猪水泡病病毒非结构蛋白编码区的克隆与序列分析

以猪水泡病病毒 (Swinevesiculardiseasevirus ,SVDV)HK’70为材料 ,用特异性引物扩增出非结构蛋白编码区的 4个重叠目的片段 ,连接于pMD 18 T载体 ,转化JM 10 9感受态细胞。经对重组质粒双酶切、PCR鉴定、序列分析表明 ,HK’70非结构蛋白编码区核苷酸长 4 0 0 2nt ,氨基酸长 1334aa ;与J1’73、H/ 3’76、SVDV(Seechrn等测株 )、NET/ 1/ 92的核苷酸同源性分别为 98.6 %、98.3%、98.3%、91.2 % ,推导氨基酸序列的同源性分别为 98.9%、99.1%、99.2 %和 97.2 %。     

猪瘟病毒E2重组蛋白纯化和复性条件的研究

对猪瘟病毒(CSFV) C株、LT株E2基因主要抗原区在pGEX系列表达载体中原核表达的融合蛋白进行了变性、复性和纯化回收试验。用建立的变性、复性和纯化方法,获得了可溶性的纯化蛋白E2,其纯度达70%,回收率为10%。对复性纯化的E2蛋白进行了免疫活性检测,结果表明,其比未纯化蛋白的免疫活性高20倍左右。     

山羊干酪性淋巴结炎病原的分离鉴定

伪结核棒状杆菌 (Corynebacteriumpseudotu bercu losis)多侵害羊局部淋巴结 ,在体表和内脏形成脓肿 ,因脓汁呈干酪样 ,故将其引起的疾病称为干酪性淋巴结炎。陕西杨凌A公司和B公司羊场的部分山羊患有一种在颈部形成较大的脓疱、触摸有坚硬感的疾病。为了探明病因 ,对其进行了病原分离鉴定及致病性试验。1　材料和方法1 .1　材料　病料 :采自陕西杨凌A公司和B公司羊场患病羊脓疱的脓汁 ;ATCC1 94 1 0标准菌株 :山东农业大学赵宏坤教授馈赠 ;小白鼠 :购自中国人民解放军第四军医大学 ;健康山羊 :购自杨凌农贸市场 ;试验所用各种培养基按…     

水泡性口炎病毒N基因的克隆及其PCR检测方法的建立

根据国外发表的水泡性口炎病毒 (VSV)基因组核苷酸序列 ,设计了 2对特异性引物 ,通过RT PCR方法得到N基因。将此基因与 pGEM TEasyVector相连 ,通过蓝白斑筛选出阳性克隆 ,碱裂解法小剂量提取质粒。经测定 ,N基因与参考序列同源性高达 99%。同时根据克隆产物进行亚克隆 ,建立了VSV的PCR检测方法。     

增益素对免疫鸡体液免疫功能的影响

以雏鸡为试验动物模型 ,研究增益素对免疫鸡体液免疫功能的影响。试验鸡分为饲喂增益素和不饲喂增益素 2组。分别于接种前 (0d)、接种后 3、10、15、2 1和 2 7d测定鸡新城疫HI抗体效价 ;接种后 2 8d进行攻毒保护试验 ,统计各组鸡的发病率和死亡率。结果表明 ,增益素对疫苗免疫鸡体液免疫功能有明显的增强作用。     

马立克病肿瘤相关抗原间接ELISA检测方法的建立

用自制并纯化的马立克病肿瘤相关表面抗原(MATSA)免疫SPF级BALB／c小鼠制备阳性对照抗体,以SPF级BALB／c小鼠血清为阴性对照抗体,筛选间接ELISA检测MATSA抗体的最佳反应条件。结果,包被液为0．1 mol／L pH 9．6的碳酸盐缓冲液,抗原包被浓度为4μg／mL,封闭液为含10 g／L BSA的PBST,抗血清稀释比例为1:800,酶标抗体稀释比例为1:1200,酶标抗体作用时间为37℃温育45 min,底物作用时间为37℃温育15 min,终止液为2 mol／L H2SO4,洗涤4次,每次1min为最佳反应条件。将建立的方法应用于MATSA单克隆抗体研制过程中阳性克隆的筛选,成功获得了MATSA的单克隆抗体,表明该优化条件为间接ELISA检测MATSA抗体的最佳反应条件。     

甘肃棘豆抗肿瘤活性成分的筛选

用甘肃棘豆提取物中乙酸乙酯极性部位、水相部位以及生物碱和非生物碱部位,对荷S180和H22肿瘤小鼠进行了体内抗肿瘤试验。结果,试验4个样品中,非生物碱部位没有抗肿瘤活性,乙酸乙酯部位和水相部位对S180和H22均具有一定的抑制作用,但作用都不及生物碱部位强;各试验组小鼠胸腺、脾和体重变化都不明显。结果表明,各样品试验用剂量对小鼠均无毒性反应。     

宫炎清对奶牛子宫内膜炎的疗效观察

本试验旨在观察国产宫炎清对奶牛子宫内膜炎的疗效,为正确评价该药提供依据。(一)材料和方法1.病例选择及其诊断要点: 在西安市第一奶牛场和第三奶牛场选各种类型的子宫内膜炎病牛共70例,其中急性(包括部分亚急性)病例33头,慢性病例37头,其诊断要点为:(1)急性卡他性脓性子宫内膜炎:选用分娩或流产后10天以内由卡他性发展成为卡他性脓性子宫内膜炎的病例。病牛拱背努责,从阴门流出粘脓性     

对大尾根牛繁殖力下降因素的调查

通过对西安市第三奶牛场505头荷兰黑白花奶牛的调查,以及应用放射免疫分析法(RIA)对29头产后期牛血浆孕酮(P_4)含量的测定,首次明确了“大尾根牛”的不孕率、不孕天数及产犊间隔均显著或极显著高于非大尾根牛(P<0.05或P<0.01)。大尾根牛尾根部增大隆起,是因其皮下沉积有大量脂肪所致。因此,应将俗称的大尾根牛科学地命名为奶牛尾根脂肪沉积症(简称奶牛尾根脂积症,adipopexis of tail head in dairy cow,简称ATHDC)。能量消耗少或摄食过多是奶牛肥胖的直接原团。不孕、遗传、怀孕后期及年龄较大是能量过剩的促成因素。遗传可能使某些牛尾根部有大量的脂肪细胞,当全身营养状况达中等以上时,尾根部沉积大量的脂肪而表现为尾根脂积症(ATH)。大尾根牛的抗病力降低,多种产科和母畜产科疾病的发病率升高,子宫复旧延迟,这些无疑是大尾根牛不孕的重要原因。遗传因素与大尾根牛繁殖力降低有关。     

应用PCR检测羊接触传染性脓疱性皮炎病毒

设计合成了 1对引物 ,建立用于检测羊接触传染性脓疱性皮炎病毒的PCR方法。结果表明 ,PCR对羊接触传染性脓疱性皮炎病毒细胞培养毒的检测与细胞培养CPE、电镜检测的结果相一致。经对扩增产物进行序列分析 ,与已报道NZ 2株的核苷酸序列同源性高达 97%。用此PCR方法扩增羊痘病毒、口蹄疫病毒、蓝舌病病毒 ,结果均为阴性。此方法用于检测羊接触传染性脓疱性皮炎病毒是可行的、特异的