硅珠法提取骨组织DNA

骨骼是硬组织 ,抗腐蚀性好 ,当其它软组织完全腐败后 ,骨组织在鉴定中可发挥重要作用。但由于骨组织中细胞含量少[1] ,加上环境因素的影响 ,使陈旧骨骼的ＤＮＡ提取成为鉴定工作的难点[2 ] 。本文研究了骨组织ＤＮＡ的硅珠提取法 ,并将其运用于法医物证检验。1　材料与方法1 1　样本收集75例骨骼样本来自本实验室受理的刑事案件检材 (检材保存时间最久为 14年 )。1 2　试剂脱钙液 :0 2ｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ溶液 10 0ｍｌＥＤＴＡ Ｎａ2 10 ｇ ,ｐＨ 7 0 [3] 。裂解液 :12 ｇ ＧｕＳＣＮ + 10ｍｌ0 1ｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ ＨＣｌｐＨ 6 4 + 2 2…     

1例异基因造血干细胞移植术后的DNA检测

1　案情摘要2 0 0 0年 1月 ,贵阳医学院附属医院为治疗 1位急性淋巴细胞性白血病患者 ,进行贵州省首例同胞兄弟之间 (ＡＢＯ血型相同 ,经ＨＬＡ配型相符 )的外周血造血干细胞移植手术。为检测移植术后供体造血干细胞在受体内是否植活而进行鉴定。2　ＤＮＡ检验取受体父、母亲全血各 5ｍｌ,移植前供、受体全血各 5ｍｌ,移植术后 18天受体全血 4ｍｌ,所有全血均用ＥＤＴＡ抗凝。 5份样品均用蛋白酶Ｋ消化、酚 /氯仿法提取ＤＮＡ。采用ＳＴＲ ＰＣＲ法 ,对 5份ＤＮＡ样品分别扩增Ｄ12Ｓ375、Ｄ19Ｓ2 5 3、Ｄ19Ｓ4 0 0、Ｄ18Ｓ5 35、ＰＬＡ2Ａ、…     

福建汉族群体3个VNTR基因座的多态性及其在亲子鉴定中的应用

为了获得福建汉族群体Ｄ2Ｓ4 4、Ｄ10Ｓ2 8、Ｄ4Ｓ16 3三个ＶＮＴＲ基因座的遗传信息 ,提高亲子鉴定的准确性 ,本文作者应用ＲＦＬＰ技术 ,Ｌｉｆｅｃｏｄｅｓ公司提供的试剂 ,首次对福建省上述 3个基因座的多态性进行调查和用此基因座检测的亲子鉴定案进行分析 ,现报告如下。1　材料及方法1 1　样本来源10 3份样本来源于世代居住在福建省区域的汉族健康无关成年个体 ;15例亲子鉴定案例为本站近年检测。每份样本均采血 1ｍｌ,用ＥＤＴＡ抗凝 ,由本站保存于超低温冰箱 (- 80℃ )中。1 2　方法1 2 1　提取样本中ＤＮＡ　取ＥＤＴＡ抗凝血样 5…     

一种改良的骨组织DNA提取方法

骨组织耐腐败,当其他软组织已完全腐败后,只能用骨组织进行种属鉴定,性别鉴定和个人识别.骨组织DNA提取是骨组织DNA分析的关键.作者曾用多种方法提取过骨组织DNA,本文报道一种改良的骨组织DNA提取方法.     

硅珠法提取PCR模板DNA

本文介绍一种提取ＰＣＲ模板ＤＮＡ的方法 ,基本上可以克服以上缺点。1　材料与方法1 1　材料1 1 1　样品　所有样品均来自日常受理的案件。1 1 2　主要试剂　二氧化硅 (Ｓｉｌｉｃａ ,ＳＩＧＭＡ) ;硫氰酸胍 (ＧｕＳＣＮ ,ＰＲＯＭＥＧＡ) ;十二烷基肌氨酸钠 (ＳＩＧ ＭＡ)。1 1 3　主要仪器　高速台式离心机 (ＳＩＧＭＡ1 13) ;ＰＥ2 4 0 0扩增仪。1 2　方法1 2 1　试剂的配制　 (1)吸附液 :12 ｇＧｕＳＣＮ溶于10ｍｌ 0 1ｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ ＨＣｌ (ｐＨ6 4 ) ,加入 0 8ｍｌ0 5ｍｏｌ/ＬＥＤＴＡ和 0 5ｍｌＴｒｉｔｏｍＸ 10 0 ;(2…     

云南彝族、瑶族、壮族及回族群体3个STR基因座的遗传多态性

采用ＳＴＲ ＰＣＲ技术从血痕中提取ＤＮＡ ,复合扩增ＣＳＦ1ＰＯ、ＴＰＯＸ和ＴＨ0 13个基因座 ,对云南彝族、瑶族、壮族和回族群体的等位基因进行基因频率分布调查 ,现报道如下。1　材料与方法1 1　样本云南峨山县彝族 172人 ,云南勐腊县瑶族 10 0人 ,云南蒙自县壮族 137人 ,云南澄江县回族 112人。均为健康、三代无与其他民族通婚史 ,彼此间无血缘关系。1 2　ＤＮＡ提取取 5× 5ｍｍ血痕纱布 ,剪碎放入 1 5ｍｌＥｐｐｅｎｏｒｆ管 ,加入消化液 30 0 μｌ (ＡＧＴＣＩｎｃ) 2 0 μｌ蛋白酶Ｋ溶液 ,2 0 μｌ 1 0ｍｏｌ/ＬＤＴＴ ,37℃过夜 …     

运用PCR技术对人骨组织和牙齿进行性别鉴定的应用研究

为了解决刑事案件中利用人骨组织和牙齿进行性别鉴定的问题，我们通过骨骼和牙齿中ＤＮＡ的提取床用Ｙ染色体特异ＤＮＭ列引物扩增Ｙ染色体的ＤＹＺＩ和ＳＲＹ基因序列．结果：１．骨组织中ＤＮＡ的提取可在１小时内完成；牙齿中ＤＮＡ的提取可在４小时内完成；２．牙齿中的ＤＮＡ保存的完好性大于骨组织；４．煮沸过的骨组织中的ＤＮＡ降解严重，无法用于实验．     

人为挤压致肝破裂1例

李某 ,女 ,2 6岁 ,汝阳县陶营乡人 ,痴呆 ,不会说话 ,平时学穿衣服 ,不出家门。 2 0 0 1年 6月 11日早上 6时许被人发现死在距其家 10 0米的麦场中。尸表检验 :尸体发育中等 ,营养不良 ,两眼球结膜充血 ,胸腹部有 2 2ｃｍ× 40ｃｍ范围散在擦挫伤 ,触诊肋骨有骨擦音 ;左乳头内外侧分别有 0 .4ｃｍ× 0 .7ｃｍ、0 .5ｃｍ× 1ｃｍ排列整齐、呈对称分布的皮下淤血 ,右乳头内外侧分别有 0 .2ｃｍ× 0 .8ｃｍ、0 .3ｃｍ× 0 .8ｃｍ排列整齐呈对称分布的皮下淤血 ;右肩胛骨下侧皮肤有 5ｃｍ× 10ｃｍ范围擦挫伤 ;肛门3点、7点、12点处均有长约 0 .…     

原发性脑挫裂伤后无早期意识障碍1例

1　案例资料某男 ,2 6岁。身体健壮。 1998年 1月 2 4日 6时许 ,被人用不规则形木棒打伤头部 ,自行行走 2ｋｍ后倒地昏迷 ,送医院抢救无效 ,次日 2 1时死亡。尸检所见 :尸长 177ｃｍ。头额顶枕部有广泛皮下出血 (以右侧为甚 )伴表皮剥脱 ;头顶枕部 4条挫裂创 2 5ｃｍ× 0 2ｃｍ～ 3 5ｃｍ× 0 2ｃｍ)和右顶颞部挫裂创 ( 1ｃｍ×0 2ｃｍ)深达帽状腱膜 ,右顶枕部 1处 9ｃｍ× 0 7ｃｍ和后枕部 2处 ( 3ｃｍ× 0 5ｃｍ ,3ｃｍ× 0 3ｃｍ)的挫裂创深达骨质 ;双上肢有抵抗性损伤 ,头右顶部至后枕部颅骨有 18ｃｍ× 7ｃｍ的粉碎性骨折 ,右…     

中国新疆维吾尔族群体DYS389Ⅰ/Ⅱ、DYS390 基因座及单倍型遗传多态性分析

在法医检验实践中 ,Ｙ染色体一直被用作性别鉴定。ＤＹＳ390、ＤＹＳ389Ⅰ /Ⅱ基因座是Ｙ染色体上分别以ＣＴＧＴ/ＣＴＡＴ为核心序列重复单位的微卫星。本文作者对中国新疆维吾尔族男性 3个Ｙ ＳＴＲ (Ｙｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓｐｅｃｉｆｉｃｓｈｏｒｔｔａｎｄｅｍｒｅｐｅａｔ ,简称Ｙ ＳＴＲ)基因座基因型及单倍型构成进行了研究 ,并分析其遗传多态性。1　材料与方法1 1　样本ＤＮＡ56份静脉抗凝血随机采自中国新疆乌鲁木齐市无血缘关系健康维吾尔族男性个体。Ｃｈｅｌｅｘ法提取ＤＮＡ。1 2　引物序列[1] (Ｃｙｂｅｒｓｙｎ公司合成 )…