原位反转录PCR技术的应用

针对已有资料中对于以DNA为靶基因序列的原位 PCR介绍较多,而对于原位反转录PCR的介绍很少,但在实际研究工作中有很多检测的靶基因是 RNA(病毒的或基因组的 RNA)的实际情况,就原位反转录PCR技术的基本原理、影响试验结果的关键因素和步骤,如组织细胞的固定、引物和探针的选择、蛋白酶及DNA酶消化、假阳性及假阴性的产生等进行了概述,旨在通过探讨上述问题,对该技术的实际应用有所指导。     

辽宁地区汉族人群补体C7遗传多型性研究

本文应用薄层琼脂糖凝胶等电聚焦电泳结合免疫印迹技术,报道了辽宁地区汉族随机人群补体第七成分遗传多型性的分布,C7的基因频率为C~(1)_(7)=0.8251,C~(2)_(7)=0.1108,C~(3)_(7)=0.0320,C~(4)_(7)=0.0320,按Hardy·Weinberg法则进行吻合度检验,其观测值与期望值一致,文中并对与中国其它地区及与日本人群等位基因的差异性做了比较.     

E-凝胶35分钟得出DNA结果

每个人的ＤＮＡ谱图和指纹一样都是唯一的 ,因此可以帮助调查员确定罪犯的身份。执法在这一领域的成功使ＤＮＡ谱图成为一种越来越常用、有力而且越来越有争议的刑事调查工具。Ｅ -凝胶是在一个不加缓冲溶液的容器里预制成琼脂凝胶 ,可以使ＤＮＡ电泳更加容易和方便。这一新技术为法庭科学、军队、环境和其他领域的科学家提供了一种要以在实验室之外运行的便携式电泳系统 ,从而减少了样品在运输过程中因污染或延时而出错的机会。尽管电泳是一种最广泛应用的实验室方法 ,但是它仍然是单调乏味和费时的。经过改进的Ｅ -凝胶技术在提供同样质量…     

HPLC测定复方丹皮酚凝胶中丹皮酚含量

目的:建立复方丹皮酚凝胶中丹皮酚的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为SHIMADZU VP-ODS(4.6 mm×150 mm, μm),流动相为甲醇-水(50∶50),检测波长为274 nm.结果:丹皮酚进样量为0.05～0.30 μg时呈良好的线性关系(r =0.999 8).平均回收率为100%,SD为0.87%(n =5).结论:PLC法可用于复方丹皮酚凝胶的质量控制.     

浅谈静力触探技术在工程中的应用

原位测试,一般指的是工程勘察现场,在振动或基本不振动的情况下进行测试,获得所测土层的物理力学指标及划分土层的一种勘察测试技术。在各种原位测试技术中,静力触探是应用范围最广和最成熟的手段之一。传统的工程勘察手段是利用机械回转或冲击方法钻入土层,然后经锤击或静压法将土样从钻孔内取出,不可避免地使土样产生不同程度的扰动,不能真实地反映土的原始状态指标,因此     

从聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA片段直接PCR的简易方法

将聚丙烯酸胺凝胶中ＤＮＡ片段于ＰＣＲ缓冲液中电洗脱，加入ＰＣＲ反应试剂，直接扩增目的ＤＮＡ作进一步分析，ＤＮＡ片段回收效率为０．８９±０．０５，本方法简便、快速。     

现场模拟试验在一起投毒案中的作用

1案件简介简要案情:2004年2月15日,某村张某(男,46岁)和其母亲王某(73岁)各吃了一碗约500ml玉米糁粥后很快出现了头晕、抽搐等症状,急送医院抢救,王某抢救无效死亡,张某治疗一周后痊愈出院。病历摘要:王某,女,73岁,入院时,神志不清、口吐白沫、呼之不应、皮肤潮湿、双侧瞳孔针尖样、口唇发绀,给予阿托品、解磷定等药物抢救无效,于当晚19时50分死亡。张某,男,46岁,半小时前吃晚饭时,觉口味较苦,后觉头晕、恶心、随后摔倒。查体:神差、皮肤潮湿、多汗、流涎、双侧瞳孔缩小、肌颤等,血检胆碱酯酶(CHE)降低。毒化检验结果:提取现场的玉米糁,锅…     

非平衡超薄层等电聚焦同步检测ESD，EAP，ADA同功酶

在超薄层聚丙烯酰胺凝胶溶液中加入生化缓冲剂N-2-羟乙基哌嗪-N’-2-乙磺酸(HEPES)进行等电聚焦,对血样中的酯酶D(Esterase D,EsD),酸性磷酸酶(Acid Phosphatase,EAP)和腺苷脱氨酶(Adenosine Deaminase,ADA)等同功酶同步进行了分型。与普通电泳和常规等电聚焦相比,该法快速,可靠,分辨率高,适合对多个同功酶系统同时进行测定。     

从聚丙烯酰凝胶中回收DNA片段直接PCR的简易方法

将聚丙烯酰胺凝胶中ＤＮＡＳ片段于ＰＣＲ缓冲液中洗脱，加入ＰＣＲ反应试剂直接扩增目的ＤＮＡ作进一步分析，ＤＮＡ片段回收效率为０．８９±０．０５，本方法简便、快速。     

法医STR分型电泳凝胶稳定参数的探讨

目的探讨对法医STR基因分型检测使用的毛细管电泳筛分介质进行评价的参数,为电泳凝胶验证评价提供参考指标。方法采用ABI 3130xl遗传分析仪,以3130 POP-4TM凝胶为筛分介质,以分子量内标GS500LIZ和Typer500为样本,多批次进行毛细管电泳;对原始数据进行分组统计,得到单碱基对相对迁移时间及其相对标准偏差（RSD）。结果分子量内标GS500LIZ和Typer500在POP-4TM凝胶中电泳,单碱基对相对迁移时间的统计结果表现趋势相似,即随着DNA片段增大,单碱基对相对迁移时间的均值减小,标准差及相对标准偏差增大。组间方差分析结果符合方差齐性,P〈0.01,组间多重比较,P〈0.000 28（Bonferron校正）。结论单碱基对相对迁移时间的相对标准偏差（RSD）是毛细管电泳重现性的重要参数,可为凝胶研发和验证提供参考性指标。