NF-κB受体激活因子配体的表达及其多克隆抗体的制备

为获取猪源NF-k B受体激活因子配体(RANKL)及其抗体,根据GenBank中猪源RANKL的序列设计引物,将合成的RANKL基因克隆至pMAL-C4x表达载体,转化到大肠杆菌DH5α。经PCR和双酶切鉴定后测序分析,将阳性克隆转化至大肠杆菌BL21后通过IPTG诱导表达。优化表达条件,确定是包涵体表达,蛋白大小为78.1 ku。使用纯化的RANKL为抗原免疫兔制备多克隆抗体。构建重组质粒pCMV-RANKL,表达目的蛋白并使其与多克隆血清反应。经ELISA、Western-blot和IFA鉴定,证实抗RANKL多克隆抗体有良好的抗原特异性,为后续黏膜免疫的研究奠定了基础。     

教练车撞死人后引发的连环诉讼

2011年5月9日下午两点多钟，江苏省句容市华阳北路某十字路口发生一起交通事故。一辆挂有“教练车”字样的重型货车，在左转弯过程中与路边骑电瓶车的被害中年男子汤朝华发生碰撞，而“肇事者”正是在车内学习驾驶技术的韩平。事故发生后，坐在副驾驶座上指导教学的教练王春明一边下车抢救被害人汤朝华，一边拨打了110报警……     

旬窖法院 扎实开展涉军维权工作

面对近年来军人军属的合法权益遭受侵害案件不断增多的问题,江苏省句容市人民法院高度重视涉军维权工作,受到了部队官兵和地方政府的好评。该院成立了以院长为组长的“维护国防利益和军人军霭合法权益工作领导小组”,在审理涉军案件特别是军入军婚案件时,选派“军嫂”或“准军嫂”担任案件的主审法官或书记员,     

鸡γ-干扰素实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为建立一种检测鸡γ-干扰素的实时荧光定量RT-PCR方法,采用RT-PCR方法从ConA诱导活化的鸡脾淋巴细胞的总RNA中扩增得到鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)和鸡的28 SrRNA(Ch28 S)基因,将其分别克隆至体外转录载体后经体外转录获得了ChIFN-γ和Ch28 S的RNA,采用各自的特异性引物及Taqman探针,以Ch28 S RNA作为内参进行一步法实时荧光定量RT-PCR,检测ChIFN-γ。结果表明:ChIFN-γ和内参Ch28 S的Ct值与标准品稀释梯度在1×102~1×107拷贝/μL范围分别呈良好的线性关系,r2均大于0.99。此方法用于检测ChIFN-γ,具有简便、高效、敏感、特异的特点。     

"人肉搜索"的法律问题研究——兼论网络隐私权的保护

互联网技术的高速发展,给我们的生活、工作和学习带来了巨大的便利。在感受网络便利的同时,我们也发现一些由网络引发的问题正深刻的影响着人们的生活。特别是"人肉搜索"现象日趋严重,网络隐私权的保护已经成为一个亟待解决的问题。本文以"人肉搜索"为出发点,旨在对如何保护互联网中的隐私权这一热点问题进行分析,并提出相关解决对策。     

茨城病毒VP7蛋白基因的克隆表达及间接ELISA方法的建立

采用RT-PCR方法扩增出了茨城病毒(IBAV)No.2株编码VP7蛋白的S7全长基因,并克隆入原核表达载体pET-28a( )中,在E.coliBL21中表达。经Western-blot检测,表达的重组VP7蛋白具有良好的反应原性。以纯化的重组蛋白作为包被抗原,初步建立了检测IBAV血清抗体的间接ELISA方法。     

H5亚型禽流感病毒核蛋白基因重组质粒的构建及其在Hela细胞的瞬时表达

采用PCR技术从重组质粒pMel-NP扩增得到了禽流感病毒(AIV)A/Goose/Guang-dong/1/96(H5N1)株的核蛋白(NP)基因,将其亚克隆至真核表达载体pVAX1上。将提取的pVAX-NP阳性克隆转染Hela细胞,48 h后经间接免疫荧光试验和Western-blotting检测,NP基因在Hela细胞中已成功瞬时表达。表达产物的分子质量约为57 ku,它与H5N1亚型AIV多克隆抗血清有较好的免疫反应。     

猪源多聚免疫球蛋白受体的表达及抗血清的制备

为了制备猪源pIgR蛋白的多克隆抗体,分析NCBI提供的猪源pIgR的胞外区基因序列并设计引物,经过PCR、酶切、连接,将目的 序列克隆入原核表达载体pET-30a(+),测序验证成功后,将带有目的 片段的重组质粒转化入大肠杆菌(E.coli) BL21 (DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,通过Ni-NTA亲和层...     

从“三聚氰胺”事件探析我国的政府信息公开制度

三聚氰胺一个在2008年让世人关注的名词。同样我们也忘记不了2003年的SARS,要是说SARS对政府信息公开制度的推出起到一个助推的作用,那么三聚氰胺则是对政府信息公开制度的考验。本文以政府信息公开为出发点,简要分析了政府信息公开的意义和主要问题,并对如何健全和完善我国政府信息公开制度提出了相关建议。     

南京军区某通信团——一个团队的“发展样本”

走进南京军区某通信团的大门,不禁让人眼前一亮:青山叠翠,鸥鹭戏水,笔直宽阔的道路、红瓦白墙的战士宿舍,掩映在法桐林中,现代和自然的完美融合勾勒出一派祥和景象。这是该团党委始终秉承"你想党委发展的事,党委办你关心的事,在