基于钟基因Clock和Bmal1调控探究辰时针刺自发性高血压大鼠的降压机制

目的 以自发性高血压大鼠（spontaneous hypertensive rat，SHR）为观察对象，探究针刺降压的钟基因调控作用。方法 将24只SHR随机分为针刺组和模型组，12只Wistar-Kyoto（WKY）大鼠作为正常组。针刺组选择辰时针刺SHR双侧曲池、足三里穴，模型组和正常组仅接受与针刺组同等强度的捆绑操作。4周后，各组分别在辰、酉时随机抽取6只大鼠，测量鼠尾收缩压（systolic blood pressure, SBP）和舒张压（diastolic blood pressure, DBP），然后检测血清5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）、褪黑素（melatonin, MT）的含量以及心脏生物钟基因Clock和Bmal1的表达水平。结果 分组因素对SBP、DBP、血清MT含量、Clock表达结果的RQ值、Bmal1表达结果的RQ值的主效应均有统计学意义（P＜0.05），时辰因素对各指标的主效应和两者的交互作用均无统计学意义（P＞0.05）。模型组辰、酉两个时辰的SBP和DBP均高于正常组（P<0.05），针刺组辰时的SBP和DBP及酉时的SBP均低于模型组（P<0.05）。模型组辰时MT含量较正常组降低，5-HT含量较正常组升高（P<0.05），针刺组辰时MT含量较模型组升高，5-HT含量较模型组降低（P<0.05）；针刺组酉时的MT含量较模型组升高（P<0.05）。针刺组辰时心脏Clock基因表达水平和酉时心脏Bmal1基因表达水平较模型组升高（P＜0．05）。结论 辰时针刺可以降低SHR的“双峰”血压，其作用机制可能与提高血清MT含量，减少5-HT含量以及提高心脏Clock和Bmal1基因的表达水平有关。     

艾灸对腹泻型肠易激综合征模型大鼠海马与结肠组织中IKKβ/IKBα/NF-κB通路的影响

目的观察艾灸对腹泻型肠易激综合征(diarrhea predominant irritable bowel syndrome,IBS-D)模型大鼠海马与结肠组织中核因子κB抑制蛋白(inhibitor of nuclear factor kappa B,IκB)激酶β(IκB kinase beta,IKKβ)、核因子κB抑制蛋白α(NF-kappa-B inhibitor alpha,IKBα)、核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)(P65)相对表达水平的影响,探讨艾灸治疗IBS-D的机制。方法将24只健康雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组和艾灸组,每组8只。采用慢性束缚联合番泻叶灌胃方法建立IBS-D大鼠模型。艾灸组予以艾灸"天枢""上巨虚",每日30min,每日1次,共治疗7d。治疗后,观察大鼠稀便率和直肠扩张所引起腹部回缩反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)的最小容量阈值;蛋白质印迹法检测海马和结肠组织中IKKβ、IKBα、NF-κB(P65)蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组AWR的最小容量阈值明显下降(P<0.05),稀便率明显升高(P<0.05);海马和结肠组织中IKKβ、IKBα、NF-κB(P65)蛋白表达水平明显增加(P<0.05)。与模型组比较,艾灸组AWR的最小容量阈值明显升高(P<0.05),稀便率明显下降(P<0.05);海马和结肠组织中IKKβ、IKBα、NF-κB(P65)蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论艾灸"天枢""上巨虚"改善IBS-D大鼠腹泻症状和内脏高敏感性可能与艾灸抑制海马与结肠组织IKKβ/IKBα/NF-κB信号通路有关,且其作用机制可能是通过脑-肠轴途径实现的。     

针刺对便秘型肠易激综合征大鼠肠运动及胃肠激素含量的影响

目的 观察针刺对便秘型肠易激综合征(constipation-predominant irritable bowel syn-drome,IBS-C)大鼠的小肠推进率及血清、结肠中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)、P物质(substunce P,SP)水平的影响,探讨针刺对IBS-C大鼠的作用机制.方法 从60只健康清洁级SD大鼠中随机选取10只作为正常对照组,其余50只大鼠采用寒冷-束缚-饥饱失常综合法进行IBS-C模型复制,进行模型评价后采用随机数字表法选取30只分为模型组、四单穴组方组、非经非穴组,每组10只.分别用活性炭粉悬浊液灌胃法观察各组大鼠小肠推进率,采用ELISA法检测血清5-HT、VIP、SP水平,采用免疫组织化学法测定结肠中5-HT、VIP、SP水平.结果 与正常对照组比较,模型组大鼠小肠推进率显著降低(P<0.05);与模型组比较,四单穴组方组大鼠小肠推进率显著升高(P<0.05).与正常对照组比较,模型组大鼠血清、结肠组织中5-HT、VIP水平显著升高(P<0.05),SP水平显著降低(P<0.05);与模型组及非经非穴组比较,四单穴组方组大鼠血清、结肠组织中5-HT、VIP水平均显著降低(P<0.05),SP水平均显著升高(P<0.05).结论 针刺可明显升高IBS-C大鼠小肠推进率,其作用机制可能与降低结肠、血清中5-HT、VIP水平,升高SP水平有关.     

艾灸对腹泻型肠易激综合征模型大鼠血清白细胞介素-6水平和结肠组织β-防御素-2及其mRNA表达的影响

目的 探究艾灸天枢、上巨虚治疗腹泻型肠易激综合征（diarrhea predominant irritable bowel syndrome, D-IBS)的机制。方法 将30只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、艾灸组,每组10只。采用束缚加番泻叶煎剂灌胃的方法复制D-IBS模型。艾灸组大鼠每日艾灸双侧天枢、上巨虚20 min,连续7 d。采用ELISA法检测大鼠血清白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）水平,分别采用Western blot法、RT-PCR法检测大鼠结肠组织β-防御素-2（beta-defensin-2,BD-2）蛋白及其mRNA的相对表达水平。结果 艾灸能够显著降低D-IBS大鼠升高的血清IL-6水平和结肠组织BD-2蛋白及其mRNA表达水平（P＜0.05）。结论 艾灸天枢、上巨虚治疗D-IBS的机制可能与TLR4/NF-κB信号通路有关。     

开心散治疗乳腺癌失眠症患者的临床疗效及对血清5-羟色胺水平的影响

目的 观察开心散治疗乳腺癌失眠症患者的临床疗效及对血清5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）水平的影响。方法 将63例乳腺癌失眠症患者随机分为对照组33例和治疗组30例。对照组患者采用艾司唑仑治疗,治疗组患者采用开心散联合艾司唑仑治疗。比较两组治疗前后匹兹堡睡眠质量指数量表（Pittsburgh sleep quality index,PSQI）、抑郁自评量表（self-rating depression scale,SDS）、焦虑自评量表（self-rating anxiety scale,SAS）、欧洲癌症研究和治疗协作组编制的癌症患者生活质量评分（European organization for research and treatment of cancer quality of life questionnaire-core 30,EORTC QLQ-C30）以及血清5-HT水平;在连续治疗4周后,比较两组临床疗效及不良反应发生率。结果 治疗4周后,两组PSQI、SDS、SAS评分均较治疗前显著降低（P＜0.05）,且治疗组PSQI评分显著低于对照组（P＜0.05）;治疗组EORTC QLQ-C30躯体功能、情绪功能、认知功能以及社会功能评分均显著高于对照组（P＜0.05）;两组患者治疗后血清5-HT水平较治疗前显著升高（P＜0.05）,且治疗组血清5-HT水平高于对照组（P＜0.05）;治疗组疗效优于对照组（P＜0.05）;治疗组总不良反应发生率低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 相较于单纯艾司唑仑治疗,开心散联合艾司唑仑能更好地改善乳腺癌患者睡眠,升高血清5-HT水平,提高乳腺癌患者生活质量,降低不良反应发生率。     

化瘀通络灸对血管性痴呆大鼠髓鞘再生相关蛋白表达的影响

目的 观察化瘀通络灸对血管性痴呆（vascular dementia，VD）大鼠胼胝体髓鞘相关蛋白表达的影响，为艾灸治疗VD提供依据。方法 Wistar大鼠经Morris水迷宫筛选后随机分为假手术组、模型组、艾灸组、西药组，每组12只。采用双侧颈总动脉永久结扎法制备VD大鼠模型。假手术组和模型组不作其他任何处理；艾灸组取“百会”“大椎”“神庭”悬灸20 min，每日1次；西药组用氯马斯汀（H1受体拮抗剂）溶液灌胃，每日2次。以上4组干预7 d为1个疗程，共3个疗程。采用Morris水迷宫检测干预前后大鼠学习记忆能力；免疫荧光染色和Western blot法检测大鼠胼胝体区髓鞘相关糖蛋白（myelin associated glycoprotein，MAG）、髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein，MBP）表达水平。结果 与假手术组比较，模型组大鼠逃避潜伏期延长（P＜0.05）；与模型组比较，艾灸组、西药组逃避潜伏期均显著缩短（P＜0.05）。与假手术组比较，模型组胼胝体区MAG、MBP平均荧光强度显著降低（P＜0.05）；与模型组比较，艾灸组MAG、MBP平均荧光强度显著增强（P＜0.05）；与西药组比较，艾灸组MAG平均荧光强度显著增强（P＜0.05），MBP平均荧光强度差异无统计学意义（P＞0.05）。与假手术组比较，模型组胼胝体区MAG、MBP表达水平下降（P＜0.05）；与模型组比较，艾灸组MAG、MBP表达水平增加（P＜0.05）；与西药组比较，艾灸组MAG表达水平增加（P＜0.05），MBP表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 化瘀通络灸可改善VD大鼠的学习记忆能力，促进VD大鼠髓鞘相关蛋白MAG、MBP的合成，促使髓鞘再生。     

基于NF-κB/AHR通路探讨电针“足三里”和“内关”对肠易激综合征大鼠内脏高敏感的调节机制

目的 观察电针“足三里”和“内关”穴对肠易激综合征（irritable bowel syndrome,IBS）大鼠内脏高敏感的调节机制。方法 将40只新生SD大鼠随机分为模型制备组（n=32）和空白组（n=8），采用“母婴分离结合醋酸灌肠”复制内脏高敏感大鼠模型，将模型复制成功的内脏高敏感大鼠随机分为模型组、假刺激组、电针组，每组8只。假刺激组大鼠仅电刺激非经非穴部位，空白组及模型组大鼠仅抓取，不做其他干预；电针组大鼠给予电针同侧足三里和内关穴，每次30 min，隔日1次，共4周。观察各组大鼠一般情况，体质量，粪便性状评分，内脏痛阈值，血清白细胞介素-17A（interleukin-17A,IL-17A）水平，结肠组织中芳香烃受体（aryl hydrocarbon receptor,AHR)、细胞色素P1（cytochrome P1,CYP1)、核因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB) P65蛋白表达水平。结果 与空白组比较，模型组大鼠粪便性状评分显著增加（P＜0.05）,体质量显著下降（P＜0.05）,内脏痛阈值显著降低（P＜0.05）,血清IL-17A水平显著升高（P＜0.05）,结肠组织AhR、CYP1、NF-κB P65蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05）；与模型组比较，电针组大鼠粪便性状评分显著减少（P＜0.05），体质量显著增加（P＜0.05），内脏痛阈值显著增加（P＜0.05），血清IL-17A水平显著降低（P＜0.05），结肠组织AHR、CYP1、NF-κB P65蛋白表达水平显著上升（P＜0.05）。结论 电针“足三里”和“内关”穴能降低IBS大鼠的内脏高敏感，其作用机制可能通过激活NF-κB/AHR通路，上调AHR、CYP1、NF-κB P65蛋白的表达而实现的。     

芦荟大黄素对阿尔茨海默病大鼠PI3K/AKT/mTOR通路介导自噬的影响

目的 研究芦荟大黄素对阿尔茨海默病（Alzheimers disease，AD）大鼠的神经保护作用以及可能的调控机制。方法 选择健康雄性SD大鼠30只，采用随机分组的方式将大鼠分为空白组、模型组和芦荟大黄素组，每组10只。采用腹腔注射D-半乳糖和双侧颅内海马注射Aβ25-35的方式联合进行AD大鼠模型的复制。芦荟大黄素组大鼠按10 mL/kg给予芦荟大黄素混悬液，空白组和模型组给予等容积纯水，共28 d。Morris水迷宫试验检测大鼠学习记忆能力，苏木精-伊红染色观察海马CA1区神经细胞损伤情况，Western blot法和qRT-PCR法分别检测大鼠海马磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3-kinases，PI3K)/蛋白激酶B（protein kinase B, AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（the mammalian target of rapamycin，mTOR）通路蛋白、自噬相关蛋白及其mRNA的表达水平。结果 AD大鼠学习记忆能力明显下降（P＜0.05），海马CA1区神经细胞出现明显损伤，而芦荟大黄素可显著改善 AD大鼠学习记忆能力（P＜0.05），减轻海马CA1区神经细胞损伤；AD大鼠海马p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、P62蛋白表达水平明显增加（P＜0.05），Beclin-1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平显著降低（P＜0.05），而芦荟大黄素可以显著减少AD大鼠海马p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、P62的蛋白表达水平（P＜0.05），显著增加Beclin-1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平（P＜0.05）；AD大鼠海马PI3K、AKT、mTOR、P62 mRNA表达水平显著增加（P＜0.05），Beclin-1和LC3 mRNA表达水平显著降低（P＜0.05），而芦荟大黄素可以显著减少大鼠海马PI3K、AKT、mTOR、P62 mRNA表达水平（P＜0.05），显著增加Beclin-1和LC3 mRNA表达水平（P＜0.05）。结论 芦荟大黄素能够显著改善AD大鼠的学习记忆能力，其作用机制可能是通过调控PI3K/AKT/mTOR通路介导的自噬来实现的。     

艾灸督脉组穴对血管性痴呆大鼠学习记忆能力和RAGE、LRP-1表达的影响

目的 观察艾灸督脉组穴对血管性痴呆（vascular dementia，VD）大鼠脑微血管内皮细胞（brain microvascular endothelial cells，BMECs）晚期糖基化终产物受体（receptor for advanced glycation end products，RAGE）和低密度脂蛋白受体相关蛋白-1（LDL-receptor related protein-1，LRP-1）表达的影响，探讨艾灸督脉组穴治疗VD的作用机制。方法 采用Morris水迷宫筛选后，将SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组，每组12只。采用颈总动脉结扎反复缺血再灌注法复制模型，艾灸组取“百会”“大椎”“风府”温和灸30 min，每日1次，7次为1个疗程，共治疗4个疗程。采用Morris水迷宫法对大鼠进行行为学检测，采用免疫组织化学法检测皮质和海马组织中RAGE和LRP-1表达水平，并分析行为学检测结果与RAGE和LRP-1之间的相关性。结果 各时间点模型组逃避潜伏期均较正常组明显延长（P＜0.05），艾灸组逃避潜伏期均较模型组明显缩短（P＜0.05）；模型组大鼠穿越平台次数明显少于正常组（P＜0.05），艾灸组大鼠穿越平台次数明显多于模型组（P＜0.05）。与正常组比较，模型组大鼠海马和皮质中RAGE表达增多，LRP-1表达减少，差异均有统计学意义（P＜0.05）；与模型组比较，艾灸组大鼠海马和皮质中RAGE表达减少、LRP-1表达增多，差异均有统计学意义（P＜0.05）。大鼠穿越平台次数与海马和皮质内RAGE存在显著负相关关系，与海马和皮质内LRP-1存在显著正相关关系。结论 艾灸督脉组穴可明显改善VD大鼠的学习记忆能力，其机制可能与下调大鼠BMECs的RAGE表达和上调LRP-1表达有关。     

艾灸肺俞和心俞对慢性心力衰竭大鼠心室质量指数及心肌组织TNF-α、IL-6 mRNA表达水平的影响

目的 探究艾灸肺俞、心俞治疗慢性心力衰竭（chronic heart failure，CHF）的机制。方法 将35只雄性SD大鼠分为正常组、模型组、西药组（卡托普利25 mg/kg，每日1次）、艾灸组（艾灸肺俞和心俞，温和灸，每日1次）、艾灸加西药组，每组7只。采用阿霉素隔日腹腔注射的方法复制CHF模型。3周后，测定各组大鼠左心室质量指数（left ventricular mass index, LVMI）和右心室质量指数（right ventricular mass index, RVMI），应用RT-PCR测定心肌组织肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor alpha, TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6, IL-6）mRNA的表达水平。结果 西药组、艾灸组、艾灸加西药组LVMI、RVMI及心肌TNF-α、IL-6 mRNA表达水平较模型组显著降低（P<0.05，或P<0.01）；3组间上述指标比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 艾灸改善心室重塑的作用与其降低心肌TNF-α和IL-6 mRNA的表达水平有关。     

基于PI3K/AKT/mTOR信号通路探讨化瘀通络灸促血管性痴呆大鼠髓鞘再生的作用机制

目的 观察化瘀通络灸对血管性痴呆(vascular dementia, VD)大鼠胼胝体磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)信号通路的影响,探讨化瘀通络灸促VD大鼠髓鞘再生的作用机制。方法 经Morris水迷宫筛选后,随机选取12只大鼠纳入假手术组,剩余大鼠复制VD模型成功后,随机分为模型组、艾灸组、艾灸+LY294002组,每组12只。艾灸组予以化瘀通络灸干预,艾灸+LY294002组在化瘀通络灸干预的基础上予以PI3K抑制剂LY294002腹腔注射,采用Longa评分法评价各组大鼠神经功能损伤程度,Morris水迷宫实验检测各组大鼠学习记忆能力,Western blot法检测各组大鼠PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达水平,神经髓鞘固蓝染色法观察各组大鼠胼胝体髓鞘的形态,透射电子显微镜观察各组大鼠髓鞘超微结构。结果 与假手术组比较,模型组和艾灸+LY294002组大...     

不同穴位艾灸对腹泻模型小鼠腹泻指数及小肠AQP8、VIP及SP表达的影响

目的 探讨不同穴位及配伍对腹泻模型小鼠腹泻指数的影响及艾灸干预腹泻的作用机制。方法 将昆明小鼠90只，随机分为正常组、模型组、天枢组、大肠俞组及天枢大肠俞组。采用番泻叶灌胃法建立小鼠腹泻模型，对天枢组、大肠俞组、天枢大肠俞组大鼠进行艾灸，其中天枢组选取双侧天枢穴，大肠俞组选取双侧大肠俞穴，天枢大肠俞组选取一侧天枢、大肠俞 (隔日交换对侧)，观察各组小鼠72 h后腹泻指数及小肠水通道蛋白8（aquaporin protein-8，AQP8）、血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide，VIP）及P物质(substance P，SP)免疫阳性细胞表达的变化。结果 与正常组比较，模型组腹泻指数显著增高(P＜0.05)；与模型组比较，天枢组、大肠俞组、天枢大肠俞组腹泻指数显著降低(P＜0.05)；与天枢组、大肠俞组比较，天枢大肠俞组腹泻指数显著降低(P＜0.05)。与正常组比较，模型组小肠组织AQP8免疫阳性细胞表达显著减少(P＜0.05)，VIP、SP免疫阳性细胞表达显著增加(P＜0.05)；与模型组比较，天枢大肠俞组小肠组织AQP8免疫阳性细胞表达显著增加(P＜0.05)，VIP、SP免疫阳性细胞表达显著减少(P＜0.05)。结论 天枢与大肠俞配伍治疗腹泻具有协同效应，艾灸治疗腹泻机制可能与上调AQP8表达或抑制VIP、SP表达有关。     

基于mTOR/Beclin1通路探讨血竭散对克罗恩病大鼠结肠组织自噬和炎症小体的影响

目的 研究血竭散对克罗恩病大鼠结肠组织自噬和炎症小体的影响,探讨其治疗克罗恩病的作用机制.方法 采用2,4,6-三硝基苯磺酸诱导复制克罗恩病大鼠模型.模型复制后,将36只大鼠随机分为空白组,模型组,血竭散低、中、高剂量组和柳氮磺砒啶(sulfasalazine,SASP)组,每组6只.苏木精-伊红染色法观察大鼠结肠组织...