线粒体DNA的研究进展及其法医学应用

线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)是存在于细胞质内的环状DNA。它的存在早在三十多年前就有人提出。如今,关于线粒体的研究领域是生物医学中发展最快的学科之一。它的发展基于一些很基本且有趣的问题的提出,这些问题主要是关于线粒体是如何进化,如何产生能量。另外,在疾病中线粒体基因如何发生突变、细胞凋亡如何受到它的调节、以及衰老如何对线粒体DNA发生影响等问题都有待解答,而且对这些问题的探讨将会对诸如人类学、法医学以及疾病的治疗有很大的用途。     

高锌对雏鸡红细胞免疫功能的影响

将 1日龄艾维茵肉鸡雏 2 0 0只随机分为 4组 ,Ⅰ组为对照组 ,Ⅱ～Ⅳ组为试验组 ,分别饲喂不同日粮 ,Ⅰ组 :基础日粮 (含Zn 10 0mg/kg) ,Ⅱ组 :基础日粮 Zn 1 4 0 0mg/kg ,Ⅲ组 :基础日粮 Zn 1 90 0mg/kg ,Ⅳ组 :基础日粮 Zn 2 4 0 0mg/kg ,试验期为 7周。结果发现 ,日粮高锌可导致雏鸡红细胞C3bRR花环率降低 ,ICR花环率升高。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组C3bRR花环率 2周龄时显著下降 (P <0 .0 1) ,Ⅲ、Ⅳ组第 5和 7周龄时也极显著低于Ⅰ组。Ⅳ组ICR花环率 2周龄时显著高于Ⅰ组 (P <0 .0 5 ) ,Ⅱ、Ⅲ组ICR花环率也有所升高 ,但与对照组比较 ,仅Ⅱ组于 5周龄时差异显著 (P <0 .0 5 )。     

补肝益肾活血法治疗中重度斑秃临床观察

目的 评价补肝益肾活血法治疗中重度斑秃的临床疗效并探究其对患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞亚群的影响。方法 选择中重度斑秃患者50例,根据就诊先后顺序将其随机分为治疗组和对照组各25例,对照组服用复方甘草酸苷片,治疗组给予补肝益肾活血之剂治疗,观察两组治疗前后斑秃严重程度评分（severity of alopecia tool,SALT）的变化,评价临床疗效,并利用流式细胞仪分析两组患者治疗前后外周血清CD4+CD25+调节性T细胞亚群的变化情况。结果 两组患者治疗12周后,SALT评分均显著低于治疗前（P<0.05）;两组患者治疗前后SALT评分差值比较,差异有统计学意义（P<0.05）。两组临床疗效的分布比较,差异有统计学意义（P<0.05）。两组患者血清CD4+CD25+调节性T细胞表达水平均较治疗前升高（P<0.05）,但均未达到正常组水平。结论 补肝益肾活血法能够有效治疗中重度斑秃,并可以提高患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平,效果优于复方甘草酸苷。     

芪黄煎剂对胃切除大鼠肠淋巴细胞MAdCAM-1、ICAM-1及其mRNA表达的影响

目的 观察大鼠胃切除术后小肠内滴注芪黄煎剂对黏膜地址素细胞黏附分子-1（mucosal addressin cell adhension molecule-1,MAdCAM-1）与细胞间黏附分子-1（intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1）及其mRNA表达的影响。方法 将60只SD大鼠分为3组,每组20只。假手术组大鼠仅行腹部皮肤切开后缝合手术,模型组大鼠胃切除后给予肠内营养液能全素,芪黄煎剂组大鼠胃切除后先给予芪黄煎剂再滴注营养液能全素。连续给药7 d后,采用免疫组织化学法检测MAdCAM-1、ICAM-1蛋白表达水平,采用RT-PCR荧光定量法检测MAdCAM-1、ICAM-1mRNA相对表达水平。结果 与假手术组比较,模型组大鼠PP结中MAdCAM-1、ICAM-1及其mRNA表达水平均明显下降（P<0.05）;与假手术组比较,芪黄煎剂组大鼠PP结中MAdCAM-1、ICAM-1及其mRNA表达水平明显升高（P<0.05）。结论 芪黄煎剂能增加肠黏膜效应部位MAdCAM-1、ICAM-1及其mRNA表达水平,改善胃切除术后肠黏膜免疫屏障功能。     

痰热清注射液佐治肿块期浆细胞性乳腺炎42例

目的 观察痰热清注射液佐治肿块期肝经蕴热型浆细胞性乳腺炎（plasma cell mastitis,PCM）的临床疗效。方法 将83例肿块期肝经蕴热型PCM患者随机分为观察组42例,对照组41例,对照组采用外敷如意金黄膏,口服泼尼松片,观察组在此基础上加用静脉滴注痰热清注射液,比较两组患者治疗前后乳腺肿块大小、临床疗效及不良反应。结果 两组治疗后肿块均较治疗前明显缩小（P＜0.05）,观察组肿块缩小程度大于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;两组临床疗效的分布比较,差异具有统计学意义（P<0.05）;治疗过程中两组均未见明显不良反应,两组复发率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 痰热清注射液对肿块期肝经蕴热型PCM具有较好的辅助治疗作用。     

甲基苯丙胺对血脑屏障毒性作用研究进展

甲基苯丙胺是一种苯丙胺类中枢神经系统兴奋剂,目前常出现此类药物滥用。血脑屏障是维持脑部微环境稳态,防止大脑受到致病性微生物侵袭及毒性分子作用的生理性动态屏障,其在维持大脑功能中作用非常重要。研究表明甲基苯丙胺能够通过血脑屏障对脑造成损害,但此过程中甲基苯丙胺是否损害血脑屏障及其机制尚不明确。本文对此进行综述,以期为相关研究提供依据参考。     

Chimerism analysis using next generation sequencing

Hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) is the predominant curative treatment for many malignant and non-malignant haematological diseases. Early detection of graft rejection and disease relapse following HSCT improves patient outcomes by allowing treatment to be initiated as quickly as possible. In order to evaluate the level of donor engraftment, mixed chimerism levels must be carefully monitored after transplantation. Short-tandem repeat (STR) genotyping is widely used to determine the proportions of donor and recipient cells after HSCT.In this study, Devyser Chimerism NGS kit in combination with a MiSeq System was introduced in our laboratory for monitoring HSCT. This system is a complete workflow solution for labs, combining a reliable testing process with a designed for-purpose analytical software. Up to 24 informative markers in a recipient/donor pair distributed through the human genome have strong discriminative power with low bias from ethnic parameters. These IND/DEL genetic markers with population independent discriminative power are distributed across 17 chromosomes and were further selected to allow sensitive detection combined with accurate and precise quantification of mixed chimerism.Streamlined, simple and robust NGS workflow uses just one multiplex PCR reaction per patient sample. Minimal hands-on time reduces assay complexity and risk of sample contamination and mix-up. User-friendly, designed-for-purpose software perfectly complements testing kit with an automatic detection of informative markers.Insertion/deletion (indel) polymorphisms have been used in the fields of forensic investigations owing to the advantages of their low mutation rates, widespread distributions in the human genome and small amplicon sizes. Thus, forensic efficiency evaluation of this system for forensic individual identification will be also tested.     

黄芪甲苷通过调控Keap1-Nrf2-ARE信号通路减轻PM2.5诱导的肾小管上皮细胞氧化损伤

目的 探讨黄芪甲苷减轻细颗粒物2.5(particulate matter 2.5，PM2.5)所致肾小管上皮细胞氧化损伤的作用及分子机制。方法 将HK-2细胞分为5组：对照组（仅磷酸盐缓冲液处理）、模型组（200 μg/mL PM2.5处理24 h）、黄芪甲苷低剂量组（200 μg/mL PM2.5及10 nmol/L黄芪甲苷共同处理24 h）、黄芪甲苷中剂量组（200 μg/mL PM2.5及100 nmol/L黄芪甲苷共同处理24 h）、黄芪甲苷高剂量组（200 μg/mL PM2.5及200 nmol/L黄芪甲苷共同处理24 h）。采用流式细胞术和TUNEL检测不同方法处理的HK-2细胞凋亡情况，采用EdU实验和CCK8实验检测细胞增殖情况，采用Western blot检测不同方法处理的HK-2细胞中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Kelch-like ECH-associated protein 1，Keap1）-核因子红细胞相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)-抗氧化反应元件（antioxident response element, ARE）信号通路相关蛋白的表达水平。结果 流式细胞术和TUNEL染色结果显示，黄芪甲苷显著抑制PM2.5导致的肾小管上皮细胞凋亡，其抑制效果随黄芪甲苷浓度的增加而增加。CCK8检测结果和EdU细胞增殖检测结果显示，黄芪甲苷显著促进肾小管上皮细胞增殖，细胞活力随黄芪甲苷浓度的增加而增加。进一步检测显示，黄芪甲苷显著抑制PM2.5导致的肾小管上皮细胞活性氧和丙二醛水平升高，并显著促进超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平的升高。Western blot结果显示，与模型组比较，黄芪甲苷处理显著提高总Nrf2、核Nrf2、血红素氧化酶-1以及NAD（P）H醌脱氢酶1（NQO1）水平（P＜0.05）。结论 黄芪甲苷通过调控Keap1-Nrf2-ARE信号通路减轻PM2.5导致的肾小管上皮细胞氧化损伤。     

细胞凋亡参与脑心综合征心肌损伤及针刺干预作用

目的 观察心肌细胞凋亡在脑心综合征(cerebral-cardiac syndrome，CCS)发病中的作用机制及针刺的干预作用。方法 从60只健康SD大鼠中随机选择10只作为伪手术组，其余50只用于CCS模型复制，从模型复制成功的大鼠中随机选取30只，分成模型组、针刺组和非经非穴组，每组10只。采用胶原酶加肝素联合注射大鼠尾状核方法复制CCS模型，伪手术组向大鼠尾状核注入等量生理盐水。模型复制后72 h处死动物，分别采用苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling，TUNEL)和免疫组织化学法检测心肌组织病理变化、细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3)的表达。结果 HE染色示伪手术组心肌结构正常，模型组心肌细胞变性、坏死，大量平滑肌断裂；TUNEL及免疫组织化学染色提示模型组出现较多凋亡细胞，Caspase 3大量表达，针刺组TUNEL染色阳性细胞和Caspase 3阳性细胞均较模型组和非经非穴组显著减少(P<0.01)。结论 心肌细胞凋亡参与了CCS大鼠心肌损伤，其机制可能与上调凋亡蛋白酶Caspase 3表达有关，而针刺可拮抗CCS大鼠心肌组织细胞凋亡。     

生脉注射液联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床研究

目的:观察生脉注射液联合泰素加卡铂方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床效果及其减毒作用。方法:将38例晚期非小细胞肺癌患者随机分为治疗组和对照组各19例。对照组第1天予泰素135 mg/m2,3 h静滴,卡铂AUC 5静滴,21 d为1个周期;治疗组予同一化疗方案并于化疗结束后第2天用生脉注射液60 m l加入50 g/L葡萄糖注射液500 m l静滴,每天1次,连用15 d。两个周期后按照WHO实体瘤近期客观疗效评定标准进行评价。结果:治疗组和对照组近期有效率分别为52.6%和47.4%;治疗组Karnorfsky评分增加6例,对照组增加3例;治疗组体质量明显增加,骨髓抑制发生率明显较对照组低。结论:生脉注射液能提高泰素加卡铂方案化疗患者的生存质量,减轻化疗后骨髓抑制。