旋毛虫p46000抗原基因的转录及表达特性鉴定

根据旋毛虫p46000抗原基因和葡萄糖3一磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因序列设计特异引物,以不同发育时期旋毛虫总RNA为模板进行SYBR Green染料法实时定量RT-PCR检测p46000基因转录情况.制作不同发育时期旋毛虫虫体及感染组织石蜡切片,采用免疫荧光染色技术检测p46000抗原的表达及定位情况.结果显示,p46000抗原基因在旋毛虫不同发育时期均有转录,但转录水平有明显差异,转录高峰集中于成虫和肌幼虫期,新生幼虫期明显低于其他时期.天然p46000抗原蛋白定位于杆状体和虫体表面,表达高峰集中于成虫、肠道期及成囊期肌幼虫.表明,p46000抗原基因的转录与表达具有一定的时空特异性.该基因在旋毛虫的寄生过程中尤其在早期感染中具有重要作用且可能与旋毛虫的免疫逃避有关.     

旋毛虫5日龄成虫期特异性基因片段的克隆及鉴定

利用差减抑制杂交(SSH)技术,以旋毛虫5日龄成虫的cDNA为试验方(tester),以肌幼虫+3日龄成虫的cDNA为驱动方(driver),制备5日龄成虫差减cDNA,并与pT-Adv载体相连接,转入大肠埃希氏菌TOP 10F.以试验方的差减cDNA PCR产物+未差减cDNA为试验方探针,以驱动方的差减cDNA PCR产物+未差减cDNA为驱动方探针,对5日龄成虫差减cDNA克隆进行初步筛选,对筛选到的阳性克隆进一步用southern blot进行鉴定,并对其测序,进行序列分析.结果表明,获得1个大小为464 bp的旋毛虫5日龄成虫期特异性cDNA片段,经BLAST软件分析表明,该序列是1个未见报道的旋毛虫基因序列片段,可能编码1种表皮胶原蛋白.这为旋毛虫5日龄成虫期特异性基因全长序列的钓取、分析及鉴定奠定了基础.     

用随意扩增的DNA多态性鉴定中国分离的部分旋毛虫虫株

以旋毛虫（Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌａｓｐｉｒａｌｉｓ）国际标准虫种作对照，利用随意扩增的ＤＮＡ多态性技术对国内的部分旋毛虫分离株进行了鉴定与分析。经５条引物的单扩增及复合扩增结果显示，中国的旋毛虫猪株为Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ，犬株为Ｔ．ｎａ－ｔｉｖａ，猫株为Ｔ．ｎｅｌｓｏｎｉ。     

寸待索罗斯——防范胜于学习

自从国际金融炒家索罗斯的名字传入中国大陆以来，出版界和媒体给予了少有的关注：索罗斯每有什么举动，媒体总是要不失时机地加以报道；索罗斯每出版一本新作，出版界总要迅速翻译出版。从《金融炼金术》(海南出版社1997年出版)、《索罗斯》(海南出版社1997年出版)、《全球资本主义的危机》(青海人民出版社1999年出版)到《开放社会——改革全球资本主义》(商务印书馆2001年出版)，索罗斯著作的中文版从未有过延误和怠慢。由于媒体和出版界的关照，索罗斯几乎成了中国众所周知的人物。     

灾害经济学应成为一门显学

<正>2013年1月11日,云南省昭通市镇雄县果珠乡高坡村赵家沟发生山体滑坡,46人遇难。此前,2012年9月云南彝良地震之后再次发生山体滑坡事件,2012年10月4日,昭通市彝良发生山体滑坡,一所小学被埋,18名学生和一名村民遇难。云南昭通山水相依的两县相继经历严重的山体滑坡事件,且都发生在地震之后,其与地震的关联程度如     

光盘行动:克服“舌尖上的浪费”

<正>2013年初,一场以节约粮食为宗旨的"光盘行动",从网络到现实轰轰烈烈地展开,号召人们吃光盘子里的饭,喝光杯子里的水,提倡节约,反对浪费。这场行动由媒体人发起,很快成为各大媒体的热点,也成为国内各地、各阶层的行动,一些酒店纷纷推出小份菜、半份菜,提倡顾客能吃多少点多少;有酒店建议人们"吃不了兜着走",主动替客人将吃不完的食物打包带走……应当说,这场行动有着很强的现实针对性,有利于督促国人改掉铺张浪费的毛病,养成节约食物和资源的习惯。中国人解决温饱没几天,却开始出现大吃大喝、铺张浪费的苗头,甚至要未富先奢,这的确引人深思,值得警惕。有一项调查显示,我国消费者每年仅餐饮浪费的食物蛋白和脂肪就分别达800万吨和300万吨,最少倒掉了约2亿人一年的口粮,价值高达2000亿元,约为2亿亩     

旋毛虫丝氨酸蛋白酶基因的克隆与分析

以旋毛虫感染猪血清为抗体探针,对旋毛虫3日龄成虫cDNA文库进行免疫筛选,将获得的阳性克隆进行测序,用分子生物学软件对所得cDNA序列进行了分析.序列分析结果显示,阳性克隆Zh68 cDNA全长为1 372 bp,含有1个1 287 bp的完整的开放阅读框架,编码由429个氨基酸组成的多肽,理论分子质量为47.5 ku,等电点为8.45.SMART分析表明,1～18位氨基酸为信号肽序列,37～277位氨基酸为典型的丝氨酸蛋白酶胰蛋白酶类结构域,其中His88、Asp142、Ser233为催化中心的3个主要氨基酸残基,78～80位氨基酸为N-糖基化位点(NCS),另外还有6个保守的Cys形成二硫键.BLASTn同源性分析表明,与其他生物丝氨酸蛋白酶的基因序列无明显的同源性,为1个新的cDNA分子.BLASTp蛋白质同源性分析表明,与丝氨酸蛋白酶的同源性为30%左右.Southern-blot杂交表明,此基因在旋毛虫基因组中属于多基因家族,具有基因多态性.cDNA的PCR结果表明,此基因在旋毛虫肌幼虫、新生幼虫及成虫期均有表达.     

旋毛虫新生幼虫cDNA文库的构建

为了克隆和研究旋毛虫新生幼虫功能性抗原基因,采用酸性异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法提取新生幼虫总RNA,Oligo(dT)纤维素柱纯化mRNA,反转录合成第一链cDNA及第二链cDNA,用CHROMA SPIN-400柱离心层析纯化后,与载体λZAP Express连接.体外包装后得到中国猪旋毛虫(Trichinella spiralis)分离株新生幼虫cDNA文库.文库容量为2.0×106,重组率为98.6%,插入片段长度在0.4×103-2.0×103bp.     

国内建设应多些灾害经济学视角

<正>灾害经济学逐渐成为各国防灾减灾政策的重要知识源头,但从现实情况来看,国内对灾害经济学的研究运用和重视程度还远远不够。为什么这么说呢?现实中许多自然灾害中的人祸因素,恰恰说明了减灾意识在许多领域里的缺乏,也说明灾害经济学研究和普及的紧迫性。灾害经济学的一些常识让我们知道,与其他经济学科相比,灾害经济学有几个突出的特点:一是灾害经济学的目标不是利益最大化,而是损失最小化。灾害经济学谋求的是以最小的投入来实现受灾损失的最小化。二是灾害经济学是一门守业经济学。灾害经济学不研究价值形成和价值增     

早餐边走边吃危害大!

卫生堪忧城市的污染已经成了不可阻挡的趋势,在路上边走边吃早餐,使我们吃进去的不仅是食物,还有空气中的重金属、灰尘和一些污染物,这样的早餐,不吃也罢。