快速检测奶牛乳房炎四种病原菌的多重PCR方法的建立及应用

奶牛乳房炎是目前世界上困扰奶牛业经济效益及其发展的主要疾病之一。由于现有的检测手段繁琐复杂,所以急需一种特异敏感的检测手段对奶牛乳房炎进行快速、准确的诊断。本试验参照G en Bank发表的序列,在大肠杆菌、无乳链球菌和金黄色葡萄球菌各自保守的16-23S r RN A区域及白色念珠菌的18S r RNA区域设计了4对特异性引物,建立了检测大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和白色念珠菌等4种乳房炎主要致病菌的多重PCR方法。结果表明:本试验建立的多重PCR方法具有较好的特异性和敏感性,对参与试验的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌及白色念珠菌均能扩增出各自的阳性条带并且多重PCR检测的敏感度分别为1×102CF U/mL、1×104CFU/mL、1×105CFU/mL和1×102 CFU/mL。     

奶牛乳房炎三种主要链球菌多重PCR检测方法的建立

链球菌是引起奶牛乳房炎的重要病原菌,其中无乳链球菌(S.agalactiae)、停乳链球菌(S.dysgalactiae)和乳房链球菌(S.uberis)是奶牛乳房炎主要的致病性链球菌。为同时、快速地检测牛奶样品中这3种重要链球菌,本研究根据无乳链球菌sip基因、停乳链球菌Mig基因及乳房链球菌pauA基因设计特异性引物,同时以细菌16S rRNA基因为内参,建立了多重PCR检测方法,并进行条件优化。结果显示,该方法最佳退火温度为58℃,最佳扩增循环数为25个循环,本方法同时检测无乳链球菌、停乳链球菌及乳房链球菌时,检测限分别为1×10³CFU/m L、1×10³CFU/m L及1×10⁴ CFU/m L,灵敏性高。该方法对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌、单核细胞增生李斯特菌等10种菌均无交叉反应,特异性好。模拟样品结果显示,当奶样中3种菌的初始浓度均为1 CFU/m L时,37℃增菌6 h即可检出乳房链球菌,增菌8 h以上3种菌可全部检出。结果表明,该多重PCR检测方法具有较好的特异性和灵敏性,对同时快速检测...     

乳炎清治疗奶牛临床型乳房炎疗效观察

乳炎清治疗奶牛临床型乳房炎疗效观察刘纯传（中国农业科学院中兽医研究所兰州７３００５０）陈初茂霍杏桃陈志伟刘颖云刘玉芳孙丽琼兰海萍冼友好沈忠诚（广州市国营新洲奶牛场）乳房炎的病原微生物包括细菌、真菌、病毒、霉形体等，据国外报道共有８０多种，较常见的约有...     

绵羊致病性乳房炎链球菌的分离试验

致病性乳房炎链球菌主要包括无乳链球菌、停乳链球菌和乳房链球菌,这三种链球菌在形态上相似,其中牛乳房炎的病原体致病性较强,但无乳链球菌也可引起绵羊的乳房炎,不过病例少见,据国外资料报道;停乳链球菌可致羔羊多发性关节炎。 近几年来,在红星一牧场绵羊中流行一种以产羔母羊乳汁稀薄和产后无乳为特征的慢性传染病,给养羊事业带来一定的损失。为此,我们对该病病原进行了较为全面的调查研究,现将分离鉴定结果介绍如下。     

隐性乳房炎奶牛被毛微量元素的测定

隐性乳房炎奶牛被毛微量元素的测定商常发李光辉（安徽农业技术师范学院凤阳２３３１００）黄碧霞（中国科学技术大学）隐性乳房炎对奶牛业危害极大，已受到人们的高度重视。由于其８０％～９０％中由葡萄球菌和链球菌所引起，而这两种菌在自然界又广泛存在，所以尽管人们...     

奶牛乳房炎主要致病菌的药敏试验

奶牛乳房炎主要致病菌的药敏试验李新圃，张礼华，李宏胜，郁杰，罗金印，袁永隆，杨玉英（中国农业科学院中兽医研究所兰州７３００５０）奶牛乳房炎一直是影响奶牛业发展的多发常见病之一，虽然病原菌复杂，且各地区情况各异，但据统计，目前奶牛乳房炎的主要致病菌是金...     

我国部分地区奶牛乳房炎的病因及发病情况调查

１９８０～１９８９年对２２个城市３２个奶牛场１０３７１头成年泌乳牛进行乳房炎病因及发病情况调查，并对其中３３８４头泌乳期奶牛的１２６６０个乳区进行隐性乳房炎检查。结果，临床型乳房炎奶牛发病率为３３．４１％；隐性乳房炎奶牛头阳性检出率为７３．９１％，乳区阳性检出率为４４．７４％。采集２０１５份患乳房炎和健康奶牛奶样进行细菌学检查，临床乳房炎、隐性乳房炎和健康奶样病原菌检出率分别为８５．３７％，６２．７６％，３６．６０％，与奶牛乳房炎发生有密切关系的病原菌有１２种。     

葡萄球菌 链球菌与奶牛乳房炎的关系及其对抗菌素敏感性的研究

经试验确认在广泛使用青霉素治疗后,奶牛乳房炎的主要病原菌为凝固酶阳性葡萄球菌;乳汁中病原菌的存在,与奶牛乳房炎的发生有一定关系,但细菌的检出不能就作为奶牛健康与否的唯一标志,奶牛乳房炎的发生与否,除与病原菌存在有关外,动物机体抵抗力以及外界环境因素的影响至关重要;由于葡萄球菌、链球菌对氯霉素、红霉素、复方新诺明等药物甚为敏感,因此,目前在临床上发生葡萄球菌、链球菌性奶牛乳房炎时可首选此类抗菌药物来进行治疗,同时还须加强饲养管理,改善卫生条件,以提高动物机体的抵抗力。     

中西医结合防治奶牛隐性乳房炎

奶牛乳房炎研究在西方已有百余年历史，虽然取得了很大成绩，但尚未能彻底解决。在乳房炎中又以隐性乳房炎危害最大。据我们1982～1989年不完全调查，北京、上海、杭州、郑州、开封、洛阳等地区奶牛乳房炎的头数阳性率〔经用杭州乳房炎试剂（HMT）检定〕分别达62.7％、63.0％、60％～80％、68.9％、69.7％和69.2％；乳区阳性率分别为31.0％、35.8％～51.2％、40.0％、44.7％、36.6％和48.2％。解决隐性乳房炎难度最大的问题是病因、病原复杂、感染率高及人为因素不易控制。防治隐性乳房炎的基础是加强饲养管理和挤奶卫生，在此基础上实行…     

全身途径治疗牛乳房炎的抗菌药

乳房内注入药物是治疗牛乳房炎的最普通方法。对链球菌性乳房炎病例和某些葡萄球菌性乳房炎病例(在新西兰构成大多数乳房炎病例),这种疗法虽然细菌学治愈率比较低,但通常导致临床治愈。 链球菌性乳房炎和葡萄球菌性乳房炎,于炎症过程中其乳房组织内的管道可以堵塞,这样就妨碍了乳池内所给药物的扩散。而且葡萄球菌是组织侵入,乳池内给予的药物或许不能     

兰州两奶牛场乳房炎的细菌学观察

房乳炎是奶牛最常见的疾病之一,世界各国均普遍存在。据国际牛奶联合会统计,患有临床症状的乳房炎牛只约占2％,隐性乳房炎则高达50％。Dobblin报道,美国有1100万头奶牛,其中半数患有各种类型的乳房炎。我国奶牛的乳房炎,随着奶牛业的发展,也显得越来越突出。据吴学聪调查京郊两群手工挤奶的奶牛,隐性乳房炎的发病率为37.3％。李增莒等也抽查了昆明地区三个牛场的奶牛,潜在型乳房炎平均为31.17％,     

母猪无乳综合症防治试验

母猪无乳综合症防治试验麦楚良费劳芳，伍时达（广东省珠海特区农牧开发总公司５１９０００）（珠海市兽医防疫检疫站）母猪无乳综合症，主要表现为母猪子宫炎、乳房炎、无乳或缺乳等综合症状。我场采用综合防治效果良好，现将试验报告如下。（一）材料和方法１．材料：（...     

左旋咪唑防治奶牛隐性乳房炎

据我们对长春市郊区部分奶牛场(队)512头奶牛的调查,隐性乳房炎患病牛占49.5％,患病乳区占29.2％,给我市牛奶产量和质量以至乳制品的质量均造成了相当大的影响。 为防治奶牛隐性乳房炎的发生,已报道过的有乳区内药物注射、乳房基部封闭、乳头浴等方法,但多因麻烦费时,不易推广。     

自拟公英山甲汤治疗家畜乳房炎

乳房炎（乳痈）是由肝气郁结、胃热雍滞，导致经络阻塞、气滞血瘀为患；现代医学认为是由链球菌、葡萄球菌、化脓杆菌、结核杆菌等侵入，或饲养管理不当等因素引起。１９８９年以来，用自拟公英山甲汤治疗奶牛６例、黄牛３例、猪８例、羊６例，全部治愈。临床症状　病畜畏寒、发热，脉搏变快；乳房局部有硬结，表面增温、有压痛；产奶量下降，乳汁清稀、色黄，混有絮状物、血丝等。治法　以清热解毒、疏肝清胃、通乳消肿为治则。用蒲公英１５０ｇ，炮山甲３０ｇ，王不留行３０ｇ，二花６０ｇ，连翘３０ｇ，黄芩３０ｇ，柴胡３０ｇ，赤芍３０…     

奶牛乳房炎试纸在监测和控制隐性乳房炎试验中的效果

本文报道了应用奶牛乳房炎试纸监测乳房健康状态,对检出病牛的隐性乳房炎乳区,进行细致的处置,改善乳房状态,达到控制和治愈隐性乳房炎的效果。(一)材料和方法1.动物的选择:于万发镇应用乳房炎试纸检查泌乳母牛300头,检查出隐性乳房炎病牛128头。隐性乳房炎发病率为42.7％。     

两种左旋咪唑制剂对奶牛隐性型乳房炎的防治效果

两种左旋咪唑制剂对奶牛隐性型乳房炎的防治效果郭名荣，李玉然，欧秀华（华南农业大学广州５１０６４２）乳房炎是奶牛常见的疾病之一，会影响奶产量和奶品质，造成严重经济损失。近年来，国内外学者利用免疫调节剂增强或恢复机体固有的免疫防卫能力方面做了大量工作，并...     

复方庆大霉素注射液的质量控制及体外抑菌效果

为制备复方庆大霉素注射液,对其进行质量控制方面的测定,同时进行注射液的体外抑菌试验,以便给临床应用提供理论依据。通过预实验和L9(33)正交设计优化制备处方。对复方庆大霉素注射液分别进行澄明度检查、p H值检查、热原检测试验等质量控制研究。通过对患乳房炎母猪的乳汁进行细菌分离培养和生化鉴定,采用二倍管稀释法测定复方庆大霉素注射液和庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌的MIC和MBC。结果,复方庆大霉素注射液的最优配方为:每50 m L注射液中硫酸庆大霉素为1 g,氟尼辛葡甲胺为0.01 g,助溶剂N,N-二甲基甲酰胺为6%,稳定剂聚乙二醇为3%,抗氧化剂无水亚硫酸钠为0.06%。质量控制结果显示,注射液澄明度检查未检出可见异物,p H在7.0~7.5,无热原出现。从患猪奶样中分离出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌。体外抑菌试验结果表明,复方庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌的MIC分别是1.18、2.35、4.70 g/m L;庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌的MIC分别是2.35、4.70、9.39 g/m L。复方庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌的MBC分别是2.35、9.39、9.39 g/m L;庆大霉素注射液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌的MBC分别是4.70、18.78、18.78 g/m L。结论:确定了复方庆大霉素注射液配方,质量控制符合注射液要求,对常见的病原菌具有良好的抑菌效果。     

奶牛隐性型乳房炎乳汁某些成分病理变化初步分析

作者对某奶牛场三个队74头临床健康奶牛泌乳期乳汁(前乳)进行了细胞计数、pH、氯化物以及电导值的测定。282个乳区的前乳样品经加里福尼亚乳房炎试验(California Mastitis Test简称CMT),确定为乳房炎阴性(包括可疑反应)者204个乳区(占72.3％),乳房炎阳性乳区78个(占27.7％),并依据CMT反应等级标准确定为健康或乳房炎乳区。上述各项指标检查表明,健康(CMT阴性)乳区的乳汁细胞数为90000/毫升,pH为6.6,氯化物为0.19克/100毫升,电导值为0.41～0.42×10~4μs厘米。隐性型乳房炎(CMT阳性)乳区乳汁细胞数在515000/毫升以上,pH为6.70～7.02,氯化物为0.21～0.30克/100毫升,电导值为0.44～0.53 ×10~4μs/厘米。健康乳区与隐性型乳房炎乳区乳汁测定值比较结果差异显著。本文报道的意义在于为乳房炎的进一步研究提供基础资料。     

大瓜娄根散治疗奶牛乳房炎

大瓜娄根散治疗奶牛乳房炎张光远（黑龙江省黑河市锦河农场牧工商公司１６４３２６）大瓜娄根散是黑龙江省富裕兽药厂生产的专门治疗乳房炎的中药散剂，我们在试用的过程中与抗菌素疗法作了比较，效果比较理想。（一）材料与方法１．病牛来源：从黑河市锦河牧工商公司所属...     

昆明地区奶牛临床型乳房炎的病原分离与鉴定

近年来,昆明地区奶牛业发展很快,奶牛总头数达12000多头。可是多年来,乳房炎不断流行,发病率可高达80％。随着人民生活水平的提高,乳品质量也开始受到重视。因此,对奶牛乳房炎进行研究有很大意义,它不仅为乳房炎的防治提供了科学依据,也是乳品检验的重要内容。牛奶的微生物学质量对乳品业和消费者都有重要关系,在发达国家己列为质量和价格指标。1987年以来,本室由昆明第一农场、第三农场、海埂农场、官渡区职业中学农场和郊区奶牛专业户采取和送检93例临床乳房炎的306份乳样,进行了病原的分离和鉴定。结果报道如下。