DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅲ)——应用“Myo”DNA探针进行混合斑中精液的个体认定

本文利用蛋白酶K、SDS对精液和阴道液、精液和血液的混合斑进行前处理,除去女性阴道脱落上皮细胞和血液细胞成份获得精子。提取精子DNA,用“Myo”小卫星DNA探针杂交进行DNA指纹检验,获得了高度多态性的精子DNA指纹图谱,与同一个体血液DNA指纹图谱比较完全一致,实现了混合斑中精液来源的个体认定。在对20多起强奸案例混合斑的实际应用中,成功地认定了强奸罪犯。     

DNA纹印技术的初步研究——用PYNH24探针分析MspI的RFLP

应用 Southern 印迹杂交技术,分析了人体基因组 DNA MspI 酶解物与特异探针 PYNH24杂交的限制酶切片段长度多态性,获得清晰易读的杂交图谱。50个不相关个体血样中未发现相同图谱,显示了个体特异性,为法医生物物证检验工作提供了新的分析手段。     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅰ)

应用 MYO DNA 探针对中国人进行了 DNA 遗传指纹图检验。从两个家系16人及100个无关个体中取肘静脉血提取 DNA,用限制性内切酶 HinfⅠ或 HaeⅢ水解,1%琼脂糖凝胶电泳分离,经 Southern印迹转移,MYO DNA 探针杂交,获得了清晰可辨的 DNA 指纹图谱。结果每个个体在3.0Kb 以上均能检出10条以上杂交区带,个体间的相关概率<4×10~(-9),由杂交区带构成的图谱是个体特异的,杂交区带遵循孟德尔的显性遗传方式由亲代向子代遗传;具有 DNA Fingerprints 的特点。对两起亲子鉴定的案例进行指纹图检验,孩子所存在的杂交区带,除来自母亲外,其余可在嫌疑父亲带中找到,肯定了孩子与嫌疑人的父子关系。MYO DNA 探针在亲子鉴定与个人识别的法医学鉴定中有着重要的实用价值。     

DNA技术在法医学上的应用(续)

<正> 四、DNA指纹用于个体识别因DNA具有高度多态性,因此不同个体DNA指纹图各不相同,可以进行个体识别。下面以Jeffreys的33.15DNA探针做DNA指纹图为例,说明DNA指纹图的个体识别作用。取20名随机个体DNA,以HinfI消化,Southern印迹后与33.15探针杂交,得每个人DNA指纹图。然后做相邻两个体指纹图比较,将20个个体图中区带数全部算出,取平均值、并计算标准差。然后根据相邻个体共存区带数,求出等位基     

人DNA指纹检测的初步研究

根据随机探针检测DNA限制片段长度多态性的原理和人与鼠的髓鞘硷性蛋白(MBP)基因cDNA有90％以上同源序列的事实,我们选用rMBP-cDNA 3'端非表达区高度重复顺序的0.81kb片段作探针,检测用HaeⅢ酶解的人DNA限制性片段结果可以分解出22条谱带,受检的30例无血缘关系的个体之间,没有两个人的谱带是完全相同的,显示出此方法的高度特异性。本文还比较了若干DNA片段作探针和几种限制性内切酶检测人DNA指纹的结果。     

非同位素标记DNA探针初步研究

本文报导了将辣根过氧化物酶直接标记在单链 DNA 探针上,制备出非同位素的 DNA 探针,采用化学光增强法检测杂交结果,所得图谱清晰,容易判读。所制备出的 DNA 探针可用于人类性别鉴定和个体识别,为 DNA 检验技术推广应用开辟了新的领域。     

DNA纹印的初步研究——用pYNH24探针作个体识别和家系分析

<正> 应用pYNH24特异性DNA探针,分析了人体基因组DNA MspI酶的RFLPs,获得清晰易读的图谱。190名不相关个体中,多态性为95％;8个家系45名相关个体中,等位基因的遗传     

DNA指纹的个体特异性和细胞稳定性研究

人类基因组的许多高度可变区域能够与小卫星探针杂交,而同时被检测出来,小卫星探针由串联重复的"核心"顺序构成.采用Southern印迹杂交获得的DNA指纹图包含多条高度可变的DNA片段杂交带,这些带主体细胞和生殖细胞中都表现出稳定性,而且安全具有个体特异性.本文用小卫星探针33.15,调查了北京地区的60名无关个体,     

用α-珠蛋白-3′HVR探针研究DNA纹印

<正> 用α-珠蛋白-3′HVR探针,经Southern印迹法,对100名不相关个体及4个家系的32名相关个体的DNA进行了检测,所产生的DNA纹印具有高度的多态性,在132名个体中无一相同。家系分析表明,DNA片断严格按照孟德尔方式遗传。该探针的应用,将在法医亲子     

亲权鉴定中的DNA纹印图谱和常规血清学——一种比较性研究

<正> 为了评价DNA纹印图谱在亲权鉴定中的潜在价值,本研究对经常规血清学检测作出结论的186例,用DNA纹印图谱进行复检以便与常规血清学的结论进行比较。用改良法作DNA纹印图谱,应用小卫星探针33.15(Jeffreys等,1985),在不能排除的125例中有112例(89.6％),由DNA纹印图谱得到证实。有2例(1.6％)DNA纹印图谱显示了血清学未发     

用α-珠旦白-3’HVR探针研究DNA指纹

用α-珠蛋白-3’HVR探针,经Southern印迹法,对100名不相关个体及4个家系的32名相关个体的DNA指纹进行了检测,所产生的DNA图谱具有高度的个体特异性,在被测的所有个体中无一相同。经统计学计算表明,任意两个个体DNA指纹图重合率为10~(-11)。家系分析毒明,DNA片段严格按照孟德尔方式遗传。该探针的应用,将在法医学亲子鉴定和个人同一认定中发挥重要的作用。     

第三讲 法医DNA分型技术与方法

法医ＤＮＡ分型利用分子生物学技术检测、分析人类遗传标记 ,进行个体识别和亲子鉴定。 80年代以来 ,法医ＤＮＡ分型技术跨越了两大步 ,第一代分型是以ＤＮＡ分子杂交为核心的限制性片段长度多态性分析技术 ;第二代是以聚合酶链反应 (ＰＣＲ)为基础衍生出的各种ＤＮＡ标记分析技术。1　限制性片段长度多态性分析技术早年Ｊｅｆｆｒｅｙｓ建立的ＤＮＡ指纹技术本质是ＤＮＡ限制性片段长度多态性 (ＲＦＬＰ)分析 ,技术核心是ＤＮＡ分子杂交。ＤＮＡ指纹图谱的特异性取决于 2个因素 :一是限制性核酸内切酶特异性 ;二是探针特异性。ＲＦＬＰ分析…     

HinfⅠ和HaeⅢ酶解条件对DNA指纹图的影响

用辣根过氧化物酶标记α-珠蛋白-3’－HVR探针检测同一个体的DNA，其所产生的DNA指纹图谱带随着酶解条件的变化而发生改变。由于谱带的改变，给亲子关系的同一认定带来了困难，尤其是多位点探针的检测。为了了解Hinfl和Hae皿两种酶在不同酶解时间和不同酶量的条件下对DNA指纹图谱带的影响，本文作者利用多位点探针a一珠蛋白一3’－HVR和单位点探针MSS进行检测VNTR图谱的实验。材料与方法一、材料1．无关个体血液样品取自平时破案中所剩检材；2．琼服糖（美国signla公司产）；3．Hinfl和HaeI（美国premagem公司）4．非同位素标记…     

不同方式标记非放射性探针原位杂交效果评价

目的比较不同方式标记非放射性探针的原位杂交效果。方法通过两种方法标记地高辛随机引物DNA探针和反意RNA探针,在大鼠损伤模型的皮肤组织上进行原位杂交。结果两种探针均可满足要求,以反意RNA探针在阳性染色深度和背景方面效果更佳。结论RNA探针在杂交效果方面优于DNA探针。     

DNA芯片在法医生物物证检验

DNA芯片是把许许多多已知的某种或某类DNA片段（作为分子探针）以阵列形式有序地点加在某种基质或载体上,形成分子探针的集群或矩阵,其中每个探针的位置是固定可寻的,犹如计算机的芯片一样。将被检测物质与芯片进行杂交,若其中含有与芯片中阵列DNA序列相配对的DNA片段时,通过检测手段把这些配对物检测出来,分析计算配对物的相对比率,就可以对被检物质做出检验或鉴定结论。DNA芯片又称为DNA微矩阵（DNAmicroarray犤１犦）或基因芯片（Genechips）,但作者认为不宜把DNA芯片与基因芯片等同起来,因为基因芯片应是针对可表达…     

小卫星DNA探针MZ1.3:制备、法庭案例上的应用及DNA片断图型与常规父权检验结果的比较

<正> 小卫星DNA探针MZ1.3是从人类基因库中通过筛选随机选择克隆中的超可变重复序列而分离的。详细制备方法及该选择性DNA克隆序列的细节将另行发表。自外周血细胞及尸解材料组织标本抽提的人DNA用限制性内切酶HinfI酶解,再作Southern印迹法分析。在与经~(32)P-dCTP缺口翻译的探针MZ1.3杂交后,经放射性自显影,每一个体DNA样本平     

DNA指纹及其在法医学中的应用

<正> 人类DNA高度多态性小卫星区域的发现,以及随之而来的利用特异性小卫星探针检测DNA小卫星区域所获得的DNA指纹,使法医生物学的发展进入了一个全新的领域。DNA指纹具有高度的个体特异性和稳定性,并严格按孟德尔规律遗传,它在法医个体同一认定和父权鉴定等方面的应用上,显示出了以往其它方法无可比拟的优越性。     

广东为主汉族人群19个STR基因座遗传多态性

正STR遗传标记具有高度多态性,多个不连锁的STR遗传标记联合应用时具有高度识别力,近年来成为法医学DNA分析的首选工具~([1])。由于等位基因频率在不同地区人群中具有显著差异~([2-3]),在应用STR基因座进行个体识别和亲权鉴定时需要调查该地区人群的遗传多态性。本研究对中国13 939个无关汉族个体(以广东汉族为主)使用Goldeneye誖DNA身份鉴定系统20A     

TaqMan探针技术用于X-SNP位点的分型

目的建立一种基于TaqMan探针技术的快速、准确且经济的实时荧光PCR方法,用于检测X染色体上的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)。方法选择X染色体上的13个SNP位点(X-SNP),针对每个位点分别设计1对PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增,对X-SNP位点进行分型。结果13个位点均符合Hardy-Weinberg平衡;多态信息含量分布为0.3497～0.3750,杂合度为0.4537～0.5021。建立的方法能够用于X-SNP位点的基因分型,检测结果与DNA测序结果完全一致。结论基于TaqMan探针技术的等位基因特异的实时荧光PCR方法灵敏、简单、快速,可实现对X-SNP位点的分型检测;所选择的13个X-SNP位点具有高信息量,在法医遗传学中具有潜在的应用价值。     

JL-02多位点探针DNA指纹的法医学应用研究

以自制的JL－02探针进行了DNA指纹分析，对北京地区无关个体进行了调查，计算出任意两无关个体的偶合机率为6．6×10－15；家系分析表明，谱带在亲代与子代间的传递符合孟德尔遗传规律；同一个体不同组织的DNA指纹图相同；混合斑精子DNA指纹图与相应男性血液DNA指纹图完全相同；该探针对0．5μg的基因组DNA杂交，可获得清晰可辩的DNA指纹图。证明了新探针适用于法医物证检验中的个人同一认定及亲子鉴定。