固相萃取／LC-MS／MS测定尿液中吗啡类药物

目的 建立尿液中吗啡类药物的固相萃取／LC—MS／MS方法。方法采用OASIS MCX3cc（60mg）固相萃取柱进行提取,应用LC—MS／MS方法进行检测,运用保留时间和MRM方式对尿液中吗啡类药物及其代谢物进行定性定量分析。结果磷酸盐缓冲液pH4．0时,海洛因、6-MAM、可待因、吗啡、M3G的固相萃取回收率分别达64．33％-70．21％,96．95％～117．57％,83．60％～123．63％,68．82％～91．03％,94．64％～107．33％;最低检测限（LOD）分别为5、10、5、5、2pg,线性范围0．005～10μg／mL;相关系数分别为0．9998、0．9958、0．9992、0．9994、0．9997。结论本文所建方法,适用于尿液中吗啡类药物的分析。     

过敏性休克死亡者肺组织类胰蛋白酶及类糜蛋白酶的表达

目的观察类胰蛋白酶与类糜蛋白酶在过敏性休克死亡人体肺组织中的表达,并探讨其在过敏性休克死亡法医学鉴定中的意义。方法应用荧光免疫组化法对类胰蛋白酶与类糜蛋白酶进行检测,同时以10例CO中毒死者为对照：采用图像分析仪及Image—pro plus 5．0．2软件进行图像分析,计算阳性肥大细胞数及类胰蛋白酶、类糜蛋白酶荧光表达强度。结果与对照组相比,实验组肺组织中类胰蛋白酶和类糜蛋白酶表达差异有统计学意义（P〈0．05）。结论过敏性休克死亡人体肺组织中类胰蛋白酶与类糜蛋白酶的表达增强．可作为过敏性休克死亡的形态学诊断依据。     

家兔血液和尿液中氯胺酮浓度的相关性

目的研究家兔尿液中氯胺酮及代谢物去甲氯胺酮浓度与血药浓度的动态相关性。方法实验家兔分为氯胺酮灌胃组、静脉注射组和对照组,分别于染毒前和染毒后不同时间点收集尿液和血液。气相色谱/质谱联用(GC/MS)全扫描定性、气相色谱(GC)定量分析血液和尿液样品中氯胺酮及去甲氯胺酮的浓度。采用双变量Pearson相关分析研究尿液中药物浓度和血药浓度的相关性。结果氯胺酮灌胃组和静脉注射组给药后各时间点氯胺酮及去甲氯胺酮在尿液和血液中的浓度相关系数范围在0.11～0.69之间。结论氯胺酮及去甲氯胺酮在尿液和血液中的浓度相关性较差,尿液药物浓度并不能直接反映血药浓度,因此用尿液中氯胺酮浓度推断血药浓度时应慎重考虑。     

MiniM48试剂盒在腐败尸体DNA检验中的应用

在法医学检案中,经常遇到腐败、微生物污染的检材,为DNA个体识别带来网难。本文应用MiniM48试剂盒纯化浓缩DNA,对腐败尸体检材进行STR分型,并比较检出效果,以期为相关法医学实践提供参考。     

MHSeq Typer47试剂盒在亲缘关系鉴定中的应用效能评估

目的探讨MHSeqTyper47试剂盒在亲缘关系鉴定中的应用价值。方法采用MHSeqTyper47试剂盒对113份亲缘关系个体DNA样本进行基因座复合扩增及文库构建,使用MiSeq FGx测序仪进行测序,测得的数据应用MHTyper数据分析软件进行基因分型,计算亲缘关系指数评估该试剂盒在亲缘关系鉴定中的应用效能并与GlobalFiler^TM试剂盒进行比较。结果MHSeqTyper47在三联体鉴定中CPI值1.43×10¹¹～6.15×10¹⁸,二联体鉴定中CPI值3.75×10⁵～1.53×10¹³,全同胞鉴定中CFSI值7.73×10¹～2.59×10¹⁶,三联体、二联体和全同胞关系对均与无关个体对可以完全区分。MHSeqTyper47和GlobalFiler^TM试剂盒联用在二级亲缘关系中的系统效能为0.466 2。结论MHSeqTyper47混合DNA鉴定试剂盒在一级亲缘关系鉴定中有较高的应用价值;与Glob...     

抑制消减杂交技术筛选大鼠急性心肌缺血后差异基因

目的采用抑制消减杂交技术,筛选早期心肌缺血相关的RNA分子,为相关研究和应用提供依据。方法 10只SD雄性大鼠结扎冠状动脉前降支1h,制作心肌缺血模型。以缺血心肌的RNA分子为实验组,以非缺血区的RNA分子为对照组,用Clontech公司抑制消减杂交试剂盒进行杂交。经蓝白斑筛选阳性克隆测序并经过斑点杂交确认,构建早期大鼠心肌缺血后抑制消减杂交文库,所得序列和Genbank数据库比对。结果筛选到10个阳性克隆和11个未知基因的表达序列标签(expressed sequence tag,EST),按照功能分类,包括代谢相关的酶类基因,核糖体和翻译相关的基因,心肌重塑相关的基因等,其中组织蛋白酶L1,basigin等基因等是首次报道与早期心肌缺血相关。结论采用抑制消减杂交技术获得的差别表达基因可为早期心肌缺血提供新的目标分子。     

上颌尖牙髓腔体积与牙体积比值在个体性别判定中的应用

目的探讨三维重建的上颌尖牙髓腔体积与牙体体积在个体性别判定中的临床应用价值。方法选取2015年9月-2016年8月山西医科大学口腔医院放射科患者的CBCT影像资料片103例(男51例,女52例),利用Mimics17.0分析软件测量上颌尖牙髓腔体积(PV)、牙体积(TV)及髓腔体积与牙体积比值(PV/TV),使用SPSS16.0统计软件和Fisher判别法对数据处理,得出性别判定函数,并采用Cross-Validated法进行效果评价。结果以牙体积(TV)和髓腔体积与牙体积比值(PV/TV)作为研究指标进行性别推断时,个体性别判别函数为Y=0.009(TV)+28.896(PV/TV)-6.962,采用Cross-validated法进行效果评价,判别符合率为男51例,判断正确率为64.7%;女52例,判断正确率为78.8%。结论上颌尖牙牙体积(TV)和髓腔体积与牙体积比值(PV/TV)能够做为性别推断的研究指标,它为法医个体性别推断提供一种新的方法和途径。     

DART-MS/MS快速检测人血中的3种合成大麻素

目的使用实时直接分析-串联质谱,建立快速检测人血中的JWH-018、JWH-250和AM-2201的方法。方法用乙腈-甲醇(4:1)沉淀蛋白的方法对血样进行简单前处理,采用DART 12Dip-it自动进样系统,以正离子、MRM模式进行分析。结果血液中JWH-018、JWH-250、AM-2201可以得到有效检测,在0.02-5.00μg/m L线性关系良好,相关系数均大于0.99,检出限分别为0.016μg/m L,0.003μg/m L和0.017μg/m L,日内、日间RSD均小于15%。结论本文所建方法灵敏度高,准确性较好,方法省时省力,可用于实际案例血液中合成大麻素JWH-018、JWH-250、AM-2201的分析。     

液相色谱-三重四极杆质谱法同时检测生物检材中百草枯及其代谢物

目的建立生物检材中同时检测百草枯(paraquat,PQ)及其主要代谢物单季铵盐(monoquat)、百草枯-单吡啶酮(paraquat-monopyridone,MP)、百草枯-联吡啶酮(paraquat-dipyridone,DP)、4-羧基-1-甲基吡啶盐(4-Carboxy-1-methylpyridinium ion,MINA)的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法。方法以百草枯氘代内标(Paraquat-d8 Dichloride,PQ-D8)作为内标,检材样品调节pH后,经乙腈沉淀蛋白,使用不同色谱柱洗脱,在多反应监测模式下检测。结果百草枯PQ、monoquat、MP、DP、MINA的线性范围分别是5~800ng/mL、0.5~80ng/mL、5~800ng/mL、2.5~400ng/mL、2~320ng/mL(r均高于0.993),日内、日间精密度(RSDs)分别在5%~14%、3%~13%、3%~15%、5%~13%、2%~15%之间,准确度(RE)分别在91%~116%、80%~100%、80%~111%、85%~114%、91%~114%之间。生物样品处理后自动进样器上室温放置72h,各物质的准确度分别在90%~119%、56%~125%、60%~110%、78%~98%、83%~117%之间。结论本测定方法前处理过程简便,分离效果好,提取效率高,可使用本方法对疑似百草枯中毒的检材进行原体及代谢物的检测,为案件提供法律依据;本实验优化了课题组前期建立的生物样品中百草枯及monoquat、MP的检测方法,参考其案例结果,检测相应检材,对比分析,该检测方法在原体含量大幅下降时,痕量代谢物仍可检出。     

两种铁铬合金电警棍遗留金属颗粒成分分析

目的检测两种电警棍铁铬合金电极遗留金属颗粒的成分,对同一电警棍电击前后遗留金属颗粒成分特征进行分析,对电警棍遗留金属颗粒成分的稳定性、差异性进行评价。方法使用电警棍分别多次摩擦滤纸和电击猪皮,使用碳导电胶带粘取遗留金属颗粒,应用SEM/EDS技术检测颗粒元素成分,并对数据进行统计学分析。结果两种电警棍电击前遗留铁铬合金颗粒及电击后遗留铁铬合金颗粒成分均稳定,存在差异;实验两种电警棍电击后遗留金属颗粒成分分布发生显著变化,除原成分铁铬颗粒外,实验猪皮表面均检出全新成分的铁铬合金颗粒,且两种电警棍电击后产生的全新铁铬颗粒成分稳定无显著差异。结论通过分析两种电警棍铁铬电极电击前后遗留多金属颗粒成分分布特征,可以实现对两种电警棍电极的识别,为人体电警棍损伤的识别与认定提供技术支持和理论依据。