复合扩增D16S539、D7S820、D13S317基因座的DNA分型及法医学应用

通过对3个位于不同染色体上的STR基因座（D165539,D7S820,D13S317）所组成的复合扩增体系的DNA分型研究,以期在实际法医物证检验中增加检验基因座,以提高总的个体识别率。笔者运用复合扩增技术,经4％变性聚丙烯酸胺凝胶电泳分离扩增产物和银染检测,首次对108个无关中国人个体的D16S539,D7S820,D13S317基因座进行研究,检测出中国人群中3个基因座的等位基因数均为7个;偶合率P（m）分别为0．0847、0．0740、0．0741;个体识别率DP值分别为0．9153、0．9260、0．9259;杂合度分别为77．7％、79.1％、79．3％;各基因座亲子关系指数PItypical分别为2．24、2．39、2．42。3个STR基因座总的个体识别率很高,达0．9995;总的亲子关系指数PItypical达12．96;所有基因座经卡方检验符合Hardy－Weinberg平衡。通过以上数据可以看出,D165539,D7S820,D13S317基因座所组成的复合扩增体系在中国人群中等位基因分布较好,个体识别率很高,适合用于法医个体识别及亲子鉴定。     

我国法医DNA检验存在的问题及质量保证体系初探

法医DNA技术在我国已经走过10年的历程。用它检验的数千起案件中,不乏以DNA检验报告作为唯一判定依据的案例ODNA技术应用于我国的公安司法事业,其功效卓著。在法医DNA检验新技术不断涌现的同时,国内外法医界同行也在讨论如何对这类具有巨大潜能的技术进行质量控制的问题。据国外一些统计结果表明,未进行质量控制的实验室其DNA检验结果出现的误差率不能令人忽视,以致出现法庭不承认未进行质量控制的DNA实验室出具证据的例子。在国内,也有可能因管理问题、技术问题或人员问题而导致DNA检验的错误判型,其后果难以估量。目前,…     

Qubit?快速荧光定量系统在法医学中的应用

目的 研究Qubit 定量系统在法医学中的应用.方法 使用Quant-iTTM试剂盒检测法医DNA样本并得出样本浓度.结果 Quant-iTTM试剂盒能检测并定量各种生物学检材DNA样本.结论 Quant-iTTM试剂盒能够应用在法医学检验中.     

国产去离子甲酰胺在法医DNA检测中的探讨

目前法医DNA检测中使用的变性辅助溶剂主要是美国AB公司生产的去离子甲酰胺。经调研，本实验选择了目前国内市场上纯度级别最高的实验室用甲酰胺，为AR级。将DNATyper15TM试剂盒分子量内标Typer500分别加入到购买的甲酰胺中，用3130xi遗传分析仪检测，以比较6个厂家生产的甲酰胺对DNA的变性效果，探讨了3家国产去离子甲酰胺用于法医DNA检测上样的可能性。     

FXⅢA凝血因子蛋白与核酸水平遗传多态性研究

FXⅢA可在蛋白水平上应用于法医物证检验[1,2],它的A亚基基因座作为一个STR位点相当普遍地应用于DNA水平的法医物证检验中,是法医学中的一个特例。为此,我们首次对北京汉族人群的FXⅢA,从蛋白水平和DNA水平分别研究其遗传多态性,并获得了群体遗传学数据。1材料与方法1.1实验材料1.1.1样本无关个体血样采自北京地区无血缘关系的献血员。1.1.2主要仪器与试剂1.1.2.1蛋白水平MultiphorⅡ型多功能电泳系统(LKB);Pharma-lyte pH3.5～10,pH5～7(Pharmacia);一抗为兔抗人FXⅢA血清(DAKO),二抗为辣根过氧化酶标记的羊抗兔IgG(华美生物…     

荧光标记短片段STR复合扩增系统的法医学应用研究

目的解决严重降解(低于300bp)DNA检验问题,提高降解DNA的检出率。方法重新设计引物,减小扩增产物片段长度,用荧光标记短片段STR复合扩增体系进行DNA检验,扩增结果与用Identifiler试剂盒扩增出的结果进行比较。结果用荧光标记短片段STR复合扩增系统对实际案件中的高度降解DNA检材进行检验,可以获得满意分型。结论该系统可用于严重降解DNA检材的检验工作。     

联合运用CTAB与磁珠提取陈旧骨骼DNA

<正> 用Chelex-100法或酚-氯仿法提取骨骼DNA,一般采用PK消化。该法虽对比较新鲜且有软骨组织存在的骨骼DNA提取效果较好,但对陈旧性骨骼DNA提取,难以达到理想效果。有人将CTAB(cetytrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化胺)用于陈旧性骨骼DNA提取,并采用纯化柱对DNA提取液进行浓缩纯化。由于其检验步骤相对烦琐,产物回收率受到限制。本文作者用CTAB裂解     

9个犬STR基因座在犬类鉴定中的应用

目的建立犬的复合扩增体系对犬进行个体识别和亲权鉴定。方法用建立的犬复合扩增体系进行PCR反应,用ABI310型遗传分析仪对扩增产物进行检测。结果鉴定结果表明,9个犬STR基因座复合扩增体系,各个基因座扩增平衡,结果稳定。结论9个犬STR基因座复合扩增体系可以进行犬的个体识别和亲权鉴定。     

北京地区汉族群体凝血因子XⅢA亚单位的遗传多态性

凝血因子XⅢ(coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ)存在于血浆、血小板、胎盘、前列腺、子宫和肝脏中,具有转谷氨酰酶作用.在血液中,FⅩⅢ以四级结构存在,即二聚体A2与B2结合而成,B2亚单位起载体作用,A2具酶活性.人类FⅩⅢA亚单位的遗传多态性最早由Board(1979)[1]报道,国内有张林等[2](1994)亦有报道.本文作者对北京地区汉族群体凝血F因子ⅩⅢA亚单位的遗传多态性进行调查,报告如下.     

快速PCR扩增体系的建立及法医学应用

目的建立快速PCR扩增体系,探讨其在法医实践中的应用价值。方法设置不同的缓冲液、酶浓度与Mg SO4浓度、热循环参数等,观察不同参数对扩增结果的影响,建立快速PCR扩增体系。使用该体系对常见检材进行STR分型,与常规方法扩增的结果比较,考察其分型准确性与扩增用时。结果本文建立的快速PCR扩增体系含DNA TyperTM19试剂盒的Primer Mix(5×)2μL;Ta KaRa试剂的Fast BufferⅡ(10×)1μL,Speed STARTMHS DNA Polymerase(5U/μL)0.3μL,Mg SO4(50mmol/L)为0.1μL。扩增程序为95℃120s;95℃2s、61℃15s,27个循环;72℃60s。结论快速PCR扩增体系分型结果准确,用时仅19min,缩短了常规扩增用时,有较大的法医学应用价值。