口蹄疫病毒O型和A型交互反应性单克隆抗体的筛选与鉴定

不同血清型口蹄疫病毒(FMDV)之间不能产生交叉免疫保护,但是血清学的交叉反应确实存在。本研究旨在建立一种筛选型间交互反应性抗体的方法,以期为解析FMDV血清型间保守的抗原结构奠定基础。本方法主要依据单个B细胞抗体技术,首先采用两种不同的荧光染料FluoProbes 647H和Pacific Blue分别标记O型与A型FMDV 146S灭活抗原,然后利用流式细胞分选技术,从免疫牛外周血单个核细胞(PBMCs)中分选出结合两种抗原的特异性B细胞,通过单个B细胞抗体基因测定,获得Ig G抗体重链与轻链可变区编码序列,并将可变区基因插入含有牛IgG抗体恒定区的pcDNA3.4载体中,构建IgG抗体的重链与轻链表达质粒。将重链与轻链表达质粒共转染中国仓鼠卵巢悬浮细胞(CHO-S)进行完整抗体表达。结果显示,通过该方法获得了5株FMDV特异性单克隆抗体,其中4株(H64、R82、I16、R29)经间接免疫荧光(IFA)检测都可特异性识别O和A型FMDV;ELISA结果显示,H64、R82、I16与O、A型抗原均具有较好的亲合力;Western-blot结果显示,I16可特异性结合O、A型FMDV结构蛋白VP2中的线性表位,说明在衣壳蛋白VP2上存在血清型间保守的抗原表位,通过本研究进一步加深了对FMDV抗原结构的认识。     

B细胞分离方法的研究进展

B细胞是重要的免疫细胞,如何筛选和分离分泌抗体的抗原特异性B细胞,对于研制一些特殊功能的抗体具有重要的方法学意义。本文阐述了不同发育阶段B细胞的表面分子特征与种属差异,以及基于这些表面分子的不同B细胞分离方法的原理与优缺点,旨在为抗原特异性B细胞的分离提供参考。     

B细胞永生化方法的研究进展

B细胞永生化是一个历久弥新的研究课题,如何维持B细胞体外连续传代增殖并表达抗体的特性,对于研制治疗和诊断用抗体类药物和制品具有重要的意义。B细胞永生化的方法包括杂交瘤技术,EB病毒或SV40感染永生化以及遗传修饰法。永生化B细胞能快速有效的产生单克隆抗体,这种抗体能克服异源抗体产生的免疫排斥,是制备单克隆抗体的理想来源,成为研制治疗性单抗的重要方法。本文主要概述了B细胞永生化方法的研究进展与未来的发展方向,以供从事这方面研究的人员参考。     

长征感怀

为了救国救人民,策略神妙出奇征。行程二万五千里,神州大地播火种。伟业壮观山河秀,会宁会师定乾坤。会师楼上铭衷意,代代传承长征魂。长征感怀@王省三     

生命无价青春无悔——记山东省立医院急救中心副主任刘东兴

山东省立医院急救中心副主任刘东兴，多年来致力于急危重症病人的抢救治疗，在心脏性猝死、呼吸衰竭、休克等危重病的治疗领域均有独到的见解和医术，挽救了许多垂危病人的生命。他恪守医德，急病人所急，想病人所想，被人们称为“最可亲的医生”。