猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶TsCL-1基因在毕赤酵母中的表达

采用RT-PCR方法从猪囊尾蚴总RNA中扩增出TsCL-1基因并构建了真核表达载体pPIC9K-TsCL-1,pPIC9K-TsCL-1电转化毕赤酵母GS115.采用G418抗性梯度筛选多拷贝重组菌株,经甲醇诱导表达,应用SDS-PAGE和Western-blot分析重组蛋白的表达情况.结果显示,TsCL-1与GenBank登录的TsCL的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.8%和100%,与肝片吸虫和大片吸虫组织蛋白酶氨基酸的同源性为76.3%.TsCL-1基因在毕赤酵母中成功表达,表达产物的分子质量为42 ku左右;Western-blot分析表明,表达产物具有反应原性.     

猪带绦虫六钩蚴45W-4BX抗原的制备及其杂交瘤细胞株的建立

为获得针对猪带绦虫六钩蚴(TSO)45W-4BX抗原的杂交瘤细胞株,用IPTG对TS045W-4BX的重组质粒pGEX-4BX进行了诱导表达,并采用Sepharose-4B层析技术对表达产物进行纯化,运用SDS-PAGE和Western-blot分别对其纯度和活性进行了检测.分别用弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂乳化已纯化的猪带绦虫TS045W-4BX重组抗原,随后用其分别免疫BALB/c小鼠3次,检测血清抗体效价呈阳性.之后,再进行加强免疫,取免疫小鼠脾细胞和SP2/0细胞进行融合,经TS045W-4BX抗原和GST抗原双系统间接ELISA筛选,最终获得了18株抗TS045W-4BX抗原的杂交瘤细胞株.采用有限稀释法对其中的4株进行5次亚克隆,最终获取了4株稳定分泌针对TS045W-4BX抗原的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,金标试纸条法鉴定其抗体亚类均属于IgG1类,轻链为κ型.     

跨国并购中外企与国企的差异性研究

自20世纪80年代以来。国际上跨国并购活动逐渐频繁,规模越来越大,进入20世纪90年代以后,通过并购实施跨国经营和全球扩张,已成为国际资本流动的主要选择和大企业发展壮大的重要途径。本文将针对跨国并购中外企与国企的现状,进行比较分析找出其差异性。     

试论党组织在股份制企业中的领导权

股份制企业党组织作为执政党的基层组织，在企业中能否发挥政治核心作用，实现领导权，这是一个重大的政治原则问题，可是现实中，不论是理论上还是在实践中都受到冲击和令人困惑。这已成为摆在我们理论工作者和党务工作者面前的一个不容回避的重要课题。一、股份制企业必...     

羊投服丙硫咪唑缓释药弹后不同时间血药浓度的测定

丙硫咪唑为广谱驱虫药，已在兽医临床上广泛应用，但按传统方法给药往往需要重复用药，费时费力，即使通过拌料或饮水给药也常造成动物个体摄药不均，不能控制亚临床感染，也容易引起寄生虫产生抗药性种群，所以研制长效缓释制剂已成为驱虫药新剂型的发展趋势，国外在这方...     

从成功的家族式创业看大学生创业政策

大学生创业已经成为就业的一种重要形式,但是现有的创业优惠政策对大学生创业的鼓励作用并不十分明显,还存在着不足之处。大学生创业政策应该在以下几个方面进行改进:为企业和潜在创业者之间搭建桥梁;让成功的创业者为潜在创业者传授经验;提高小额贷款的额度;完善税收优惠政策。     

努力抓好十七大精神的学习教育

济南军区某红军团把学习宣传贯彻党的十七大精神，当作头等大事和首要政治任务，高度重视，大事大抓，坚持学以致用，用以促学，扎实开展学习贯彻十七大精神教育活动，努力用十七大精神武装头脑、指导实践、推动工作，积极把官兵学习贯彻十七大精神焕发出来的政治热情，转化为做好本职工作的强大动力。     

行政权力与公民权利

行政权力是最具侵犯性的权力.行政实行首长负责制,权力相对集中,强调命令与服从,享有行政优先权和自由裁量权,使得依法行政成为依法治国中最困难的部分.如何保证行政适当,防止行政失当,其核心和关键是实行法治化行政或依法行政.为什么要实行法治化行政?行政当依何种之法?怎样防止行政立法过滥?如何平衡行政权力与公民权利间的关系?不论是从理论上说,还是从现实需要的迫切程度来看,这些问题已成为依法治国的关键.一法治化行政就是行政机关依法行使行政权力.法律是行政机关据以活动和人们对该活动进行评判的标准.“无法律即无行政”.当代英国学者将法治原则概括为:“1.政府的一切活动必须遵守法律;2.法治原则不局限于合法性原则,还要求法律必须符合一定标准,具备一定内容;3.法律原则表示法律的保护平等;4.法律在政府和公民之间无偏袒.”在     

小反刍兽疫病毒Nigeria75/1株F基因的克隆与原核表达

提取小反刍兽疫病毒(PPRV)疫苗株Nigeria 75/1的总RNA,用RT-PCR方法扩增F基因并克隆到pMD18-T载体中,以鉴定正确的质粒为模板克隆去掉N端信号肽和跨膜区的F基因(F-1)并亚克隆于原核表达载体pET-30a(+),得到重组质粒pET30-F-1,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE、Western-blot分析,同时将重组蛋白免疫SPF家兔制备抗体,进行间接免疫荧光检测并用ELISA测定抗体效价.结果显示,目的基因正确插入了表达载体,在大肠杆菌中主要以包涵体形式表达,用重组蛋白免疫3次后,兔血清抗体达到较高水平,Western-blot分析说明表达产物能够与兔血清抗体发生特异性反应,间接免疫荧光试验显示重组蛋白免疫兔阳性血清能够识别PPRV Nigeria 75/1株全病毒抗原.表明,重组蛋白在原核表达系统内得到了高水平的表达,并且具有较好的反应原性.     

华东师范大学统战理论研究会成立

1月8日下午．华东师大统战理论研究会成立大会在华东师大中山北路校区逸夫楼举行。市社会主义学院副院长、市统战理论研究会副会长兼秘书长张颖，华东师大党委副书记罗国振出席成立大会并讲话。会议由华东师大党委统战部长金勤明主持。