用dHPLC技术检测线粒体DNA编码区单核苷酸多态性

目的研究线粒体DNA(m tDNA)编码区单核苷酸多态性,建立检测m tDNA编码区单核苷酸多态性(SNP)的变性高效液相色谱(dHPLC)方法。方法设计针对线粒体DNA编码区nt10287-10679及nt8507-8805引物,应用dHPLC技术检测其序列多态性。结果100例中国汉族无关个体中,m tDNA nt10287-10679检出13个SNP位点,13种单倍型,基因多样性(H)为70.79%,偶合概率(P)为29.92%;m tDNA nt8507-8805检出10个SNP位点,12种单倍型,H为70.42%,P为30.28%;两段序列联合起来共检出23个SNP位点,23种单倍型,H为84.14%,P为16.70%。结论所建立的dHPLC方法可用于快速、准确地检测m tDNA编码区序列多态性;m tDNA编码区多态性位点作为m tDNA控制区多态性位点的补充,联合应用可以提高m tDNA的个体识别能力。     

MicroRNAs法医学应用的可能性和局限性

MicroRNAs是一类长度约18~24nt在转录后水平调控基因表达的内源性小分子非编码RNA。microRNA的高度保守性、时序性和组织特异性,使其在法医体液鉴别、个体年龄推断、死亡时间推断、毒物分析、伤因死因分析等中的应用成为可能。但法医学中microRNA鉴定数量的有限性,以及研究方法的不确定性也限制了其从理论研究到实践应用的发展。     

体液法医学鉴定miRNA检测方法的建立与应用

目的建立针对体液特异性miRNA的SYBR Green检测方法,用于体液鉴定,探究法医实践中体液鉴定新方法。方法根据文献选出6条miRNAs为靶点,以合成的标准miRNA作为模板进行体系构建,再对实际样本进行验证,检测6条miRNAs在外周血、月经血、唾液、精液中的相对表达量。结果 miRNAs205在不同体液间表达差异不明显;miRNAs451、miRNAs144可明显的区分血与非血;miRNAs214可鉴定月经血;miRNAs888、miRNAs891在精液中高表达。结论建立的针对miRNAs的SYBR Green检测方法合理有效,可用于法医实践中体液鉴定。     

烟蒂DNA分型的研究

目的 研究烟蒂中DNA提取及其检验。方法 用Chelex-100法提取170枚烟蒂样本的DNA,进行PCR扩增及STR检验。结果 除1名志愿者提供的21枚烟蒂外层纸未能检出STR基因分型外,其余烟蒂外层纸均得到分型结果。加入少许烟丝的样本未能检出STR分型,与口唇接触的海绵有时可检出基因型,6个月内的烟蒂可检出小片段基因座。结论 烟蒂能进行DNA分型,在法医检案中具有应用价值。     

北京汉族群体9个STR位点的频率分布及法医学应用

提供北京汉族群体9个STR基因座的频率分布资料，了解其在法医学中的应用价值。应用PCR技术对9个STR基因座分3组进行复合扩增，经PAG电泳分离、银染，扫描仪扫描，计算机判读并保存结果，对北京地区汉族无关个体9个基因座的基因频率分布进行调查。结果显示，上述9个基因座的杂合度为0．6419～0．8092，多态性信息总量为0．9999，鉴别机率为0．9999，匹配机率为2．0×10-9和非父排除率为0．9985。STR3组9个基因座的综合检验可应用于法医学个体识别和亲子鉴定，并达到同一认定的标准。     

国产试剂盒Goldeneye~(TM)20A在亲权鉴定中的应用评估

目的评估GoldeneyeTM20A试剂盒在亲权鉴定中的应用价值。方法应用GoldeneyeTM20A试剂盒对289宗亲权鉴定案例中的FTA卡血样本基因组DNA进行PCR扩增,扩增产物用ABI 3130xl遗传分析仪进行毛细管电泳,GeneMapper v3.2和GeneMarker HID软件进行基因分型及统计学分析,并与IdentifilerTM、SinofilerTM、PowerPlex16 3种试剂盒进行比较。结果采用GoldeneyeTM20A试剂盒,累积非父排除概率(CPE)为0.999 999 996,累积个人识别能力(CPD)达0.999 999 999 999 999 999 999 932 44,与目前常用的3种试剂盒相比较,GoldeneyeTM20A试剂盒在不排除的案例中具有更高的CPI值;在排除的案例中具有更多的排除指标。结论国产GoldeneyeTM20A试剂盒在亲权鉴定中有较高的应用价值。     

指甲DNA的STR分型研究

目的 研究尸体所处环境、指甲DNA提取部位及提取方法对STR分型的影响。方法 对案件中不同条件腐败尸体指甲,使用不同部位、不同体系和时间消化,酚-氯仿法提取指甲核DNA,进行PCR扩增及STR分型。结果 提取指甲甲体、甲根部位均可获得STR分型。结论 指甲是法医检案中一类具有实用价值的检材。     

2718例亲子鉴定结果的分析

<正> 1 资料收集及分析 收集2718例亲子鉴定案件中血样。Chelex方法提取DNA,复合扩增多个STR基因座。GeneScan3.1和Genotyper2.0软件自动分析结果,数据输入亲子鉴定软件,计算相对父权机率(RCP)值。计算不同复合STR系统二联体和三联体的累计非父排除率。     

中国新疆喀什维吾尔族群体mtDNA D环区多态性

<正> 为更好地应用mtDNA序列多态性进行个体识别和亲缘关系鉴定,本文应用PCR产物直接测序法研究99名新疆喀什维族无关个体mtDNA D环区全序列特征,并对其进行统计分析,意在建立mtDNA多态性应用的理论根据。