氯胺酮胶体金标记单克隆抗体免疫层析检测板的研制

目的建立一种简便快速检测氯胺酮的方法。方法将20nm胶体金颗粒标记的抗氯胺酮单克隆抗体,均匀浸在吸水玻璃纤维上,用点膜机将氯胺酮-BSA和纯化后的羊抗鼠IgG多克隆抗体在硝酸纤维薄膜分别划1mm宽的检测线(T线)和质控线(C线),然后依次将吸水玻璃纤维、硝酸纤维薄膜和吸水滤纸粘贴于白色的塑料片上,切成0.5 cm×10 cm大小,制成氯胺酮胶体金标记单克隆抗体免疫层析检测条,并组装成检测板,并检测其特异性和灵敏度。结果氯胺酮胶体金标记单克隆抗体免疫层析检测板在对46种药(毒)物的测试中,仅识别氯胺酮及其主要代谢产物,其准确性为97.6%,检测氯胺酮的阈值为1000ng/m l。结论氯胺酮胶体金标记单克隆抗体免疫层析检测板在5m in内可检出样品中的氯胺酮及其代谢物。     

检测丁丙诺啡的胶体金标记单克隆抗体免疫试剂盒研制

目的采用免疫竞争法原理,建立一种简便快速检测丁丙诺啡的方法。方法将20nm胶体金颗粒标记的抗丁丙诺啡单克隆抗体,均匀浸在吸水玻璃纤维上,将丁丙诺啡-BSA和纯化后的羊抗鼠IgG多克隆抗体在硝酸纤维薄膜分别划1mm宽的检测线(T线)和质控线(C线),制成丁丙诺啡胶体金标记单克隆抗体免疫层析检测条,并组装成检测板。结果以GC/MS为标准对照,100例样品检测结果显示,本检测板的准确率为99.0%。丁丙诺啡胶体金标记单克隆抗体免疫层析检测板在对45种药(毒)物的测试中,仅识别丁丙诺啡及其主要代谢产物。结论丁丙诺啡胶体金标记单克隆抗体免疫层析检测板在5min内可检出样品中的丁丙诺啡及其代谢物,检测丁丙诺啡的阈值为100ng/mL。     

胶体金免疫层析一步法快速检测Glm(3)因子

建立一种简便快速的胶体金免疫层析一步法,用于检测Glm(3)因子.采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗人Glm(3)单克隆抗体,研制出抗人Glm(3)因子免疫层析检测试剂盒.样品的Glm(3)因子,与测试条上的金标记抗体结合后沿着反应膜移动,再与膜上固相抗体结合形成肉跟可见的红色反应带.使用该方法可检出10万倍稀释的血清样品,整个试验只需5min完成.对常见的23种动物血(痕)检验,未出现交叉反应.在100例样品的检测中,本方法的检测结果,与Dot-ELISA的检测结果的符合率为100%.该方法适用于法医物证快速检验.     

胶体金免疫层析一步法快速检测G1m(3)因子

建立一种简便快速的胶体金免疫层析一步法 ,用于检测 G1m(3)因子。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记抗人 G1m(3)单克隆抗体 ,研制出抗人 G1m(3)因子免疫层析检测试剂盒。样品的 G1m(3)因子 ,与测试条上的金标记抗体结合后沿着反应膜移动 ,再与膜上固相抗体结合形成肉眼可见的红色反应带。使用该方法可检出 10万倍稀释的血清样品 ,整个试验只需 5 min完成。对常见的 2 3种动物血 (痕 )检验 ,未出现交叉反应。在 10 0例样品的检测中 ,本方法的检测结果 ,与 Dot- EL ISA的检测结果的符合率为 10 0 %。该方法适用于法医物证快速检验。     

胶体金标记检测大麻单克隆抗体免疫试剂盒研制

目的 建立准确、快速、简便的检测尿液中大麻的胶体金免疫层析技术(ICT)。方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗主要代谢物四氢大麻酚-9-羧酸,THC与GC/MS检测方法相比,用ICT法的216份尿样,其检测限为50 ng/ml,灵敏度为96.67％,准确性为98.61％。结论 ICT法检测尿液中THC,其特异性强,对确定大麻的存在具有广泛的应用价值。     

胶体金标记苯丙胺单克隆抗体免疫试剂盒研究

目的建立一种准确、快速、简便的检测尿液中苯丙胺(AMP)的胶体金免疫层析技术。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗AMP单抗,将AMP—BSA抗原固相于硝酸纤维素膜上,制备胶体金免疫层析测试条。通过尿液、血液和唾液中的可能存在的苯丙胺成分与测试条上的苯丙胺-BSA完全抗原竞争结合有限的单抗结合位点,来判定检测结果。结果用ICT法和GC/MS检测217份尿样,本法检测阈值为1000ng/mL,特异性为99.17%,准确性为99.54%。结论ICT法检测尿液中的AMP特异性强,灵敏度高、简便快速、无需特殊仪器设备,具有广泛应用价值。     

检验人精浆特异蛋白P30免疫胶体金试剂条的研制

目的制备用于检验人精浆特异蛋白P30-主要是来自法医学案件的免疫胶体金层析试剂条.方法选取针对不同抗原决定簇的抗P30单克隆抗体细胞株,并制备其小鼠腹水,分离纯化单克隆抗体.制备胶体金并以纯化抗体包被,制成免疫胶体金,以免疫胶体金浸泡玻璃纤维.选取适宜的硝酸纤维素膜并于其上不同位置以未金标的另一株P30单克隆抗体和羊抗鼠IgG包被.搭建试剂条并检测其灵敏度和特异性.结果所制成的试剂条灵敏度至少可达4ng/ml;对6人份混合的人精液物质在稀释20万倍后仍出阳性结果,且无非特异性反应.结论检验人精浆特异蛋白P30的免疫胶体金试剂条可对嫌疑人精物质做出排查,有利于法医物证检验.     

杀虫剂呋喃丹的生物吸附研究

研究桔皮颗粒(OP)、桔皮炭(OPC)和桔皮灰(OPA)对杀虫剂呋喃丹的吸附效果。控制单一变量法,不同质量浓度的呋喃丹溶液,加入一定量的吸附剂,对比OP、OPA和OPC的吸附效果。结果发现:桔皮能被作为有应用潜力的生物吸附剂用于吸附水溶液中呋喃丹。用吸附过呋喃丹的桔皮颗粒制成的桔皮炭和桔皮灰用于环境废水的进一步处理中,可以达到以废治废的效果。     

家兔死后不同时间角膜基质胶原纤维的超微结构观察

目的探讨角膜基质胶原纤维直径变化与死亡时间的关系。方法28只家兔空气栓塞致死后,按死后不同时间取角膜,常规方法制作超薄切片,应用透射电镜观察角膜基质0.5μm×0.5μm区域内的胶原纤维,并用图像分析系统测量反映胶原纤维直径变化的横切面面积(Y1)、周长(Y2)、平均直径(Y3)、等效直径(Y4)4个参数,所得数据用EXCEL2000和SPSS10.0软件进行统计分析。结果在死后0～72h内,角膜胶原纤维横断面的面积从1131±53nm增加到1628±26nm,周长从132.8±23nm增加到167.5nm,等效直径从38nm增加到45nm,平均直径从37.71±6nm增加到44.89±5nm。结论死后72h内,角膜基质胶原纤维直径随死后时间的延长逐渐增大,4个参数有望作为判断死后时间的新指标。     

基于上转换发光技术的尿液中吗啡及甲基苯丙胺快速定量检测方法研究

目的利用上转换发光免疫层析技术(UPT-LF)建立一种尿液中吗啡(MOP)及甲基苯丙胺(MET)快速定量检测方法并对其进行系统评价。方法以上转换发光纳米颗粒(UCP-NPs)作为生物示踪物,竞争模式免疫层析作为检测平台,建立可对尿液中MOP及MET进行定量检测的UPT-LF,即MOP-UPT-LF、MET-UPT-LF。以MOP-UPT-LF为代表,评价UPT-LF对痕量毒品检测极限,通过系列浓度标准品测定,评价定量检测能力。根据常规检测阈值,调整MOP-UPT-LF及MET-UPT-LF检测敏感性及线性范围,并评价其定量检测能力。以LC-MS、GC-MS分别作为MOP、MET检测的金标准,以胶体金免疫层析作为对照,对执法现场收集尿样进行检测,确定UPT-LF定性检测性能。对系列浓度MOP模拟阳性样本同时进行LC-MS及MOP-UPT-LF定量检测,对系列浓度MET模拟阳性样本同时进行GC-MS及MET-UPT-LF定量检测,评价UPT-LF定量检测性能。结果在痕量检测条件下,MOP-UPT-LF敏感性可达1ng/m L,线性范围为1~5000ng/m L(r=-0.98172,P<0.0005)。在常规检测条件下,MOP-UPT-LF敏感性为50ng/m L,线性范围调整为50~3000ng/m L(r=-0.98464,P<0.0005);MET-UPT-LF敏感性为100ng/m L,线性范围为100~5000ng/m L(r=-0.99964,P<0.0005)。就定性检测而言,MOP-UPT-LF及MET-UPT-LF均较优,灵敏度及特异度均为100%,与胶体金结果一致。就定量检测而言MOP-UPT-LF及MET-UPT-LF与定量确证方法LC-MS及GC-MS无显著差异。结论本研究建立MOP-UPT-LF、MET-UPT-LF方法,在满足快筛试剂快速简便的基础上,进一步实现了现场快速定量检测,为尿液中毒品的现场快速定量检测提供了技术保障。     

兔尿中敌鼠及其代谢物的HPLC-DAD分析

目的 尿中敌鼠及其代谢物的HPLC分析方法研究。方法 用CN柱和SAX柱的固相萃取(SPE)技术分离提取兔尿中的敌鼠及其代谢物,用香豆素作内标,用HPLC-DAD方法进行fenxi。色谱柱:Hypersil BDSC_(18)(150×4.6mm):保护柱:Phenomenex C_(18) (ODS,4×3.0mm,Octadecyl;流动相A:0.5％离子对A水溶液,B:0.5%离子对A甲醇液,梯度程序洗脱;DAD检测波长为311nm。结果 在中毒的兔尿中检出11种敌鼠代谢物。结论 此方法简单、准确、快速。     

血液中青霉素的HPLC分析

<正> 青霉素(Penicillin G)钾盐为白色结晶,易吸潮,遇酸、碱或氧化剂等迅速失效,水溶液于室温放置也易分解。人体肌注后15～30 min血浓度达到高峰值,有60％～90％原形物从肾脏中排出。极易溶于水,在甲醇、乙醇中溶解,在脂溶性溶剂中不溶解。 青霉素的化学结构为:     

创周围六种金属痕迹的显现

<正> 利用金属印痕彩色显现方法,显现金属凶器遗留在衣服创口周围的金属成份及分布,从而确定凶器特征,现介绍如下。一器材与试剂器材紫外线灯、玻璃或塑料皿、印(放)相纸、竹夹子、上光机、量杯等。试剂 (1)溶解剂:12%氨水,10～25%醋酸,酒石酸缓冲液;(2)显色剂:红氨酸甲醇饱和液,0.2%玫红酸钠(钾)水溶液,0.05%铁氰化钾盐酸溶液;桑色素甲醇饱和液,5%     

SPE-HPLC分析全血中37种药（毒）物

目的建立全血中37种常见药(毒)物的固相萃取-高效液相色谱(SPE-HPLC)分析方法。方法以多沙普仑为内标,0.5mL全血经Oasis小柱固相萃取后,用HPLC进行分析,内源性物质不干扰测定。色谱柱采用LiChrospher!100RP-C18柱(250mm×4.0mm×5μm);二极管阵列检测器,检测波长为230nm和250nm,同时进行紫外扫描;柱温50℃。结果37种药(毒)物的绝对回收率除吗啡外均大于61.68%;日内及日间精密度均小于10%;检测限1～30ng/mL;线性相关系数在0.99798以上。结论本法快速、灵敏、重现性好,可用于实际案例中多种药(毒)物的分析。     

3种甲苯胺蓝异染肥大细胞方法的比较

目的比较3种甲苯胺蓝异染肥大细胞方法的应用性。方法采用甲苯胺蓝水溶液与高锰酸钾配比染色（方法一）、甲苯胺蓝酒精溶液和氯化钠溶液配比（方法二）、甲苯胺蓝水溶液染色、冰醋酸分色（方法三）3种方法对人和小鼠肺组织冰冻切片进行染色,比较染色结果、并评价方法稳定性及实用性。结果方法一染色肺组织切片,结果切片蓝色背景清晰,肥大细胞胞质内紫红色颗粒鲜明,与背景蓝色对比度高,易辨识,且多次重复染色效果稳定;方法二及方法三肺组织的蓝染背景、和肥大细胞胞浆颗粒的紫红色染之间的对比度均不及方法一清晰,稳定性亦次之。结论甲苯胺蓝水溶液与高锰酸钾配比染色法异染肺组织冰冻切片,结果清晰、操作简便且稳定性好,适合在相关检验中选用。     

4种溶液对陈旧斑迹胶体金试剂条ABO检测结果比较

目的比较4种不同溶液用于陈旧斑迹ABO胶体金试剂条分型检验的结果。方法采集已知血型的静脉血127份,唾液73份制备斑迹,放置1~2年;分别用去离子水、PBS、PBS(含2%吐温20)、PBS(含2%吐温20、1%吐温80)4种溶液浸泡,再用ABO胶体金试剂条检测其血型,观察结果的清晰度及准确度。结果用不同溶液浸泡后进行ABO分型检测结果中,去离子水和PBS溶液分型检测线不清晰,难以判型;含吐温的PBS溶液分型检测线比较清晰,所测样本结果均准确,其中同时含吐温20和吐温80的溶液结果更佳。结论根据本文结果,在陈旧斑迹的ABO血型检验中可选择使用含有吐温的PBS溶液作为斑迹浸泡溶液。     

QTRAP LC-MS/MS同时测定毛发中20种毒品及代谢物

目的建立了毛发中20种毒品及代谢物的液相色谱-四极杆/线性离子阱质谱(QTRAP LC-MS/MS的检测方法。方法将洗净的毛发样品粉碎后经甲醇超声提取,离心取上清液过滤膜后,以含有5mM氟化铵的水溶液和乙腈作为流动相,经Phenomenex Kinetex?Biphenyl(100×3.0 mm, 2.6μm)分离,采用多反应监测(MRM)、信息依赖性采集(IDA)、增强子离子扫描(EPI),结合20种毒品EPI谱库检索的多步模式进行分析。结果 20种毒品及相关代谢物在浓度范围0.02ng/mg～2ng/mg内线性良好,线性相关系数均大于0.995;方法检出限(S/N=3)为0.10ng/g～1.00ng/g;在0.05、0.20、1.00ng/mg 3个添加水平的回收率为80.1%～110.3%,相对标准偏差1.05%～6.39%。结论本方法简便、快捷、可靠、灵敏度高,可满足鉴定工作需要。     

UPLC-MS/MS测定全血中的氯丙嗪

目的建立全血中氯丙嗪的UPLC-MS/MS分析方法。方法采用乙腈沉淀蛋白,以Waters ACQUITY UPLCBEH C18柱(2.1mm×50mm,1.7μm)分离,乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,正离子方式检测,多反应离子监测模式(MRM)。结果血液中氯丙嗪在1～100ng/mL范围内线形关系良好,检出限为0.01ng/mL,回收率为81.81%～89.36%,日内、日间精密度分别为9.3%、12.1%。结论本方法准确、快速,可用于全血中氯丙嗪的定性定量分析。     

刚果(金)社区警务

一、刚果(金)警务工作刚果(金)自2002年开始开展了警务改革,部分军队人员纳入国家警察部队,并成立刚果(金)国家警察部队(PNC)。三年后,刚果(金)国家政府成立了国家警察委员会,并就此提出一系列建议,为刚果(金)的警察改革议程铺平了道路。2007年,刚果(金)政府会同部分外国驻刚果(金)大使馆成立了警察改革委员会(CSRP)来领导国内警务改革。     

微波消解ICP-MS法检测生物检材中汞元素

目的 建立生物检材中汞的电感耦合等离子体质谱分析方法.方法 采用微波消解法处理样品,以铟(115In)作内标,用电感耦合等离子体质谱仪对血液、尿液和头发中的汞含量进行分析.选择金与汞形成金汞齐,对金消除汞记忆效应的能力进行考察.结果 方法检出限为0.01μg/L,准确度为97.0%～107.1%.检测中添加金质量浓度在...