猪传染性胃肠炎病毒的分子生物学研究进展

猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus of swine, TGEV)隶属于冠状病毒科冠状病毒属,是引起仔猪病毒性腹泻的重要病原[1].由其引起的猪传染性胃肠炎(Transmissible gastroenteritis of swine, TGE)是一种急性、高度接触性传染病,以呕吐、严重腹泻、脱水和对2周龄以内仔猪的高度致死率为特征.虽然不同年龄和不同品种的猪对本病都易感,但5周龄以上的猪很少死亡,多成僵猪,饲料报酬低,给养猪业造成了较大的损失.     

用小肠粘膜涂片直接荧光抗体染色检出猪传染性胃肠炎

近年来我省有些地方的猪只发生疑似猪传染性胃肠炎。其流行病学、临床症状、病理变化等均和国外报道的猪传染性胃肠炎(TGE)一致。1978年春我院用四平地区某猪场自然感染此病猪的小肠悬液接种2～4日龄的健康仔猪。接种后24～48小时,内均发典型“TGE症状”。取其小肠经电镜观察只见冠状病毒,据此最后确诊我省近几年来所流行的猪胃肠炎是由冠状病毒所引起的猪传染性胃肠炎(TGE)。     

用阻断酶联免疫吸附试验检测猪传染性胃肠炎病毒抗体和猪呼吸道冠状病毒抗体

用阻断酶联免疫吸附试验检测猪传染性胃肠炎病毒抗体和猪呼吸道冠状病毒抗体张净夏谦高晓燕王巧全韩国珍（上海动植物检疫局２０００３２）猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）是引起仔猪肠道疾病的冠状病毒，仔猪感染后主要表现为呕吐、水样腹泻乃至脱水，２周龄仔猪感染后死...     

浅谈猪的冠状病毒

1986年,在法国和欧洲一些国家的猪场中,产生一种没有消化道临床症状的猪传染性胃肠炎(TGE)冠状病毒变异血清型。猪场发病群,仅在几周内全部感染,TGE疫点中血清滴度基本相似。病毒传播很快,为传染性呼吸道型。在比利时,丹麦和英国已分离出病毒。在实验条件下,这种病毒只感染呼吸器官而没有消化道症状。从而证明,猪呼吸道冠状病毒的存在。     

猪传染性胃肠炎Miller毒株和四个地方毒株之间的免疫荧光交叉试验

免疫荧光技术已广泛用来研究引起新生仔猪传染性下痢病毒之间的抗原性关系。国内猪传染性胃肠炎(以下简称TGE)病毒的四个地方毒株之间荧光抗体染色有交叉反应。据目前的文献报道,TGE病毒无血清型的区别。为了进一步探讨Miller毒株和国内四个地方毒株之间的抗原性关系,本试验在过去报道的基础上,制备了抗TGE病毒Miller毒株的荧光抗体,选用不同的TGE毒株口服接种新生仔猪制备的阳性标本,分别被不同毒     

使用细胞培养单层分离猪流行性腹泻病毒

1971年,在英国的猪群中首次发现猪流行性腹泻(PED),直至1978年,英国和比利时才证实,引起PED的病原体为冠状病毒PED和猪传染性胃肠炎(TGE)是由不同血清型的冠状病毒引起危害以消化器官为主的两个类似的猪的传染病。因此,单靠临床症状和组织病理学检查来作出鉴别诊断是比较困难的,必须借助于血清学和病原学的检验。但是,由于在细胞培养物中使用胎牛血清会起到抑制冠状病毒吸收进入细胞膜受体的作用,使PED病毒在细胞培养物中生长繁殖受阻,从而对PED病毒的应用研究带来了一定的困难。据报道,     

猪肠道冠状病毒感染机制的研究进展

猪肠道冠状病毒(swine enteric coronavirus,SeCoV)是引起猪病毒性腹泻的重要病原,在世界范围内广泛流行,给全球养猪业带来了危害。本文综述了4种主要的猪肠道冠状病毒感染机制的研究,即传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV),包括通过受体APN侵入细胞并诱导宿主细胞凋亡、逃逸宿主的天然免疫,以及与宿主细胞内质网应激系统相互作用的机制,以便为猪肠道冠状病毒研究及相关疾病防控提供参考。     

猪传染性胃肠炎病毒对猪肾传代细胞的适应性观察

据报道猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)可在猪睾丸传代细胞(ST)、胎猪或新生猪甲状腺细胞、唾液腺细胞、肾细胞(ESK)、睾丸细胞(EST)等上繁殖。但我们尚未见到用猪肾传代细胞(IBRS_2)繁殖TGEV而提高其毒价的报道。 (一)材料和方法 1.种毒:Purdue毒株,1985年从美国动植物检疫局兽医诊断室引进,后用EST细胞繁殖,1987年3月测定毒价为10~2 TCID_(50)/0.05ml。     

鸡新城疫Ⅰ系苗防治猪传染性腹泻病的效果

干扰素是在特定诱生剂的作用下,由细胞基因组控制产生的一种具有抗病毒复制和肿瘤生长等多种生物学活性的蛋白质。它对几乎所有的病毒都有抑制作用,并在病毒性疾病的恢复中起着重要的作用。这些年来,绍兴地区每年冬春季节流行由猪传染性胃肠炎病毒引起的猪传染性腹泻病,经济损失严重,笔者应用新城疫Ⅰ系疫苗作为内源性干扰素诱生剂进行了防治猪传染性腹泻病的试验。(一)材料与方法 在猪传染性腹泻病流行季节(9月至次年3月)选取确诊为猪传染性腹泻病     

免疫酶技术证实:国内的猪传染性胃肠炎病毒与比利时的CLV在血清学上相一致

1979年黄均健等用免疫荧光、中和试验、酶免疫试验和猪体交互保护试验等发现国内猪传染性胃肠炎病毒(简称TGE华株)与国外TGE M株、SH株和TO株不同,初步认为TGE华株可能是TGE新的血清型,但也不排除是一个新的冠状病毒的可能。M.Pensaert在1978年报道比利时发现一个与TGE不同的CLV(Corana-like virus)。我们用比利时的CLV抗血清制成的酶标记抗体染上了我国的TGE华株。现报告如下。     

国外猪水疱病发生近况

据联合国粮农组织报道,1972年底和1973年初在欧洲一些国家突然出现猪的一种新的水疱病,引起了有关国家兽医部门的严重注意。这种病临床上同口蹄疫很难辨别,据英国、意大利和奥地利研究证明,是由猪的肠病毒所引起。该病毒对于一些常用的、已证明对口蹄疫病毒有效的消毒药剂有很强的抵抗力。只有猪能临床感染,曾发现牛可短期带毒,但未见症     

犬冠状病毒TN449株M基因的克隆与转移载体的构建

用蔗糖密度梯度离心纯化犬冠状病毒TN449株病毒液,提取总RNA并反转录,同时设计1对5′端加有BamHⅠ和HindⅢ内切酶位点的引物,对病毒cDNA进行了PCR扩增,回收PCR产物将其连接入pGEM-TEasy载体并转化大肠埃希氏菌。并对阳性重组质粒菌测序和序列分析。结果,犬冠状病毒与牛冠状病毒、猫冠状病毒、猫传染性腹膜炎病毒、人冠状病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鼠传染性肝炎病毒、猪呼吸道冠状病毒、人重症急性呼吸道综合征病毒和猪胃肠炎病毒的同源性分别是39.39%、85.41%、83.98%、36.80%、26.64%、37.23%、93.51%、29.00%和94.81%;犬冠状病毒M蛋白有3个疏水性结构域。同时构建了pET28a-CCV-M表达质粒。     

猪传染性胃肠炎病毒适应细胞试验

猪传染性胃肠炎已在国内流行多年,许多单位试图用细胞培养方法分离其病原,但截止目前很少获得成功。本试验为了使猪传染性胃肠炎病毒适应于细胞,参照有关文献将病毒及细胞分别用不同方法处理后进行适应细胞。现将试验情况及结果介绍如下。     

用细胞培养分离猪传染性胃肠炎病毒并和美国两个参考毒株的比较

多年来在加拿大曾观察到数量较多的猪传染性胃肠炎(CET)的临床病例,这些材料,特别是有关流行病学和小猪试验感染的材料是很有意义的。本研究报告是用猪细胞培养分离出的病毒来肯定临床病例,并将分离的毒株同美国的两株参考毒作了比较。     

类冠状病毒CV_(777)引起仔猪实验性肠道感染

同猪腹泻有关的病毒,主要是冠状病毒科的传染性胃肠炎(TGE)病毒和猪轮状病毒。这两种病毒在小肠绒毛上皮细胞的细胞质中进行复制,以后随着上皮细胞的破坏和脱落,导致绒毛缺损。由于病毒复制引起细胞形态和功能的改变而发生腹泻,尤以乳猪为甚。脱水可引起死亡,TGE更是如此。     

猪传染性胃肠炎病毒S基因主要抗原位点A和D的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

为建立一种检测猪传染性胃肠炎病毒血清抗体的间接ELISA,将猪传染性胃肠炎病毒S基因主要抗原位点A和D克隆到pET-28a(+)载体中,在大肠杆菌Rosetta(DE3)pLysS中进行表达。表达产物的分子质量为38ku,表达形式为包涵体。通过Western-blot证实,表达产物与猪传染性胃肠炎病毒多克隆抗体能够特异性结合。将重组蛋白经过8mol/L的尿素溶解后,作为间接ELISA的包被抗原,通过优化条件初步建立了检测猪传染性胃肠炎病毒血清抗体的间接ELISA。该方法与纯化的猪传染性胃肠炎病毒包被的间接ELISA相比,符合率达到91.53%。本研究结果对大规模地推广应用猪传染性胃肠炎间接ELISA诊断方法具有重要意义。     

反向遗传技术及其在猪传染性胃肠炎病毒研究中的应用

对反向遗传学技术及其在RNA病毒研究中的应用进行了综述。论述了猪传染性胃肠炎病毒反向遗传技术的发展现状,并对该技术在猪传染性胃肠炎病毒的基因功能、致病机理、基因工程疫苗研究中的应用及前景等方面进行了探讨。     

某些未分类病毒所引起的疾病

近年来,在兽医病毒学方面由于广泛应用电镜观察和现代免疫学方法,取得了显著进展。在引起动物腹泻的病毒研究中,先后发现了主要定殖于消化道的冠状病毒(含抗原不同能分别引起猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻的病毒)、轮状病毒、萼状病毒和星状病毒,以及定殖于消化道和别的器官的粘膜病病毒、腺病毒、肠道病毒和细小病毒。据S.B.Mohanty氏等的意见,因为有的是新分离的病毒,有的缺乏易感实验动物或实验手段,有的是作过分类但后来又否定了等原因,目前尚未分类或分类不合适的病毒有星状病毒(Astro Virus)、博尔纳病毒(Borna Virus)、痒病病原因子(Scrapic agent)、马尔堡病毒(Marburg Virus)和传染性腔上囊病病毒(Infectious bursal disease Virus/IBDV)。这些病毒有的已在国内发现如IBDV),有的尚待进一步探索,现分别叙述于下。     

猪流行性腹泻病毒间接ELISA检测方法的建立

为建立快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的血清学方法,本研究以原核表达的猪流行性腹泻病毒AH2012株N蛋白为包被抗原,通过条件优化建立了一种快速的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法。利用该ELISA检测猪流行性腹泻病毒血清时为阳性,而与猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、口蹄疫病毒,猪圆环病毒2型、猪呼吸道冠状病毒的阳性血清均无交叉反应;批内和批间重复性试验的变异系数均小于5.55%;该方法与中和试验检测结果总符合率为88.75%。本研究建立的方法可以应用于我国猪流行性腹泻病毒的诊断、流行病监测以及疫苗研发时抗体水平的检测,为该病的防控提供一种有效的检测工具。     

猪水泡病病毒与B5型科赛奇病毒的血清学关系

猪水泡病最近在英国的流行使得人们的注意力集中在其病毒的特性上。这种病毒属于小核糖核酸病毒的肠道病毒亚类中,在意大利1966年第一次流行中分离的毒株与后来于1971年在香港和1972年在英国分离的毒株都有血清学上的关系。作者在本文中报告猪的这种肠道病毒与人的一种肠道病毒的关系,并且推测这种病毒可能是由人传于猪的。 猪水泡病病毒能使新生小白鼠致死。这是肠道病毒中的科赛奇病毒的特性。因此曾试验