纳米雄黄抗B16小鼠恶性黑色素瘤和抗新生血管形成作用的研究

为了用活体成像技术对纳米雄黄体内外对小鼠恶性黑色素瘤细胞(B16)增殖的抑制作用和机制进行研究,以萤火虫荧光素酶(luciferase,Luc)基因标记小鼠B16黑色素瘤(B16-Luc)细胞,用生物发光法(bioluminescent method,BLM)检测细胞增殖活性;以细胞形态学及AnnexinⅤ+PI双标记法观察细胞凋亡情况。采用B16-Luc细胞接种雄性BALB/c小鼠腋窝制作黑色素瘤模型,用纳米雄黄[4mg/(kg·d)和8mg/(kg·d)]灌胃治疗20d,以小动物活体成像系统动态观察肿瘤细胞的生长情况。治疗末期处死动物,取出肿瘤组织,固定、制片、HE染色,光镜下观察组织形态变化。结果显示,体外和体内纳米雄黄呈时间和剂量依赖性地抑制小鼠B16-Luc黑色素瘤的生长(P0.01);肿瘤组织制片观察时,经纳米雄黄治疗后肿瘤组织内微小血管显著减少(P0.01),肿瘤组织内部呈显著的坏死改变。结论:经用活体成像技术研究,纳米雄黄体内外能抑制小鼠B16-Luc黑色素瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,通过抑制肿瘤组织内新生血管的形成而发挥抗小鼠恶性黑色素移植瘤作用;与传统技术相比,活体成像技术的灵敏度更高,在监测肿瘤细胞的生长方面优势更大。     

三氧化二砷对鸡马立克氏病肿瘤细胞凋亡的影响

研究了三氧化二砷(As2O3)对诱导鸡马立克氏病(MD)肿瘤细胞株MDCC-MSB1细胞凋亡相关基因Fas、Caspase-3 mRNA表达及Caspase-3活性的影响,进而探讨了As203诱导MD肿瘤细胞株凋亡的机制.以体外培养MDCC-MSB1为研究对象,经终浓度分别为0、2、4和8μmol/L的As2O3.作用48 h后,采用荧光显微镜观察细胞的形态学变化,DNA Ladder法检测细胞凋亡情况,RT-PCR方法检测Fas、Caspase3 mRNA的表达水平,试剂盒比色法检测Caspase-3活性的变化.结果表明,As2 O3能引起典型的凋亡形态学变化,并出现典型的DNA Ladder,同时Fas、Caspase-3 mRNA的表达水平和Caspase-3活性均增加,组间差异均极显著(P＜0.01),呈现剂量依赖性.证实 As2O3诱导鸡MD肿瘤细胞株MDCC-MSB1细胞凋亡是通过增加Fas、Caspase-3 mRNA的表达和提高Caspase-3活性来实现的.     

β-粒子内照射与砷制剂联合应用抗肝癌作用研究

以发射β-粒子射线的核素32P-胶体内照射与三氧化二砷(As2O3)联合瘤体内注射,观察对小鼠肝癌肿瘤模型的抗癌作用.结果,32P-胶体联合As2O3的抗肝癌作用明显优于单纯用32P-胶体内照射和单纯用As2O3的效果,表明32P-胶体内照射与As2O3联合应用,对两种治疗方法起到互补作用,提高抑制肿瘤的效果.     

沙冬青生物碱对MDCC-MSB1细胞增殖抑制与诱导凋亡的影响

采用体外细胞培养技术、噻唑蓝(MTT)还原法、透射电子显微镜观察及流式细胞技术检测梯度浓度沙冬青总生物碱对体外培养鸡马立克氏病肿瘤HDCC-MSB1细胞的增殖抑制及诱导凋亡的作用。结果显示,沙冬青生物碱可显著抑制HDCC-MSB1细胞增殖,且这种抑制具有剂量和时间效应关系。经沙冬青生物碱作用的HDCC-MSB1细胞培养样本中有明显的DNA低含量颗粒(亚G1期峰),细胞周期各时相分布发生改变,细胞增殖在G1被阻滞,并进一步诱导HDCC-MSB1细胞凋亡。电子显微镜观察也表明,经沙冬青生物碱作用的HDCC-MSB1细胞培养样本中,大量HDCC-MSB1细胞凋亡。结果表明,沙冬青生物碱对HDCC-MSB1细胞增殖有显著抑制效应,其抑制机理为诱导HDCC-MSB1细胞凋亡。     

小鼠Ghrelin基因真核表达质粒的构建及对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响

为构建小鼠Ghrelin基因的真核表达质粒,并研究Ghrelin对3T3-L1细胞增殖的影响,以小鼠肠cDNA为模板,通过PCR扩增Ghrelin基因,插入到pMD18-T克隆载体中。对经鉴定的重组质粒pMD-Ghrelin进行双酶切,将目的基因连接到经同样双酶切的真核表达载体pcDNA3.1(+)上。重组质粒经双酶切分析和测序鉴定后,用Lipofectamine 3000转染试剂将重组表达质粒转染到3T3-L1细胞中,采用qRT-PCR和Real-time PCR检测Ghrelin基因在3T3-L1细胞中的表达。采用CCK-8法检测细胞的生长活力;流式细胞术检测Ghrelin基因对细胞周期和凋亡的影响;采用Real-time PCR检测部分周期相关基因的mRNA表达水平。结果显示,成功构建了小鼠Ghrelin基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-Ghrelin,并能在3T3-L1细胞中得到很好地表达,其表达倍数是空质粒组的5倍(P0.01);转染后第48、72和96小时,Ghrelin转染组3T3-L1细胞的生长活力明显高于空载体组(P0.05或0.01);转染后第24小时,Ghrelin转染组S期细胞数量明显高于空载体组(P0.05);Ghrelin过表达对3T3-L1细胞的凋亡无明显影响(P0.05)。qRT-PCR结果显示,Ghrelin转染组细胞的c-myc(P0.05)、E2F1、CDK2(P0.05)等mRNA的表达量也明显高于空载体组,P53表达低于空载体组,差异显著(P0.05)。以上结果表明,Ghrelin过表达能显著促进3T3-L1细胞的增殖,但不影响凋亡。     

葛根素通过激活p38 MAPK信号通路促进MC3T3-E1细胞增殖的研究

为研究葛根素(PUE)对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)的作用及其所关联的信号通路。通过培养MC3T3-E1细胞,运用CCK-8法对比加入不同浓度葛根素后细胞的增殖能力;通过CCK-8法检测最适浓度葛根素在不同时间对细胞增殖的影响;通过pNPP法测定碱性磷酸酶(ALP)的活性以检测不同浓度葛根素对细胞分化的影响;通过向p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated proteinkinase,p38 MAPK)信号通路中加入p38抑制剂SB203580分析细胞分化水平;通过蛋白质免疫印迹技术检测p38磷酸化蛋白(P-p38)表达水平;通过ELISA检测Ⅰ型胶原分泌水平。结果显示,不同浓度葛根素作用于MC3T3-E1细胞,可以不同程度促进细胞的增殖和分化,其中浓度为1×10~(-6)mol/L葛根素组的促进作用显著高于其他组。最适浓度葛根素在不同时间对细胞增殖作用有明显差异,其中48 h对细胞增殖作用最为显著。葛根素可以激活ALP,促进Ⅰ型胶原分泌,诱导细胞的分化。使用抑制剂SB203580阻断p38 MAPK信号通路后,相比于对照组,细胞增殖、ALP活力以及P-p38蛋白的表达水平明显降低。结果表明,葛根素可以通过激活p38 MAPK信号通路促进MC3T3-E1细胞增殖和分化。     

JA1对体外培养的Hep细胞和小鼠皮下移植性Hep细胞凋亡的影响

采用噻唑蓝(MTT)还原法、流式细胞术、光镜及透射电子显微镜技术等检测了梯度浓度的JA1(沙冬青提取物)对体外培养的小鼠肝癌细胞株Hep增殖的影响及诱导Hep细胞凋亡的作用;并检测了JA1对小鼠皮下移植性Hep细胞的生长抑制及诱导凋亡作用.结果显示,JA1可显著抑制小鼠Hep细胞的增殖,且这种抑制有浓度和时间依赖性.流式细胞仪分析显示,JA1处理后的Hep检测样本中有明显的DNA低含量颗粒("亚G1期"峰),细胞周期各时相分布发生了改变,细胞在G1期被阻滞.同时,JA1对小鼠皮下移植性Hep细胞也有明显的抑制作用.JA1灌胃试验组瘤组织细胞DNA直方图有明显的凋亡峰,细胞在G1期也被阻滞,光镜和电镜下可见大量凋亡肿瘤细胞.     

17β-雌二醇对小鼠胸腺上皮细胞增殖和凋亡的影响

为探讨17β-雌二醇对小鼠胸腺上皮细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制,将小鼠胸腺上皮细胞系(MTEC1)细胞经不同浓度的17β-雌二醇处理24 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖活力的变化;流式细胞术检测细胞周期的变化;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况;DAPI染色法检测细胞核形态的变化;高通量测序技术获得差异基因表达谱并运用KEGG通路分析预测差异基因的作用通路;String基因互作分析差异基因的相互作用;实时荧光定量PCR验证p53通路相关基因的表达情况。结果显示,17β-雌二醇显著抑制MTEC1细胞的增殖活力,并呈浓度依赖性;使细胞周期出现G2/M期阻滞;能诱导MTEC1细胞凋亡,细胞核呈现不规则形态、核碎片、染色质凝聚和凋亡小体等典型的凋亡特征;KEGG通路分析显示,与细胞增殖和凋亡密切相关的p53信号通路呈极显著性差异;String基因互作分析显示,p53信号通路的相关基因互相作用,形成紧密联系的网络;p53信号通路的下游周期基因Cyclin B1表达下调,凋亡相关基因Trp53、Gadd45a、Fas、p21、Apaf1和Bax的表达水平显著上调。结果提示,雌激素可能通过p53信号通路对MTEC1细胞的增殖抑制、周期阻滞和细胞凋亡产生影响。     

冬虫夏草菌丝水提液对SP2/0细胞凋亡的影响

在冬虫夏草菌丝水提液诱导下,采用Hoechst33342荧光染色、MTT、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪等方法,观察和分析了SP2/0细胞的凋亡情况。结果显示,冬虫夏草菌丝水提液可抑制SP2/0细胞增殖,在荧光显微镜下,凋亡细胞呈亮绿色,DNA琼脂糖电泳可见典型的“阶梯状”条带,Annexin-V-FITC和碘化丙啶(PI)双染后流式细胞仪分析显示,细胞凋亡数量明显增多。表明,冬虫夏草菌丝水提液对SP2/0细胞增殖的抑制作用可能与诱导其凋亡有关。     

镉对小鼠生精细胞凋亡及bax和bcl-2基因表达的影响

将150只小鼠随机分成4个处理组和1个对照组,每组30只。给4个处理组小鼠分别一次性注射氯化镉1、2、4、6 mg/kg(按体重给药),对照组小鼠注射等体积的生理盐水。于注射后第3、6和9 d用原位末端标记法(TUNEL)测定睾丸内生精细胞的凋亡率,并用免疫组织化学方法检测bax和bcl-2基因的表达水平。结果显示,各染毒组小鼠的生精细胞凋亡率明显升高,与对照组相比差异显著(P<0.05),并具有剂量-反应关系和时间-反应关系。bax基因的表达水平明显上升,而bcl-2基因的表达水平明显下降。表明,镉可以诱导小鼠生精细胞凋亡,其机制可能与bax基因上调和bcl-2基因下调有关。     

印尼华人家庭媒体使用现状分析——基于对雅加达500余名新生代华裔青少年的调查

调查发现，就印尼华人家庭而言，代际不同，对媒体的使用倾向也不相同。祖辈常用媒体依次为报纸、广播、影视、杂志和网络；父辈最常用的媒体依次为报纸、影视、杂志、广播和网络。新生代华裔青少年常用媒体依次为网络、影视、广播、杂志和报纸。要提高中国传统文化的传播效度，必须注意传播策略，重视网络与影视的作用。     

毛里塔尼亚政变透析——兼论非洲民主化进程

2008年8月6日,毛里塔尼亚参谋部负责人阿卜杜勒-阿齐兹以"挽救国家的民主进程"为由,成功发动了军事政变.这是政治、经济、社会等多种因素共同作用的结果,是毛塔军政传统的延续,也是国民思变情绪的释放,体现了决策人物在其中的个人影响力,显示了现代民主政治的变异形式.它也表明非洲国家民主化进程的渐进性,并将对毛塔未来的政局走向和非洲民主化进程产生一定的影响.     

留学科威特札记

科威特国土总面积17.818万平方公里，东临波斯湾，海岸线长290公里，与伊朗隔海相望；西南部与沙特阿拉伯接壤，边界线约250公里；北部和西部与伊拉克相邻，有240公里的公共边界线。优越的地理位置使科威特享有“阿拉伯半岛东北……     

孟加拉国的政治民主化历程

孟加拉国的政治民主化历程可谓具有很强的自身特色。从建国初期的议会民主制到军人统治的总统制再到议会民主制 ,其经历犹如是一个圆圈 ,经过一段时间之后又回到了起始点。其一波三折的历程也显得异常地艰苦和漫长。同时孟加拉国又是南亚地区的大国 ,在南亚非常具有代表性 ,研究其政治民主化有助于我们理解其他南亚国家和发展中国家的民主化进程。所以本文拟就孟加拉国自建国之日起至 1991年的政治民主化发展历程和出现挫折的原因进行论述 ,并对孟加拉国当前的民主化现状和未来的前景进行分析和探讨。     

莱姆病的研究进展

结合国内外对莱姆病的研究结果,从病原学、流行病学(地理分布、贮存宿主、传播媒介和易感人群)、发病机理、临床症状、诊断(包括病原学诊断、血清学诊断和分子生物学诊断)、预防和治疗等方面阐述了莱姆病的研究进展,旨在为该病的深入研究提供参考。     

猪尘肺的病理组织学研究

对甘肃省河西地区102例猪的肺和支气管淋巴结进行了病理学研究。生前虽难以确定特征症状、但宰后可见一定的大体变化。组织上首次在国内发现了无机尘肺的病理改变。其病变可分为局灶型与弥漫型两型。前者呈星散状分布,多位于细支气管和肺泡隔局部,其特征是在粉尘灶或尘细胞积聚处有明显的结缔组织增生和淋巴细胞浸润。附近的肺结构也有一些形态改变。后者病变主要表现为弥漫性支气管周炎,几乎所有的支气管树都受到侵害。管周结缔组织增生和粉尘沉着。在严重病例,结缔组织可长入肺泡隔和小叶间。弥漫性生肺是局灶性尘肺的进一步发展,主要发生于浮尘含量很高的河西走廊西端的安西县。     

中国的伊朗研究六十年

伊朗与中国代表着世界的两大文明。自古以来,中国对波斯文明的探索没有中止过。现代中国对伊朗的了解和介绍,在20世纪初期即已展开,80年代以来进入全面研究伊朗的高潮时期,迄今取得的成果已超过1500项,研究机构近50家,研究者达数百人,队伍在继续扩大,水平不断提高。回顾中国的伊朗研究,漫漫求索路,起步于百年前、曲折于60年间,经验值得总结,挫折让人警醒;展望未来,机遇和挑战催人奋进,期待建立伊朗学研究体系,整合与推动中国的伊朗研究,把研究提高到新的水平。     

2004年"国际形势研讨会"在京举行

2004年"国际形势研讨会",于2004年11月23-24日在北京举行。研讨会是由中国国际问题研究所和中国国际问题研究和学术交流基金会联合举办的。中国国际问题研究所所长马振岗主持会议并发表了主旨报告。中国国际问题研究和学术交流基金会会长、前外交部副部长徐敦信致开幕词。     

2010年四川省黑热病疫区利什曼原虫家犬感染情况的调查

为了解四川省黑热病疫区黑水县、汶川县、九寨沟县、茂县和北川县2010年利什曼原虫的家犬感染情况,采用荧光定量PCR反应检测自上述地区采集的584头份犬前肢静脉血样本。结果显示,总阳性检出率为18.1%,其中黑水县25.3%、汶川县24.7%、九寨沟县24.6%、茂县12.3%、北川县8.3%。按照性别、年龄差异将样本分组后对检测结果进行数据统计分析、比较组间差异,结果显示性别组阳性检出率没有显著差异(P>0.05),雄性高于雌性;年龄组差异显著(P<0.05),1岁以上犬易感。检测结果对正确预测四川省黑热病疫区疾病流行趋势,保障人民健康安全和公共卫生安全具有指导意义。