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应用提纯的雏鹅病毒性肠炎病毒(NGVEV)抗原制备抗原诊断膜,建立了IgG的金颗粒标记、抗原抗体反应同步试验的斑点免疫金染色(DotIGS)检测雏鹅新型病毒性肠炎(NGVE,暂定)抗体的方法,只需30~40min即可判断结果;与本动物抗GPV,DPV,NDV,IBV,ILTV,MDV,IBDV,EDSV及多杀性巴氏杆菌血清不发生交叉反应;对兔抗NGVEV的IgG的最低检出量为1.0×10-10g/mL。雏鹅感染NGVEV强毒后第3d、成年鹅接种NGVEVCN40弱毒疫苗后第3d即可检测到相应抗体。对重庆市和四川省10个县(市)的617份成年鹅血清进行检测,结果NGVE的血清阳性率为30.44%~36.84%。该法适用于雏鹅感染的早期诊断、成年鹅的血清流行病学调查和疫苗免疫效果评价等。 相似文献
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火鸡与鸡等禽类Ig含量的检测,目前尚缺乏能被一般实验室普遍接受的方法。本试验用间接ELISA法,将样品直接包被微孔板,以兔抗鸡IgG,IgA和IgM血清作为第一抗体,酶标记羊抗兔IgG作为第二抗体,对火鸡1~60日龄的血清、泪液、气管冲洗液、胆汁及肠... 相似文献
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为探明特异性抗体对神经元的损伤机制,分离提取猪脊髓前角运动神经元并作为抗原免疫动物,分离纯化IgG,观察这种IgG(anti-SMN)对无血清培养大鼠脊髓神经元的影响。结果表明,培养的脊髓细胞中确有部分神经元表达LNGFRmRNA,这些阳性细胞呈多角形、三角形或椭圆形,胞浆呈蓝黑色,胞核未着色,即为运动神经元;培养神经元暴露于anti-SMN48h后,anti-SMN组LNGFR阳性细胞明显减少,狭缝杂交定量检测anti-SMN组LNGFRmRNA表达量较对照组降低60%;培养细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放量在抗体组明显增加并且呈量效关系;anti-SMN组钙结合蛋白免疫阳性神经元在培养细胞暴露于抗体48h时明显增加,胆碱酯酶((AChE)阳性细胞则显著减少。提示LNGFR参与抗体介导的神经元损伤,可作为观察脊髓运动神经元的一个特异指标,anti-SMN对培养脊髓神经元有明显的细胞毒性作用 相似文献
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用小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)与经兔轮状病毒(LaRV)免疫的BALB/c。系小鼠脾细胞进行融合,融合成功率为22%。经间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)筛速杂交瘤细胞,阳性率为29%左右。对其中6株强阳性的杂交瘤细胞进行了亚克隆,获得高产亚克隆杂交名细胞,用BALB/c小鼠生产了腹水,鉴定后选取2株强阳性高效阶的杂交瘤细胞,以ELISA阻断试验检验其分泌抗体的特异性,以直接ELISA测其敏感性,用琼脂双扩散试验鉴定类和亚类型别。结果1B_3为IgG,,2B_4为IgG_(2b)。 相似文献
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建立了胶体金标记羊抗兔IgG检测牛副结核病IgG1抗体的银加强胶体金技术(SECGA),其抗原包被浓度为20μg/mL,被检血清稀释度为1∶160,被检血清、兔抗牛IgG1、金标羊抗兔IgG的作用时间分别为10,20和60min;封闭液的浓度、作用时间和作用温度分别为含20g/L明胶pH7.4的0.01mol/LTBS,30min和37℃;被检血清、兔抗牛IgG1和金标羊抗兔作用之后用洗涤液洗涤时间和次数分别为每次5min3次,每次5min2次,每次5min1次;显影时间为15min,定影时间为2min;凡着色很深、呈均匀一致的灰黑色斑点,且与背景反差强者为强阳性;着色淡,与背景反差小者为弱阳性;不着色者为阴性。用本法检测396份疫区牛血清中抗副结核分枝杆菌PP抗原IgG1抗体,其结果对粪便培养阳性牛的检出率为92.3%;对粪便培养阴性牛的检出率为4.0%;经可靠的检验方法验证,本法的可信度至少达96.0%(44/46)。 相似文献
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