等位基因分型标准物的法医应用及制备研究

短串联重复序列（short tandem repeats，简称STR）由于其本身的优点和检测技术的不断完善，在今后相当长的时间内仍将是法医应用的重要遗传标记。等位基因分型标准物是STR检测试剂盒的组成部分，能够保证各等位基因分型的准确性。本文对等位基因分型标准物的出现、在法庭科学上的应用以及目前制备方法进行了综述，并对各种制备方法进行比较，以期对各实验室按照实际需要自行制备相关STR的等位基因分型标准物在方法选择上有所帮助，从而更好地进行法医物证鉴定。     

DNA Typer~(TM)15 plus直扩试剂盒在DNA数据库建设中的应用

目的测试DNA TyperTM15 plus直扩试剂盒的技术性能指标,评价其在DNA数据库建设中的应用价值。方法采用DNA TyperTM15 plus试剂盒,并使用IdentifilerTM和DNA TyperTM15试剂盒进行比较,设定不同体系和引物量、不同退火温度和循环次数以进行方法验证;设定不同模板量标准品、不同比例混合样本,取猪、狗、兔等动物的血液样品,血痕、骨骼、唾液斑等常见检材样本以及不同建库样本,以验证试剂盒灵敏度、特异性、稳定性以及混合样本、常见检材及建库样本的检测能力。结果直扩试剂盒分型结果准确,重复性好,灵敏度可达0.125ng,不同批次间试剂检测结果稳定,对不同检材有很好的适应性。10μL扩增体系时FTA卡和加强型血液采集卡取样直径应为0.5mm,而血滤纸、血液采集卡样本和经典型血液采集卡取样直径应为1.0mm。结论 DNA TyperTM15 plus直扩试剂盒的性能可以满足DNA数据库建设及检案的需要,可在相关实验中选择使用。     

DNATyper 15检验试剂的比较与应用

DNA多态性分析技术是当前法医生物物证鉴定中最主要的技术手段,其承载的物质基础是法医DNA检验试剂。对自主研发的DNAType 15试剂盒在案件检验中的应用,以及与国外同类法医DNA检验试剂的比较情况进行了综述。     

温度对Chelex 100法提取血斑DNA的影响

目的:探讨用Chelex 100法提取血斑DNA时,56℃消化时间、100℃煮沸时间长短对STR扩增的影响。方法:分别改变提取过程中56℃和100℃时间,观察其扩增结果。结果:56℃这一步骤的消化时间分别设为10min、30min和2h,100℃煮沸时间设为4min、8min、15min和30min,以上步骤所提取的DNA其扩增结果有明显的差异。结论:在一定的时间范围内,每个STR基因座的峰值随着这两步骤保温时间的增加而增加。     

陈旧性骨骼DNA提取技术的研究

对陈旧性骨骼建立一个高回收率并能除去 PCR 反应抑制物的提取 DNA 的方法。采用 CTAB 法提取 DNA。结果显示,该方法不但能有效去除 PCR 抑制物,而且对水泡、火烧、土埋以及10年左右的骨骼所提取的 DNA 均能成功地进行荧光标记 STR 多基因座扩增检验。实验表明,该方法稳定,重复性好,适合陈旧骨骼标本的 DNA 提取。     

人类线粒体DNA的异质型

研究中国人群中线粒体 D 环区不同组织间的差别,用 PCR-测序方法对53个无关个体的毛发与血液样本进行线粒体 DNA 高变区 HVⅠ进行测序分析,通过377测序仪检测,发现1例个体中血液与毛发样本线粒体 HV Ⅰ区15997～16401间存在序列差异。在16235碱基处,毛发样本表现为 T,血液样本为 C/T。结果显示中国人群同一个体不同组织存在线粒体序列差异。     

北京地区汉族群体ITI的遗传多态性

<正> 间-α-胰蛋白酶抑制因子(Inter-α-trypsin in-hibitor,ITI)是由两条重链和一条轻链所组成的糖蛋白,分子量为220道尔顿。它由肝脏合成,存在于人类血浆中,正常浓度为0.5mg/ml。1990年。Vogt等首先应用等电聚焦免疫印迹和免疫固定技术在德国人群中报道了人类 ITI 的遗传多态性,发现了3个等位基因:ITI*1、ITI*2、ITI*3,并称其为一种新的遗传标记。随后国内外学者相继报道了ITI 的遗传多态性,并发现了一些罕见的等位基因。本文作者采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦(IEF)免疫     

宁夏回族3个STR基因座的多态性分析

本文作者调查了D16S539,D7S820,D13S317三个基因座在宁夏回族人群中的基因频率分布情况,现报道如下。1　材料与方法1.1　实验材料无关回族个体血样标本从宁夏医学院附属医院采集,血纱布阴干保存。1.2　实验方法1.2.1　DNA模板的制备　按chelex-100法提取血痕DNA。1.2.2　复合扩增　扩增引物及缓冲液均采用Geneprint试剂盒(PromegaCorporation),加入5μl模板DNA上清液及0.75μTaq酶(PE公司),总体积25μl于PCR仪(PE480)中,96℃变性2min,然后94℃变性1min,60℃退火1min,70℃延伸1.5min,循环10次;再于90℃变性1min,60℃退火1min,70℃…     

DNA芯片及其在法医物证鉴定中的应用前景

自90年代初,世界各国相继启动人类基因组计划,目前已取得了相当大的进展。生物科学、计算机科学、数学等各个学科中的理论和技术的相继应用,它们相互交叉与融合,使这一领域发展日新月异。1996年底,美国旧金山Affymetrix公司的StevenFodor等[1、2]利用照相平板印刷、计算机、半导体、激光共聚焦扫描、寡核苷酸DNA合成、荧光标记探针杂交等技术,创造了第一块DNA芯片。在短短几年间,人们已发现它在基因表达谱分析、新基因发现、基因突变及多态分析、基因组文库作图、疾病诊断和预测、药物筛选、基因测序等方面的巨大应用价值,成为研究的热…     

DNATyper^(TM) 15试剂盒直接扩增检验纸质样本的研究

目的检验DNATyperTM15直接扩增系统的有效性。方法使用DNATyperTM15直接扩增系统对我国DNA数据库建库4种常见样本类型进行直接扩增检验。结果获得了血滤纸、公安部物证鉴定中心采血卡、博坤采血卡和FTA卡等样本类型的完整DNA分型。结论 DNATyperTM15直接扩增系统能够用于常见纸质样本的检验。