小反刍兽疫病毒H基因胞外区的表达与分析

为了掌握小反刍兽疫病毒(PPRV)H蛋白胞外区的功能,根据GenBank中已发表的小反刍兽疫病毒Nigeria 75/1株的H基因序列设计相应引物,分别克隆tH基因后构建原核表达载体pET-30a(+)-tH和真核表达载体pPIC9K-tH。将测序正确的重组质粒分别转化至大肠杆菌BL21(DE3)和酵母菌GS115,而后进行诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示,tH蛋白均获得了高效表达,融合蛋白的分子质量约为60ku,原核表达产物以包涵体的形式存在,其表达产量为4.68g/L,而目的蛋白的真核表达产量为0.5~1g/L。Western-blot分析表明,所表达的重组蛋白能被抗PPRV Nigeria 75/1株的阳性家兔血清特异性识别。结果表明,成功表达了小反刍兽疫病毒H基因胞外区,重组表达蛋白具有良好的反应原性,这为PPRV H蛋白与其受体相互作用功能区的确定奠定了基础。     

今年总结职工写 明年打算职工说——探访基层工会组织岁末年初如何倾听职工建议

<正>与以往不同,如今,越来越多的工会组织不断改进工作方法,深入基层了解职工诉求,反映职工意愿,化解职工矛盾,密切与职工间的联系,让工会工作变得更贴心。正如一位工会主席所说:"怎样开展工会工作,咱们得听职工的。"岁末年初,各个单位都在进行年终总结和制订下一年度工作计划。工会总结怎样写?计划怎样制订?什么是工会取得的成绩?什么是工会工作的不足?工会人回答说:"听职工的,职工认可度高的就是我     

抢抓机遇高起步 打造实力新城镇

正津南区双港镇地处海河中下游南岸,连接着柳林城市副中心和海河教育园区,位于中心城区的辅城,区位优势明显。几年来,全镇广大干部群众奋力拼搏,全面完成了土地整合、房屋拆迁、还迁安置、城镇建设等一系列重点难点工作,城镇面貌焕然一新。2016年,是全面实施"十三五"规划的开局之年,双港镇坚持科学谋划,以"五大理念"为指引,深刻领会天津市建设"五都之城"的内涵要求,     

探索人才学教学发展之道——全国人才学教学研讨会综述

2008年5月19日至20日,由中国人才研究会人才学专业委员会和解放军西安政治学院联合主办的“全国人才学教学研讨会”在西安举行,来自全国各地和军队系统的60余名人才学研究者及人才学教学工作者参加了会议。解放军西安政治学院院长齐三平少将出席开幕式并致欢迎辞,中央组织部人才工作局阎树森主任在会上发表了讲话,中国人才研究会聂兴国副秘书长宣读了徐颂陶会长的贺信。     

还做搪瓷缸?out了

周边的力量 大年初五早7点,北京冬奥特许商品旗舰店门外,百余人的队伍已经拐了好几个弯.此时距离旗舰店所在的王府井商场开门还有两个半小时.众人排队竞买的,是2022年北京冬奥会吉祥物、熊猫冰墩墩系列的手办盲盒和毛绒玩具.盲盒118元一个,毛绒玩具则是192元.     

小反刍兽疫病毒H和F蛋白多抗原表位的表达及其反应原性

将通过计算机软件预测并通过间接ELISA检测确定的小反刍兽疫病毒(PPRV)H、F蛋白的10个B细胞抗原表位串联,再加上一个外源通用T细胞表位,表位之间用甘氨酸间隔,人工合成一条多抗原表位编码基因序列,将其插入原核表达载体pET30a(+),转化BL21(DE3)诱导表达。结果获得分子质量为19 ku的表达蛋白,该蛋白可与PPRV感染阳性血清发生特异性免疫反应。结果表明人工合成的PPRV多抗原表位编码基因可以在原核表达系统中表达,表达产物具有反应原性,这为研究PPRV抗原表位疫苗奠定了基础。     

鸡TLR2信号通路中相关分子mRNA实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

为建立鸡Toll样受体2(ChTLR2)信号通路中相关分子的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank中TLR2信号通路中的5种相关分子即ChTLR2-1,ChTLR2-2,ChTLR6,鸡骨髓分化蛋白88(ChMyD88)及鸡核因子κB(ChNF-κB)基因序列,以鸡3-磷酸甘油脱氢酶(ChGAPDH)基因为参考基因,设计特异引物扩增目的基因片段。将6种基因克隆至pMD8-T载体后得到各自的阳性克隆质粒,以6种阳性质粒为标准品建立了标准曲线并进行熔解曲线分析以及灵敏性、特异性和重复性试验分析。应用建立的方法对堆形艾美耳球虫核酸疫苗pcDNA/Ea3-1E免疫SPF雏鸡脾中ChMyD88和ChNF-κB mRNA的转录水平进行检测。结果显示,当标准品稀释度为1×102～1×1010copies/μL时,6种基因Ct值与浓度间具有良好的线性关系,相关系数均大于0.995。熔解曲线分析表明,产物为特异性单峰且重复性较好。免疫雏鸡脾中ChMyD88和ChNF-κB mRNA转录水平的检测结果表明,免疫组2种分子mRNA转录水平均极显著高于空白对照组(P<0.01)。本研究为ChTLR...     

DNA甲基化在法医DNA分析中的应用

表观遗传学在生命的发生、发展过程中起着十分重要的作用。DNA甲基化作为表观遗传的一个重要方面,不仅参与多种基因的表达调控,与机体的发育、肿瘤发生等密切相关,而且具有可遗传性、相对稳定性、亲缘特异性、基因组中含量丰富等特点,已证实适用于法医DNA分析。本文对近年来DNA甲基化在印迹基因、同卵双生子鉴定、年龄、性别推断方面的研究与应用进行回顾与综述,以期为在法医学及相关领域中应用提供参考。     

宁夏回族人群4个miniSTR基因座遗传多态性

在法医DNA检验中,miniSTR分型技术的使用有利于高度降解DNA样本或微量检材检测成功率的提高[1-2]。本文采用荧光标记复合扩增和毛细管电泳分析技术,对中国宁夏回族群体D6S474、D20S482、D4S2408和D6S1017基因座进行群体遗传学调查,以期为相关研究和实践提供基础数据。