QIAamp方法在疑难生物检材STR分型中的应用

本文通过采用QIAcube自动纯化仪与QIAamp DNA Investigator试剂盒,对320份生物检材包括血迹、烟蒂、肋软骨、脱落细胞4类常见疑难生物检材进行DNA提取与纯化,采用Sinofiler试剂盒进行扩增检验。在320份生物检材中,成功获得300份检材STR分型,且获得的STR分型均在13个基因座位以上。表明QIAamp方法适合常见疑难生物检材的日常检验。     

GA118-16A型遗传分析仪在检案中的应用

随着DNA检验技术的不断发展,微量类检材已经成为DNA实验室的常见检材,在侦查破案中发挥着越来越重要的作用。而众所周知,微量生物检材的DNA检验成功率高低一定是取决于现场微量检材的采集质量。立足于实际检案工作,对检验和分析方法进行研究,用QIAGEN-M48微量磁珠法DNA提取试剂盒与GA118遗传分析仪获得较完整的STR数据,为案件破获发挥作用。     

SNPs复合扩增体系在疑难检材中的应用研究

目的应用SNPs的复合PCR扩增体系检验实际案件中遇到的含脱落细胞检材、腐败检材及骨组织等疑难检材,为疑难检材的检验提供一种新的检验方法。方法通过用IdentifilerTM试剂盒及已建立的47个SNPs(包括1个性别位点)位点复合扩增荧光检测体系,并行对照检验36起案件中的人体脱落细胞、陈旧血痕、高度腐败的肌肉、软骨以及牙齿、骨等各类疑难检材共109份,对于人体脱落细胞、陈旧血痕、牙齿、骨等检材,STR与SNPs的检验成功率均达到80%以上,SNPs略高于STR。对于高度腐败的肌肉及软骨检材,SNPs的检验成功率明显高于STR。结论所建立的SNPs复合PCR扩增体系在疑难检材检验中具有较高的实用价值。     

微湿布条DNA检验

本文根据对微湿检材的观察及分析,通过直接剪取法处理检材,再对比改良硅珠法和常规硅珠法纯化微量生物检材中的DNA。结果验证采用改良硅珠法提取微量生物检材中DNA,更易得到完整的STR基因分型图谱,而常规硅珠法提取微量生物检材中的DNA,会导致大片段位点丢失。     

GA318-32A核酸自动提取仪原理与应用

DNA自动提取工作站与磁珠提取法相结合设计而成的磁珠DNA自动提取系统正逐渐成为DNA提取步骤中被广泛普及和应用的主流方法之一。GA318-32A核酸自动提取仪即是基于磁珠提取法研制而成的一套高通量、高灵敏度的自动核酸纯化提取设备。它可在短时间内利用机器磁棒架上的磁棒,将吸附有核酸的磁珠移动至不同的试剂孔内,经过细胞裂解、核酸吸附、清洗与洗脱,最终得到高纯度核酸。从GA318-32A核酸自动提取仪的结构原理、主要特征、法医学应用等方面进行阐述,以期使该仪器在法医DNA检测中得到更广泛的应用。     

微量物证的STR分型及数据库在交通事故研判中的应用

本文主要以毛发为微量物证特例来探讨微量物证的STR分型检验方法及其数据库在交通事故研判中的应用,并对毛发STR分型的影响因素进行分析研究,运用了chelex-100法提取DNA,使用AmpFLSTR (r) Identifiler (r)试剂盒检测样品15个STR基因座和Amelogenin性别基因座的基因型。研究表明,清洗毛发可防止污染,孵育1小时可消化完全毛囊,不用DTT不影响STR分型效果,室温放置半年也不会影响分型效果,成人毛发一般取1根提取DNA后进行STR分型可检测成功,婴幼儿毛囊较小者取2根或3根毛发扩增,或取1根毛发增加DNA模板用量可获得完整分型结果。对于毛发检材稳定、DNA提取方法简单、检材用量易于把握、不必对人体造成再次破坏便能严格公正执法与准确研判事故等优点而言,这一分型检验方法为分析微量物证数据库在交通事故处置实践中的应用奠定了重要基础。     

爆炸现场中207份尸块DNA快速检验方法探索

爆炸现场中的尸源识别是法医学实践中的重要且紧急的工作任务。现场组织碎块多,受高温作用程度大,特别是大量、烈性炸药产生的重大爆炸现场的炸点附近人体组织大部分变成灰烬,被冲击波抛出的组织块由于不易被发现提取而腐败,这些因素都给DNA检验带来了困难,通过采用直扩法和磁珠法+直扩法对207份爆炸现场中尸块的DNA进行检验,统计检验的成功率,对检验失败的部分检材,用磁珠法+直扩法进行检验,并统计检验的成功率,总结直扩法和磁珠法+直扩法在这类案件检材DNA检验的经验,为爆炸等大批量经高温作用及不同程度腐败组织的DNA检验提供快速、高效的检验方案和参考方法。     

国产与进口遗传分析仪法医DNA检验的比较分析

基于chelex法提取检材DNA,利用Identifiler Plus试剂盒扩增,使用GA118-16A型遗传分析仪及3130xl型遗传分析仪对102份血迹检材、208份脱落细胞检材和119份唾液检材进行检测。结果表明,GA118-16A型遗传分析仪对实际案件中不同类型检材的检出率均略低于3130xl型遗传分析仪,但两者准确度一致。GA118-16A型遗传分析仪仪器运行平稳,操作简单,检测能力接近国外同类型产品,基本满足公安机关日常检案需要。     

十年前血痕DNA检验一例

血痕是DNA检验中最常见的检材,条件较好的血痕检材用常规的chelex-100法提取就能得到理想的检验结果。然而我们日常检案中所遇到的血痕检材往往有腐败、降解、污染等问题存在,这时我们就要优化我们的提取方法,以达到理想的检验结果。本文所报道的这例血痕检材来自于一起发生在十年前的杀人案的现场,作者成功地对这例血痕进行了DNA检验,得到了理想的检验结果,现报道如下:1案例资料取棉签沾纯水,擦去血痕上粘附的灰尘。用刀片刮取适量血痕检材2份,分别装入2个1·5m l的离心管中,编为1、2号。1号管采用5%Chelex-100法提取检材DNA;2号管用5%…     

国产法医DNA检验设备联合应用测试研究初探

利用国产DNA检测设备(包括核酸自动提取仪、基因扩增仪及遗传分析仪)对血样、口腔拭子及烟头样本进行DNA提取、PCR扩增及电泳检测,其中1000份血样DNA检测成功率达100%,32个口腔拭子和烟头样本成功率达96.9%,获得的STR分型准确、峰型尖锐、无等位基因丢失。结果表明国产DNA检测设备即核酸自动提取仪、基因扩增仪及遗传分析仪可配套使用在血样、口腔拭子及烟头等检材的DNA检测上。     

泥水中腐败软骨的二种DNA提取方法的比较

在法医物证检验工作中,一般的腐败尸体由于软骨腐败速度较慢[1],选择软骨检材进行检验,且采用Chelex-100法提取DNA就可得到理想的STR分型结果,但在本案中的腐败软骨,由于未被软组织包裹,长时间暴露于空气和泥水中,且在温度适宜的情况     

Chelex-100法在微量检材DNA检验中的应用2例

1案例资料案例12005年某月,在广东某市一住宅内发生一起凶杀案。现场勘查在垃圾桶内提取了吃过的花生糖及口香糖各一粒、在桌面提取柚子核一堆,作者提取了花生糖及口香糖上的脱落细胞的DNA,并对柚子核进行肉眼检查,挑选了其中一粒有明显咬痕的柚子核进行DNA检验,用Amp·FL·STR     

微量混合脱落细胞扩增和电泳时间的影响

当前犯罪现场约52%的法医学物证,为微量脱落细胞的生物检材。研究微量混合脱落细胞生物检材提取后扩增和电泳时间对检测结果的影响。初步表明微量生物检材随着时间的推移,存在降解。     

国产DNA测序仪及提取试剂在接触DNA检验中的应用

如何提高接触DNA检材的检验成功率是DNA实验室面临的难题之一,研究分析了影响接触DNA检验成功率的关键环节并采用国产DNA测序仪及提取试剂检验方案,通过实际案例进行验证,针对接触DNA检验中的关键环节提出了方法和建议。     

DNA检测平台数据预处理关键方法研究

系统研究了DNA检测平台数据预处理关键方法,根据自主研发的DNA检测平台和荧光染料试剂盒,设计实现了空间校正、光谱校正、STR数据预处理等一系列数据预处理关键方法。这些DNA数据预处理关键方法已成功进行TM TM了灌胶和非灌胶模式下的空间校正,建立了DNATyper 15、Identifiler等试剂盒的染料光谱分布矩阵和对应光谱校正文件,实现了DNA荧光光谱数据采集、实时基线和实时光谱校正处理。实际应用表明,本文设计的数据预处理方法适用于实际案件中唾液、血液、精液、骨骼、牙齿、脱落细胞等生物检材的法医DNA分型检测。     

硅珠法提取DNA的灵敏度及抗抑制能力探究

硅珠法提取DNA具有灵敏度高、提取产物纯净等优点,在法医领域有广泛应用。采用实验室模拟的方法,以007标准DNA以及抗凝冻存血液为样品,对硅珠法的提取灵敏度进行了系统测试,并选取7种常见抑制物,包括灰尘、铁锈、油脂等,对硅珠法的抗抑制能力进行了探究。结果显示,硅珠法与磁珠法相比,在提取灵敏度上并无明显差异,当DNA达到300pg时,出位点率皆为95%以上,当千倍稀释血量达到10ul时,出位点率皆为86%以上。在抗抑制能力测试中,硅珠提取法对所选取的7种抑制物都有良好的抗性,当抑制物的量加倍时,仍可获得足够的STR位点。结果表明,硅珠法具有良好的灵敏度及抗抑制能力,可广泛适用于各种法医检材。     

国产双线DNA实验室设计及应用

采用国产法医遗传分析仪建设双线DNA实验室的方案及应用,有效解决了盗窃案件现场脱落细胞检验的时效问题,国产仪器具有较高的灵敏度,适应各类生物检材,可满足区县级公安机关实际使用需求。     

Microcon过柱法对Chelex法提取的DNA样品的纯化效果

本文通过将稀释为10ng、100ng的标准品DNA,采用Microcon过柱法处理;将Chelex法提取的15例接触DNA溶液用Microcon过柱法进行纯化浓缩。将上述处理获得的DNA样品进行PCR定量和STR检测。得出Microcon过柱法对DNA的纯化有一定的损失,对Chelex法提取的接触DNA的回收效果不一的结果。100μl的起始体积,过柱浓缩后的体积在8~25μl之间,平均为15μl,且IPC CT值无显著降低。说明Microcon过柱法对Chelex法处理的接触DNA的纯化作用有限。     

一种基于全自动多重裂解滤膜法的研究应用

多重裂解滤膜法结合了差异裂解法及滤膜法的优点,经两次短时裂解后可快速去除女性成分细胞并将精子细胞截留在滤膜上,再经深度裂解即可将精子细胞DNA释放,裂解产物则使用磁珠法进行提取纯化.该方法在法医专用核酸提取工作站上实现了全自动化工艺,可在180min内完成24个混合斑样本的分离提纯.使用全自动多重裂解滤膜法对223例性...     

低温雾化显现手印方法及装置

“低温雾化显现手印方法及装置”可对哑光漆家具、枪支、金属、塑料等部分非渗透性客体上遗留的潜在手印进行显现。该方法属于无损检验,不但可以对同一枚手印进行反复显现和提取,对于已经成功提取或提取不成功、无检验价值的手印,只要留有足够皮肤脱落细胞,都可再进行DNA提取检验,达到对现场遗留手印进行手印痕迹、