。方法 将40只SD雄性大鼠随机分为正常组、依赖组、模型组、针刺组和药物组，每组8只。按重复3次“染毒→戒断”的方法复制海洛因复吸大鼠模型。于实验第46天取各组大鼠海马、中脑腹侧被盖区（ventral tegmental area，VTA）脑组织，分别运用荧光RT-PCR和Western blot法，观察各组大鼠海马和VTA区GRP78和CRT蛋白及其mRNA表达水平。结果 与正常组比较，模型组和依赖组大鼠海马和VTA中CRT、GRP78蛋白及其mRNA表达水平显著降低（P<0.05）；与模型组比较，针刺组大鼠海马和VTA中CRT、GRP78蛋白及其mRNA表达水平显著增高（P<0.05）；针刺组与药物组比较，仅海马CRT mRNA表达水平的差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 针刺干预海洛因脑损伤的机制与其上调海马和VTA中CRT、GRP78的表达水平有关。     

针刺配合耳穴压豆治疗失眠36例

目的 观察针刺配合耳穴压豆治疗失眠的疗效。方法 将72例失眠患者随机分为治疗组（针刺配合耳穴压豆）和对照组（口服佐匹克隆）,每组各36例,观察两组的临床疗效。结果 治疗组治愈率和总有效率分别为58.3%、94.4%,对照组分别为30.5%、75.0%,两组治愈率和总有效率比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 应用针刺配合耳穴压豆治疗失眠,效果良好。