芦荟大黄素对阿尔茨海默病大鼠PI3K/AKT/mTOR通路介导自噬的影响

目的 研究芦荟大黄素对阿尔茨海默病（Alzheimers disease，AD）大鼠的神经保护作用以及可能的调控机制。方法 选择健康雄性SD大鼠30只，采用随机分组的方式将大鼠分为空白组、模型组和芦荟大黄素组，每组10只。采用腹腔注射D-半乳糖和双侧颅内海马注射Aβ25-35的方式联合进行AD大鼠模型的复制。芦荟大黄素组大鼠按10 mL/kg给予芦荟大黄素混悬液，空白组和模型组给予等容积纯水，共28 d。Morris水迷宫试验检测大鼠学习记忆能力，苏木精-伊红染色观察海马CA1区神经细胞损伤情况，Western blot法和qRT-PCR法分别检测大鼠海马磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3-kinases，PI3K)/蛋白激酶B（protein kinase B, AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（the mammalian target of rapamycin，mTOR）通路蛋白、自噬相关蛋白及其mRNA的表达水平。结果 AD大鼠学习记忆能力明显下降（P＜0.05），海马CA1区神经细胞出现明显损伤，而芦荟大黄素可显著改善 AD大鼠学习记忆能力（P＜0.05），减轻海马CA1区神经细胞损伤；AD大鼠海马p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、P62蛋白表达水平明显增加（P＜0.05），Beclin-1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平显著降低（P＜0.05），而芦荟大黄素可以显著减少AD大鼠海马p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、P62的蛋白表达水平（P＜0.05），显著增加Beclin-1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平（P＜0.05）；AD大鼠海马PI3K、AKT、mTOR、P62 mRNA表达水平显著增加（P＜0.05），Beclin-1和LC3 mRNA表达水平显著降低（P＜0.05），而芦荟大黄素可以显著减少大鼠海马PI3K、AKT、mTOR、P62 mRNA表达水平（P＜0.05），显著增加Beclin-1和LC3 mRNA表达水平（P＜0.05）。结论 芦荟大黄素能够显著改善AD大鼠的学习记忆能力，其作用机制可能是通过调控PI3K/AKT/mTOR通路介导的自噬来实现的。     

滋阴潜阳方对自发性高血压大鼠心肌纤维化相关蛋白表达的影响

目的 观察滋阴潜阳方对自发性高血压大鼠心肌纤维化的作用及其机制。方法 将40只雄性自发性高血压大鼠随机分为模型组，依那普利组，滋阴潜阳方高、低剂量组，每组10只，另取10只Wistar雄性大鼠作为正常组。各给药组分别每日2次、连续灌胃6周给予相应药物；记录各组大鼠血压值，Masson染色观察大鼠心肌组织病理变化，Western blot法检测大鼠心肌组织结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）、Ⅰ型胶原蛋白（collagenⅠ，Col-Ⅰ）、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）表达水平，RT-PCR法检测大鼠心肌组织CTGF、Col-Ⅰ、α-SMA mRNA表达水平。结果 与模型组比较，滋阴潜阳方高、低剂量组及依那普利组大鼠收缩压均显著降低（P＜0.05）；滋阴潜阳方高剂量组与依那普利组大鼠心肌组织蓝色心肌胶原纤维明显减少；滋阴潜阳方高剂量组和依那普利组大鼠心肌组织Col-Ⅰ、CTGF、α-SMA蛋白及mRNA表达水平均明显降低（P＜0.05）。结论 滋阴潜阳方能够降低自发性高血压大鼠的血压并抑制其心肌纤维化，其作用机制可能与其抑制心肌成纤维细胞的增殖、转分化有关。     

当归补血汤调节自噬干预心肌梗死模型大鼠心肌损伤的作用机制

目的 观察当归补血汤对心肌梗死模型大鼠心肌损伤的影响并探究其作用机制。方法 将大鼠随机分为假手术组，模型组，当归补血汤低、高剂量组和地尔硫 组。连续给药7 d后结扎大鼠冠状动脉左前降支复制心肌梗死模型。缺血24 h后，采用TTC染色检测心肌梗死面积，苏木精-伊红染色检测心肌的组织形态，微板法检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH)水平，ELISA法检测肌酸激酶心肌型同工酶(creatine kinase-myocardial band，CK-MB)水平，Western blot法检测磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（phosphorylate phosphatidylinositol 3-kinase，p-PI3K），磷酸化蛋白激酶B（phosphorylate protein kinase B,p-AKT），磷酸化雷帕霉素靶蛋白（phosphorylate mammalian target of rapamycin,p-mTOR）及自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1及p62蛋白的表达水平。结果 当归补血汤能明显减少心肌梗死面积（P＜0.05），降低血清CK-MB、LDH水平（P＜0.05），减轻心肌组织的病理损伤，对心肌梗死具有明显的保护作用；Western blot结果显示，当归补血汤能降低自噬通路相关蛋白p-PI3K、p-AKT及p-mTOR的表达水平（P＜0.05），升高自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1的表达水平（P＜0.05），降低p62的表达水平（P＜0.05）。结论 当归补血汤可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路，激活自噬，改善心肌梗死模型大鼠的心肌损伤。     

健脾活血中药抗肝纤维化的体外实验研究

目的 研究健脾活血中药抗肝纤维化的作用机制。方法 体外培养LX-2细胞，采用CCK-8法检测健脾活血中药冻干粉促进LX-2细胞增殖的最佳浓度；实验分为对照组、模型组［5 ng/mL 转化生长因子-β1（transforming growth factor-beta 1,TGF-β1）诱导］和中药组（5 ng/mL TGF-β1＋健脾活血中药冻干粉），采用Western blot法和免疫荧光法检测各组Ⅰ型胶原蛋白（Collagen Ⅰ，Col-Ⅰ）、Ⅲ型胶原蛋白（Collagen Ⅲ，Col-Ⅲ）、α-平滑肌肌动蛋白（alpha smooth muscle actin,α-SMA）的表达水平。结果 CCK-8法检测结果显示，1.5 mg/mL健脾活血中药冻干粉诱导的LX-2细胞增值率最高（P<0.05）。Western blot法和免疫荧光法检测结果均显示，与对照组比较，模型组LX-2细胞中ColⅠ、Col-Ⅲ、α-SMA蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）；与模型组比较，中药组LX-2细胞中Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA的表达水平均显著降低（P＜0.05）。结论 健脾活血中药通过抑制Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA的表达改善LX-2细胞纤维化。     

参七虫草胶囊干预肺间质纤维化大鼠模型PI3K/Akt信号通路实验研究

目的 观察参七虫草胶囊对肺间质纤维化模型大鼠磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（serine/threonine protein kinase B，Akt）信号通路的干预作用。方法 采用博莱霉素气道喷雾法复制大鼠肺间质纤维化模型。将40只大鼠随机分为空白对照组、模型组、氢化泼尼松组、参七虫草胶囊组，每组10只。酶联免疫吸附法测定各组大鼠治疗前后血清及肺组织中PI3K/Akt水平。结果 与空白对照组比较，模型组大鼠血清和肺组织中Akt及PI3K水平显著升高（P＜0.05）；与模型组比较，参七虫草胶囊组和氢化泼尼松组大鼠血清及肺组织中Akt及PI3K水平显著降低（P＜0.05）；参七虫草胶囊组大鼠血清和肺组织中Akt、PI3K水平显著低于氢化泼尼松组（P＜0.05）。结论 参七虫草胶囊通过抑制PI3K/Akt信号通路的激活从而抑制肺纤维化炎症反应，延缓肺间质纤维化病程进展。     

新藤黄酸通过PTEN-PI3K/AKT/VEGF/eNOS信号通路干预人脐静脉内皮细胞血管生成的研究

目的 探究PTEN-PI3K/Akt/VEGF/eNOS信号通路在新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)抑制人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial,HUVECs)迁移中的作用.方法 倒置显微镜下观察HUVECs形态变化;Boyden chamber实验以及细胞划痕实验观察GNA对HUVECs迁移能力的影响;硝酸还原酶法检测NO水平;Western blot法检测GNA及LY29400预处理对HUVECs内磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、p-AKT表达水平的影响;HUVECs转染PTEN-siRNA后,RT-PCR实验检测VEGF mRNA的表达水平.结果 GNA能有效抑制HUVECs迁移,其抑制效果与剂量相关(P<0.05).GNA和抑制剂LY294002以及L-NAME均能有效抑制NO的产生,且GNA+LY294002组、GNA+L-NAME组抑制效果更好(P<0.05);Western blot检测结果 显示,GNA上调PTEN蛋白表达水平,下调eNOS、p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平(P<0.05).RT-PCR检测结果 表明,PTEN-siRNA转染后,GNA能上调VEGF mR-NA基因的表达水平(P<0.05).结论 GNA通过PTEN-PI3K/Akt/VEGF/eNOS信号传导通路,抑制HUVECs迁移,阻止HUVECs血管生成.     

参元益气活血汤治疗冠心病心力衰竭患者临床疗效及对凝血酶、TGF-β1、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ水平的影响

目的观察参元益气活血汤治疗冠心病心力衰竭的临床疗效及对凝血酶、血浆转化生子因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、N末端脑钠肽前体(N-terminal brain natriuretic propeptide,NTproBNP)和血清Ⅰ型胶原(collagenⅠ,Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(collagenⅢ,Col-Ⅲ)水平的影响。方法将84例冠心病心力衰竭患者随机分为治疗组和对照组,每组42例。对照组给予常规西药治疗,治疗组在常规西药治疗基础上予参元益气活血汤煎剂,两组疗程均为4周。观察两组治疗前后中医症状及证候积分变化,评价临床疗效,测定血浆凝血酶、TGF-β1、NT-proBNP,血清Col-Ⅰ、Col-Ⅲ水平,采用超声心动图检测左心室舒张末内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD)、左心室收缩末内径(left ventricular end-systolic diameter,LVESD)和左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)。结果与对照组比较,治疗组治疗后中医症状及证候积分均明显改善(P<0.05),治疗组临床疗效优于对照组(P<0.05);治疗组治疗后血浆凝血酶、TGF-β1,血清Col-Ⅰ和Col-Ⅲ水平均较对照组明显降低(P<0.05),LVEDD、LVESD、NT-proBNP均明显降低(P<0.05),LVEF明显升高(P<0.05)。结论参元益气活血方能够改善冠心病心力衰竭患者中医症状及证候,提高心功能,降低凝血酶及心肌纤维化水平。     

基于PI3K/AKT/mTOR信号通路探讨化瘀通络灸促血管性痴呆大鼠髓鞘再生的作用机制

目的 观察化瘀通络灸对血管性痴呆(vascular dementia, VD)大鼠胼胝体磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)信号通路的影响,探讨化瘀通络灸促VD大鼠髓鞘再生的作用机制。方法 经Morris水迷宫筛选后,随机选取12只大鼠纳入假手术组,剩余大鼠复制VD模型成功后,随机分为模型组、艾灸组、艾灸+LY294002组,每组12只。艾灸组予以化瘀通络灸干预,艾灸+LY294002组在化瘀通络灸干预的基础上予以PI3K抑制剂LY294002腹腔注射,采用Longa评分法评价各组大鼠神经功能损伤程度,Morris水迷宫实验检测各组大鼠学习记忆能力,Western blot法检测各组大鼠PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达水平,神经髓鞘固蓝染色法观察各组大鼠胼胝体髓鞘的形态,透射电子显微镜观察各组大鼠髓鞘超微结构。结果 与假手术组比较,模型组和艾灸+LY294002组大...     

芪玉三龙汤对肺癌移植瘤小鼠PI3K/Akt/mTOR通路PI3K、Akt、mTOR表达的影响

目的 研究芪玉三龙汤对小鼠皮下移植瘤生长及对PI3K/Akt/mTOR信号通路调节的影响。方法 采用Lewis肺癌细胞培养移植法复制肺癌荷瘤小鼠模型,荷瘤成功后随机分为模型组,化学治疗组,芪玉三龙汤高、中、低剂量组,联合组;观察小鼠的生存状态,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率;Western blot法检测荷瘤小鼠肿瘤组织PI3K、Akt、mTOR蛋白表达。 结果 芪玉三龙汤高剂量组、联合组生存状态优于化学治疗组;芪玉三龙汤对肺肿瘤具有温和的抑制作用,其高剂量抑制肿瘤生长作用较优,但量效关系不明显,其与顺铂联用无明显增效作用;芪玉三龙汤可以下调PI3K、Akt和mTOR表达水平,和顺铂联用对下调关键分子Akt的表达具有明显的协同作用。 结论 芪玉三龙汤对肺癌移植瘤的抑制作用可能与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路关键分子有关,与化学治疗药联用可协同下调关键蛋白Akt的表达。     

表儿茶素对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的干预作用

目的 研究表儿茶素对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的保护作用。方法 将80只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组（0.1 mg/kg）、表儿茶素高剂量组（100 mg/kg）、表儿茶素低剂量组（25 mg/kg）。除正常对照组腹腔注射橄榄油外，其余各组均腹腔注射四氯化碳（CCl4） 建立肝纤维化模型。复制模型的同时开始给药，各给药组大鼠灌胃相应药物，正常对照组和模型组大鼠灌胃等容积生理盐水，每日1次，连续6周。末次给药后，称取肝湿质量，计算肝脏指数；采用微板法检测大鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT)水平；苏木精-伊红染色和Masson胶原染色观察肝脏病理学变化；Western blot法检测肝脏中平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin，α-SMA)、Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen，collα1)蛋白的表达水平。结果 与模型组相比，表儿茶素能显著降低大鼠的肝脏指数和血清ALT、AST的含量；显著降低肝组织中α-SMA、collα1蛋白的表达；肝组织病理学指标明显改善。结论 表儿茶素对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化有一定的保护作用，其机制可能与抑制α-SMA、collα1的表达有关。     

中毒死者体内毒鼠强的GC/MS-SIM分析

一 1 9岁男子赌气吞服一白色粉末 ,1 0min后口鼻流血、抽搐 ,迅速送医院 ,经催吐、透析等方法治疗 5天后死亡。根据中毒症状和经验怀疑为毒鼠强中毒。用GC/NPD检验肝中毒鼠强有干扰。改用GC/MS -SIM法分析 ,心血、肝和胃组织中全部检出毒鼠强 ,浓度分别为 0 5 1 μg .mL- 1、0 4 5 μg .g- 1和 0 33μg .g- 1,和文献结果在同一水平。GC/MS -SIM对复杂检材中低含量毒鼠强测定具有更高的选择性 ,也具有较高的灵敏度 ,同时进一步证实毒鼠强排泄较慢 ,经过较长时间后在体内分布比较均匀     

干部教育培训论域中的研讨式教学论析

研讨式教学是近年来各级各类干部教育培训机构大力倡导和推进的一种教学方式。文章在对干部教育培训研讨式教学研究已有文献梳理与评析的基础上,概括了干部教育培训研讨式教学的比较优势和基本流程。提升干部教育培训研讨式教学实效,必须倡导研究型教学改革理念,努力打造研讨型师资队伍,优化干部教育培训体制机制,科学设置与适时调控研讨流程。     

中国女性社会学学科意识的建构

学科意识对于学科建设和发展至关重要,中国女性社会学学科意识的建构值得探讨.中国女性社会学学科意识是指研究者从本土女性社会学学科建设出发,自觉遵循本学科内在发展规律、规范进行学术研究、对自身与学科的依存关系以及与研究共同体保持统一所应该具有的知觉状态.学科意识的发展过程划分为前学科意识时期和学科意识建构时期,经历觉醒、形成、深化和确立阶段;学科意识的未来走向会面临一些挑战.     

对“Idea/Expression Dichotomy”的认识

国内对idea/expression dichotomy译法虽还有些争议,但郑成思先生已解决了这一问题。从idea/expression dichotomy的起源和发展来看,随着版权保护范围的扩大,区分思想和表达的方法也不断精细和复杂,这些都是随着个案情况的不同而发展的,两分法从一开始就为解决版权侵权这一实际问题而产生的。两分法区分受保护的表达和不受保护的思想是在个案中认定的,没有一成不变的公式,法院应当综合考虑作者、作品利用人和社会公共利益的平衡,准确适用两分法来判定侵权与否。     

中国艾滋病宽容政策研究

宽容政策的提出是基于艾滋病传播的特点,主张政府从政策的角度对艾滋病人的基本权利作出保障,从人道主义的角度给予关怀。事实上,一切政策执行的后果只要利于艾滋病的预防就要以宽容的态度予以采纳。本文在梳理中国艾滋病政策宽容规定的基础上,提出完善艾滋病宽容策略的构想。     

"9·11时代"美国对外战略的危险"创新"

"9·11时代"美国对外战略的危险"创新"是:以"布什主义"为基本原则;以建立"新帝国"为最高目标;为实施"新帝国"战略而严重夸大外部威胁;以对"流氓国家"的"预防性战争"、"政权更迭"和"民主化改造"作为"新帝国"扩张基本手段。这些"创新"相互影响,其危险是:践踏国家主权平等、和平解决国际争端等当代国际法和国际关系基本原则,加剧国际军备竞赛和"安全困境",威胁世界和平与发展。     

固相萃取-GC/NPD检测血中毒鼠强

毒鼠强检血稀释后加入401树脂吸附,滤集树脂于小层析柱中,用二氯甲烷洗脱,洗脱液挥干加入内标物,用GC/NPD法检测毒鼠强的含量.     

益母草碱油包油微乳在小鼠体内组织分布研究

目的 探讨益母草碱油包油微乳剂和益母草碱混悬剂在动物体内药物代谢动力学特征和组织靶向性。方法 采用高效液相色谱法测定小鼠血浆与组织中益母草碱浓度,计算药物代谢动力学参数。结果 与混悬剂比较,益母草碱微乳剂在体内平均滞留时间提高了7 h,其相对生物利用度为550.684%;益母草碱微乳剂AUC(0→∞)在小鼠各组织的分布整体提高到混悬组的3.626~26.265倍;益母草碱微乳剂在心、肺和脑组织的靶向指标分别为1.044、1.335和4.772。结论 益母草碱油包油微乳提高了生物利用度,对脑组织具有较好的趋向性分布。     

川芎嗪微乳的脑靶向性研究

[摘要]目的 制备川芎嗪微乳，初步考察其在小鼠体内的脑靶向性。方法 分别给小鼠口服川芎嗪微乳和川芎嗪片剂混悬液，在给药后不同时点分别观察并比较小鼠脑部川芎嗪的血药浓度。结果 川芎嗪微乳总靶向效率(overall targeting efficiency,TE)=18.75%，川芎嗪片剂混悬液TE=12.25%；靶向指数(targeting index,TI)=606.00%，相对靶向效率(relative overall targeting efficiency,RTE)=53.06%。结论 小鼠口服川芎嗪微乳后，川芎嗪在脑部的含量明显高于小鼠口服川芎嗪片剂混悬液后脑部川芎嗪含量，且川芎嗪在脑部平均滞留时间(mean residence time,MRT)也明显延长，说明川芎嗪微乳具有脑靶向性和缓释性。