溺死地点推断的研究进展

水中尸体是法医学实践中常见的类型之一。水中尸体的发现地往往不是其实际落水溺死的地点,而确定落水点对于寻找尸源至关重要。异物颗粒、硅藻、细菌等水中无机物颗粒和浮游生物等是应用于溺死诊断较有价值的标记物,通过比较组织器官与可疑溺液中的异物颗粒、浮游生物,根据其类型及分布情况的相似度可以推断溺死地点,且具有一定的实际应用价值。本文对有关溺死地点推断的方法进行分析和总结,旨在为同行进行溺死地点推断研究提供参考。     

沈阳市内浑河河段中硅藻数量及种群变化规律

目的观测沈阳市内浑河河段中硅藻数量及种群的变化规律,为法医学溺死鉴定及判断落水地点提供技术帮助与科学证据。方法 2011年全年对沈阳市内浑河河段布观测点,每月采集水样并观测硅藻数量及种群的变化规律,每周采集水样并观测硅藻优势种群的变化规律。结果沈阳市内浑河河段中硅藻数量、种群及优势种群均随时间、地点而变化;硅藻数量及种群数12~2月最低,之后逐渐升高,5月达高峰,略有下降10月达第二高峰期,之后迅速减少;硅藻优势种群4~11月同一采样点相邻两周间变化明显,7~8月同一周内不同采样点变化不明显。结论河水中硅藻变化规律复杂,受环境、水文等多种因素影响,在法医学溺死鉴定及落水地点推断过程中,应充分考虑硅藻数量及种群的变化规律。     

广东珠江水域硅藻种类调查

目的应用扫描电镜对广东珠江水域水中硅藻进行观察,获得珠江水域硅藻种类情况及分布状况,结果有助于法医学水中尸体死亡原因及落水水域的推断。方法收集了广东省珠江水域19个取水点的水样,采用勒福特王水进行消解,并应用扫描电镜进行观察。结果 (1)19个采样点共检出直链藻、卵形藻、小环藻、菱板藻、菱形藻、双菱藻、针杆藻、冠盘藻、舟形藻、曲壳藻、圆筛藻、短缝藻、桥弯藻、海链藻、布纹藻、波缘藻、等片藻、辐节藻、双壁藻、异极藻和羽纹藻21种硅藻,分属于羽纹纲和中心纲。(2)获得19个采样点硅藻分布数据资料。结论 (1)珠江水域硅藻种类具有一定的特点。(2)不同河域硅藻种类、数量的差异有助于法医学推断溺死落水地点。     

宁波市三江流域夏季硅藻分布

目的研究宁波市三江流域夏季水中硅藻的种类、数量及藻属分布情况,为宁波市相关水域溺死案件的法医学检验提供科学依据。方法在2015年7月和8月份采集标本水样,沿姚江、奉化江和甬江共选取14处样本水采集点,应用显微镜观察技术,通过形态特征辨析硅藻的种属和各河段的优势硅藻。结果姚江、奉化江和甬江的水体中总共发现了16类硅藻种属。姚江的直链藻属最为丰富,数量和丰富度上均高于其他流域;甬江的小环藻属丰富度高于其他流域;奉化江的羽纹藻属和楔形藻属的丰富度总体上要高于姚江和甬江。结论各个河段的硅藻种属和比例具有一定的差异,初步建立了相应流域硅藻种属及相对构成比数据库,为宁波市三江流域的溺死案件法医检验鉴定提供数据支持。     

PCR-DHPLC法检测硅藻SSU基因在溺死鉴定中的应用

目的采用PCR-DHPLC法检测硅藻SSU基因,评估其在溺死鉴定中的应用价值。方法 60只实验兔随机分为生前溺死（水中溺毙）、死后入水（空气栓塞致死后入水）、对照组（空气栓塞致死后不做处理）;溺死人体脏器组织;取各组织检材提取硅藻DNA,PCR扩增硅藻特异的核糖体小亚基（SSU）片段,用琼脂糖凝胶电泳检测、DHPLC检测分析。结果 6份硝酸消化法检测阴性的溺死人体器官组织检材经PCR及琼脂糖凝胶电泳检出5例阳性。生前溺死组肺、肝、肾硅藻检出率分别为100%、90%、85%,死后入水组仅肺检出硅藻（15%）,对照组各组织均为阴性;生前溺死组检出率明显高于死后入水组（P〈0.05）。10份溺死人体器官组织检材采用DHPLC法检出硅藻种类明显多于微波消解-扫描电镜法（P〈0.05）。脏器检出硅藻种类与溺死点水样一致。结论采用PCR-DHPLC法检测硅藻SSU基因,有助于溺死鉴定和溺死地点的推断,具有法医学应用价值。     

微波消解-扫描电镜联用法在溺死诊断中的应用

目的探讨微波消解-扫描电镜联用法在溺死诊断中的应用价值。方法收集已知死因的尸体标本105例,其中水中尸体85例(生前溺死70例,死后抛尸入水15例),陆地自然死亡尸体20例。水中死亡案例同时收集落水处水样。分别用微波消解-扫描电镜联用法(方法 A)和硝酸破机-光镜联用法(方法 B)对上述尸体的离体肺、肝、肾、骨髓组织及水样进行硅藻定性、定量检测。结果①溺死尸体的肺、肝、肾、骨髓中及落水处水样硅藻检出率:A法分别为100%、94.3%、92.9%、82.9%、100%,硅藻检验阳性率为100%;B法分别为90%、62.9%、51.4%、28.6%、92.9%,硅藻检验阳性率为65.7%。②两种方法检出的硅藻种类与落水处水样中硅藻的种类均一致。③两种方法在死后入水尸体离体的肺中也检出少量硅藻(<3个/2g肺组织),但在死后入水尸体的其它脏器及陆地自然死亡尸体脏器中均未检出硅藻。结论微波消解-扫描电镜联用法较硝酸破机-光镜联用法对尸体离体组织脏器中的硅藻检出率高,方法灵敏,定性准确。     

溺死鉴定中硅藻检验的应用

在法医学检案中,溺死诊断以及入水地点的判定一直是重点和难点之一,硅藻检验被认为是一种相对可靠的诊断溺死的方法,而根据硅藻的群落特征推断其入水区域具有一定的可信度。对不同水域内硅藻进行研究,可为溺死鉴定及入水区域的判定提供参考。本文就硅藻相关的生物学特性、检验方法等相关的国内外研究进展进行综述,供法医学工作者在相关科研和检案实践中参考。     

数字虚拟切片技术在武汉市中心城区水域春季硅藻调查中的应用

目的建立武汉市中心城区水域春季的硅藻形态及相对构成比数据库。方法2012年3、4月期间,在武汉市中心城区的主要河流、湖泊、公园水域中共选取32个采水点并进行水样采集,利用数字虚拟切片工作站（OLYMPUS-DotSlide）采集图像,对硅藻进行种属鉴别和计数。结果共检见14种硅藻藻属,各水域所含硅藻种类及相对构成比有所差异。结论本研究结果提高了硅藻的阳性检出率、计数的准确率以及溺死诊断的效率,可为溺死案件中相应水域的硅藻比对提供基础检测平台,为溺死地点的推断提供依据。     

西宁市水域硅藻分布特点在溺死鉴定中的应用

目的 研究西宁市城区主要水域硅藻的分布特点,用于涉水尸体的死亡原因鉴定及溺死地点推断.方法 收集冬季(2020年12月)、春季(2021年4月)和夏季(2021年8月)西宁市区湟水河、北川河、南川河10个采集点共30个水样,采用微波消解-真空抽滤-扫描电镜观察法,调查同一时段各采集点、不同时段同一采集点的硅藻种类和数量...     

硅藻硝酸消化法与浮游生物16S rDNA PCR法在溺死鉴定中的比较

目的比较和探讨硅藻硝酸消化法与浮游生物16S rDNA PCR法在溺死鉴定中的应用价值。方法收集40例温州医科大学法医学系2010—2011年受理并证实溺死的鉴定案件,每例案件标本包括肺、肾、肝及现场水样4份样本,分别运用硅藻硝酸消化法与浮游生物16S rDNA PCR法对标本进行检验,硅藻硝酸消化法和浮游生物16S rDNA PCR法所需各器官检材量分别为约20g和2g,现场水样分别为15mL和1.5mL,从所需检验时间以及检出率等方面进行比较分析。结果硅藻硝酸消化法检出硅藻主要为中心硅藻纲和羽纹硅藻纲,浮游生物16S rDNA PCR法可扩增出一条162 bp的条带。平均检验每例案件所需的检验时间,硅藻硝酸消化法为(95.30±2.78)min,少于浮游生物16S rDNA PCR法(325.33±14.18)min(P0.05)。两种方法对现场水样及肺样本的检出率均为100%,而对肝及肾样本的检出率,浮游生物16S rDNA PCR法均为80%,高于硅藻硝酸消化法40%和30%(P0.05)。结论在溺死的法医学鉴定中,应根据具体情况来挑选合适的实验室检验方法。与硅藻硝酸消化法相比,浮游生物16S rDNA PCR法具有检材用量少、信息量大、特异性高等特点,有一定的推广和实践价值。     

成都市主城区水中尸体多发河流区段硅藻分布

目的研究成都市主城区水中尸体多发河流区段所含硅藻的种属分布。方法采集2014年10月成都市(锦江区、金牛区、青羊区、武侯区、成华区)5条河流区段共39个采水点水样标本,制作硅藻涂片后运用生物显微镜及数码显微采集系统对水样中硅藻种属分布及构成比进行研究。结果成都主城区所检水域共检见硅藻种属21种,各水域硅藻优势种属及构成比存在差异。各河流区段上、中、下游采样点均存在差异藻属。结论初步建立了成都主城区河流区域性硅藻种属图谱及区段性种属分布构成比数据库,对分析评价硅藻检测在案件侦查中推断落水点具有特殊意义。     

Detection of diatoms in bone marrow (femur) of nondrowned (author's transl)

Diatoms in the bone marrow (femur) of 16 nondrowned bodies were detected by a modern method of ultrafiltration. The rate of diatoms were found to be in the same range as in cases of drowning. The results deny the proof of diatoms even in bone marrow to be useful any longer for the diagnosis of death from drowning.     

德州市水域中硅藻分布的研究

目的研究德州市水域中硅藻分布的特点,建立德州市春季和夏季的各水域硅藻数据库。方法对德州市主要水域的130个取水地点进行春季和夏季两次采样,用强酸消解-真空抽滤-扫描电镜法检测各水域中硅藻的种属及含量,统计分析水域中硅藻含量、群落组成、相对丰度和优势种属特点。结果夏季的硅藻含量高于春季的硅藻含量,河流两个季节硅藻含量无统计学显著差异(P>0.05),湖泊和水库两个季节硅藻含量存在统计学差异(P<0.05)。各水域之间硅藻含量存在差异,含量最高为608020个/10mL,最少为10个/10mL。各水域之间种属组成、优势种属和种属优势率存在差异。结论德州地区不同水域、不同季节的水中硅藻种属和含量具有明显的特异性;建立硅藻数据库和掌握本地区水域中硅藻种属特点,有助于德州市水域内水中尸体案件硅藻的检验和落水地点的判断。     

Detection of Diatoms by a Combination of Membrane Filtration and Transparentness,

Diagnosis of drowning remains a difficult issue in current forensic sciences. A large number of diatoms were lost by removing the supernatant after centrifugation in the conventional forensic diatom test. We developed a novel membrane filtration method to enrich diatoms from samples. A new solution using different ratios of acetic acid and eugenol is prepared to make the membrane transparent. These processes allow the diatom‐containing membrane to be visualized and identified easily by light microscopy. The tissues contaminated by water rich in diatoms were detected by the new method for the recovery of diatoms. Eleven drowning cases were analyzed by both the new method and the conventional method to compare the sensitivity of both methods. The recovery of the novel diatom test method was 54.2 ± 23.1%. The positive rate of the novel method has been proven to be superior to the conventional method in the diagnosis of drowning.     

溺死尸体器官硅藻检出率季节性差异

目的 研究溺水死亡者肺、肝、肾、骨髓等器官淡水硅藻检出率可能存在的季节性差异,为法医学解决水中尸体死因鉴定提供技术帮助与科学证据.方法 收集2009～2011年1、4、7、10月沈阳市浑河中溺死尸体每月(组)各5例;45只家兔分相应月份生前、死后入水组及对照组,分别于当月发现水中尸体后第2天入水,取人及兔肺、肝、肾、股骨骨髓及现场水样备检,应用酶消化法检测各组器官中硅藻数量、种属并与现场水样比对.结果 各组溺死尸体肺中均检出多量硅藻且种属与现场水样一致,春、秋及冬季溺死尸体肝、肾中仅可检出少量体积较小的小环藻等中心纲硅藻,夏季肝、肾及骨髓中均未检出硅藻;各组溺死家兔肺中均检出少量小环藻等中心纲硅藻,肝、肾及骨髓中未检出硅藻.结论 硅藻种群的季节性变化及不同种群硅藻体积的差异可能造成肝、肾等大循环器官中硅藻检出率的季节性差异;仅肺中检出硅藻,肝、肾中硅藻检验结果阴性并不能排除溺死可能.     

Comparison between Temperature Gradient Gel Electrophoresis of Bacterial 16S rDNA and Diatom Test for Diagnosis of Drowning

When a body is discovered in water, it is difficult to conclude whether the cause of death was drowning, even today. Although diatom testing by the digestive method is classical, we hypothesized that aquatic bacteria, as well as diatoms, might be detected in drowned bodies, and conducted temperature gradient gel electrophoresis (TGGE)‐targeting 16S rDNA. DNA was extracted from the site water, and from heart blood and liver samples from 27 bodies concluded as drowning deaths by autopsy and subjected to TGGE after amplification of 16S rDNA by polymerase chain reaction. We observed whether the feature point of each 16S rDNA from the site water and blood or liver samples matched. Considerably higher correspondence was observed in drowned bodies, and the rate was higher than that achieved with the digestive method. Moreover, TGGE is safer than the digestive method. Our study suggests that this method can aid diagnosis of drowning.     

Isolation of intact plankton from drowning lung tissue by centrifugation in a colloidal silica gradient

Several species of intact phyto- and zooplankton from the homogenate of rat “drowning lung” were separated by centrifugation in a colloidal silica gradient. The plankton, except diatoms, were isolated from a small amount of human “drowning lung” by this procedure. This new method was found to be more useful in detecting plankton in tissues than chemical digestion with strong acid.     

检测浮游生物叶绿素相关基因诊断溺死的实验研究

目的评估浮游生物叶绿素相关基因检测用于溺死诊断的价值。方法将18只大白兔随机分为溺死组（n=10）、死后抛尸组（n=6）和对照组（n=2）,各组分别取心血及肺、肝、肾、脑组织,分离浮游生物并提取其DNA,用PCR技术检测叶绿素相关基因EG（EG1和EG2）及SK（SK1和SK2）。同时用硝酸消化法检验肺和肝组织中的硅藻。结果溺死组心血及肺、肝、肾、脑组织中EG1分别检出9、10、9、7和8例阳性,EG2分别检出8、10、7、5和7例阳性;死后抛尸组仅在心血和肺组织中各检出1例EG1阳性;对照组各组织均未检出EG1和EG2。SK1、SK2除在溺死组心血、肺和肾有少数检出外（≤2例）,在其他组未检出扩增产物。硝酸消化法从溺死组肺、肝组织中分别有9例及3例检出硅藻,死后抛尸组仅在1例肺组织中检出。结论浮游生物叶绿素相关基因EG用于溺死诊断的阳性检出率要高于硝酸消化法,在溺死诊断中具有较高的应用价值。     

Study of the diagnostic value of strontium,chloride, haemoglobin and diatoms in immersion cases

Tests of haemoglobin (Hb), strontium (Sr) and chloride(Cl), as well as diatoms, toxicological and pathological studies were performed in biological samples from 133 immersion fatalities occurred since 1991 to 1996 in central and northern Spain. Hb, Sr, and Cl where analyzed in blood samples where increasing decomposition could be demonstrated in most of the cases. The samples were frequently accompanied with well documented forensic reports, including autopsies findings and other circumstances of the death. The goal of our study is to evaluate the difference of blood Sr concentration between the left and right side of the heart (LVSr–RVSr) as a marker of drowning. For this purpose, the cases investigated were classified in `typical drowning' (TD) cases and `atypical drowning' (AD) cases. This last group was used as a control. The comparison of the LVSr–RVSr between TD and AD cases was highly significant (P=0.0002) in blood specimens extracted from cases occurred in putative drowning media where Sr concentration was higher than 800 μg/l. No significant differences were found comparing neither Cl nor Hb biventricular concentrations between TD and AD cases in blood samples extracted from bodies found in both fresh and seawater.