联邦德国DNA指纹图谱鉴定的现状

自一九八五年英国遗传学家 A.TJeffferys 等首次报道了利用 DNA 重组技术直接分析人类基因组中 DNA 顺序上的变化,将人体 DNA 小卫星区酶解长度片段多态性的分析应用于法医生物学的亲权鉴定上以来,唤起了人们在解决司法实践中的民刑事案件因提出证据困难性问题的极大希望。尽管从那时起英国就允许 DNA 指纹图谱作为证据使用,但在联邦德国由于旷日持久的专利审理程序及专利人不合适的市场策略等原因,阻碍了探针的使用推广与发     

-20℃保存对胎儿组织DNA指纹图检验的影响

在实际办案过程中，常遇到需要对冷冻保存一段时间的胎儿组织进行鉴定。如强奸致孕案，一时找不到嫌疑人，将检材冷冻保存。正确地选择适当的组织提取DNA，是做好DNA指纹图的前提。本文通过对在-20℃保存条件下的引产胎儿不同组织，分别于1、3、7、14、24、52、70、120天取材，提取DNA，观察DNA量变化，并对保存1天和120天的组织中提取的DNA，以HinfI酶切后制作的DNA指纹图进行比较，企望提示冷冻保存一段时间后能获得较理想DNA指纹图的组织。材料与方法引产胎儿取自送检的一起强奸致孕案的检材。于当天取其皮肤、脑、肌肉。肾、…     

DNA技术在法医学上的应用(续)

<正> 四、DNA指纹用于个体识别因DNA具有高度多态性,因此不同个体DNA指纹图各不相同,可以进行个体识别。下面以Jeffreys的33.15DNA探针做DNA指纹图为例,说明DNA指纹图的个体识别作用。取20名随机个体DNA,以HinfI消化,Southern印迹后与33.15探针杂交,得每个人DNA指纹图。然后做相邻两个体指纹图比较,将20个个体图中区带数全部算出,取平均值、并计算标准差。然后根据相邻个体共存区带数,求出等位基     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅰ)

应用 MYO DNA 探针对中国人进行了 DNA 遗传指纹图检验。从两个家系16人及100个无关个体中取肘静脉血提取 DNA,用限制性内切酶 HinfⅠ或 HaeⅢ水解,1%琼脂糖凝胶电泳分离,经 Southern印迹转移,MYO DNA 探针杂交,获得了清晰可辨的 DNA 指纹图谱。结果每个个体在3.0Kb 以上均能检出10条以上杂交区带,个体间的相关概率<4×10~(-9),由杂交区带构成的图谱是个体特异的,杂交区带遵循孟德尔的显性遗传方式由亲代向子代遗传;具有 DNA Fingerprints 的特点。对两起亲子鉴定的案例进行指纹图检验,孩子所存在的杂交区带,除来自母亲外,其余可在嫌疑父亲带中找到,肯定了孩子与嫌疑人的父子关系。MYO DNA 探针在亲子鉴定与个人识别的法医学鉴定中有着重要的实用价值。     

甲醛固定组织的DNA提取

在法医物证检验中，分子量大于23kb的DNA分子可以直接作出指纹图谱，部分降解的DNA分子可以通过PCR扩增进行检验。但对甲醛处理的组织，用上述提取方法，只能得到已严重降解的小分子DNA，并由于甲醛溶液的影响，无法进行VNTR－PCR检验。因此，如何从甲醛处理的各种组织中提取大分子DNA是一个迫切需要解决的问题。本文摸索出从甲醛处理的组织中提取大分子DNA的方法。同时研究了固定时间对提取DNA质量的影响，找到了适合DNA释放的最佳PK酶解条件，包括离子强度、反应体系、酶解时间、温度等。材料与方法1．组织的处理取自同一个…     

湖北省建立“DNA数据库”的可行性研究

湖北省公安厅于1993年着手筹建DNA实验室,并于1995年正式将DNA指纹图、PCR技术应用于实际办案.1998年通过了《DNA指纹图在刑事科学技术中的应用研究》课题鉴定.迄今为止,利用DNA技术共检验各类案件300余起,认定了各类人员200余人,刑事案件的侦破、民事纠纷的调解提供了坚实的科学依据,取得了一定的社会效益和经济效益.     

JL-02多位点探针DNA指纹的法医学应用研究

以自制的JL－02探针进行了DNA指纹分析，对北京地区无关个体进行了调查，计算出任意两无关个体的偶合机率为6．6×10－15；家系分析表明，谱带在亲代与子代间的传递符合孟德尔遗传规律；同一个体不同组织的DNA指纹图相同；混合斑精子DNA指纹图与相应男性血液DNA指纹图完全相同；该探针对0．5μg的基因组DNA杂交，可获得清晰可辩的DNA指纹图。证明了新探针适用于法医物证检验中的个人同一认定及亲子鉴定。     

法庭DNA技术的发展及展望

1 法庭DNA技术的现状 DNA技术自1985年应用于法庭鉴定以来,发展极为迅速,得到了广泛应用。已经由最初的以长度(RFLP)为基础的DNA指纹分型技术(DNA Fingerprinting)发展到如今的扩增片段长度多态性检测(PCR-VNTR,PCR-STR)及DNA序列变异测定等。其中应用比较普遍的几项法庭DNA鉴定技术分别为DNA指纹图技术、PCR扩增技术、DNA测序技术。     

根据Y-染色体特异DNA序列鉴定牙齿性别

人类牙齿的性别鉴定,是法医学个体识别中的一个重要部分。作者们应用限制性内切酶 HaeⅢ、Sau3A 水解60颗牙髓 DNA,琼脂糖凝胶电泳分离酶解片段,在紫外灯下直接观察。根据 Y-染色体特异 DNA 序列,3.4kb 长片段的有无,判断牙齿的性别。为牙齿性别的法医学鉴定提供了一种简单、准确的新方法。     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅱ)——应用‘Myo’小卫星探针进行血斑、精斑、个体组织的个体认定

应用‘Myo’小卫星 DNA 探针,Southern 印迹杂交技术,对血斑、精斑、同一个体不同组织进行 DNA 指纹图分析,均获得清晰的图谱。同一个体的血斑与血液、精斑与精液以及不同的组织其 DNA 指纹图谱完全相同。可以根据斑痕或组织与嫌疑个体的血液或某一组织 DNA 的指纹图谱比对以做出同一认定。50μl 血液量的血斑、5μl 精液量的精斑可以获得清晰易辨的指纹图谱。五年的精斑、两年的血斑亦可做出与同源个体新鲜精液、血液完全一致的 DNA 指纹图谱。对杀人、强奸杀人、碎尸等不同案件的血痕、精斑、不同组织碎块进行了 DNA 指纹图检验,均做出了正确的个体认定。本方法的应用为我国法医物证检验提供了新的分析手段,使个体认定得以实现。     

微型DNA指纹图的研究与应用

作者采用小板琼脂糖凝胶电泳,应用MYO探针,Southern印迹杂交技术制作微型DNA指纹图,能获得清晰图谱。实验结果表明,同一个体的血液与血斑,精液与精斑及不同部位的组织,其指纹图谱完全相同。不同个体的微型DNA指纹图谱有明显个体差异。用本法能使大板DNA指纹图的常规检出量重复15～20次,最小检出量为250ng,达到极微量的水平。     

PCR-RFLP分析线粒体DNA细胞色素b基因用于法医学种属鉴定

目的建立一种PCR-RFLP分析线粒体DNAcyt b基因用于法医学种属鉴定的方法。方法采用一对通用引物扩增人及15种常见动物的线粒体DNAcyt b基因,扩增产物经内切酶Alu I酶切,分析不同动物DNA扩增产物的有无以及酶切前后的变化。结果所检动物中有9种DNA有扩增产物,经内切酶Alu I酶切后,除鳝鱼外都能与人类DNA相区别。结论PCR-RFLP分析线粒体DNAcyt b基因方法简单,结果可靠,是一种较好的法医学种属鉴定方法。     

妊娠40天胎儿绒毛组织亲子鉴定一例

用酚、氯仿萃取法提取怀孕40天流产胎儿绒毛组织的DNA，PCR扩增pMCT118、ApoB、P33．6、Amelogedn基因座特异片段及DNA指纹图检验鉴定亲权关系获得成功，现报告如下：亲权鉴定对于怀孕数月的胎儿，利用DNA技术检验分析已不是难题。但对于早孕（40余天）流产胎儿做DNA检验鉴定尚有一定难度。本室参照国内有关报导和研究，利用DNA技术对怀孕40余天的胎儿绒毛组织进行检验分析。并得出了准确的结果。这对于DNA技术的推广应用，解决早期妊娠的检验鉴定，及时有效地打击犯罪，为司法审判提供科学的证据都具有相当的实用价值。材料与…     

HinfⅠ和HaeⅢ酶解条件对DNA指纹图的影响

用辣根过氧化物酶标记α-珠蛋白-3’－HVR探针检测同一个体的DNA，其所产生的DNA指纹图谱带随着酶解条件的变化而发生改变。由于谱带的改变，给亲子关系的同一认定带来了困难，尤其是多位点探针的检测。为了了解Hinfl和Hae皿两种酶在不同酶解时间和不同酶量的条件下对DNA指纹图谱带的影响，本文作者利用多位点探针a一珠蛋白一3’－HVR和单位点探针MSS进行检测VNTR图谱的实验。材料与方法一、材料1．无关个体血液样品取自平时破案中所剩检材；2．琼服糖（美国signla公司产）；3．Hinfl和HaeI（美国premagem公司）4．非同位素标记…     

腐败尸体不同组织的DNA扩增效果

<正> 在法医实际检案工作中,经常需对腐败尸体进行DNA鉴定。提取腐败尸体组织进行DNA检验所需的检材,不同检验技术要求不尽相同。为提高腐败检材检出效率,本文作者对从高度腐败尸体上提取的软骨、指甲、肌肉、头皮、血液等进行DNA的提取、荧光标记STR复合扩增技术进行扩增分型,并比较分析了扩增效果,现报道如下。     

AmpF STR SGM试剂盒应用评价

短串联重复序列（ STR）是一类广泛分布于人类基因组中的多态性 DNA,由于检测方便,检材适应性广,多态性较高, STR近年来正逐渐取代血清学和 DNA指纹图,越来越多地应用于亲权鉴定中 [1]。但是对 STR在亲权鉴定中的应用价值的评价,多数是通过调查群体的等位基因频率资料,计算非父排除率作为参考,这种评估的方法反映的是平均值,为了了解 STR在亲子鉴定中实际应用的情况,本文从实际案例出发,分析 10个 STR位点在亲权鉴定中的应用效果。     

小卫星DNA探针MZ1.3:制备、法庭案例上的应用及DNA片断图型与常规父权检验结果的比较

<正> 小卫星DNA探针MZ1.3是从人类基因库中通过筛选随机选择克隆中的超可变重复序列而分离的。详细制备方法及该选择性DNA克隆序列的细节将另行发表。自外周血细胞及尸解材料组织标本抽提的人DNA用限制性内切酶HinfI酶解,再作Southern印迹法分析。在与经~(32)P-dCTP缺口翻译的探针MZ1.3杂交后,经放射性自显影,每一个体DNA样本平     

法医DNA检验新技术

1985年DNA技术首次运用到人类个人识别方面,使法医生物物证检验技术实现了从只能排除到直接认定个人的飞跃。从此国内外法庭科学界争相研究和应用这门新技术,使之取得日新月异的进步,成为打击罪犯和解决亲权纠纷最有效的技术手段9“七五”后期,公安部物证鉴定中心DNA鉴定处（原公安部第二研究所法医分子遗传室）和辽宁省刑事科学技术研究所建立了多基因座DNA探针检测DNA指纹图方法并用于办案。但是当时我国在这一高新技术领域的总体技术水平与发达国家还有很大差距,也远不能满足大多数案件生物物证鉴定的需要,主要表现在：1．用…     

一种改良的骨组织DNA提取方法

骨组织耐腐败,当其他软组织已完全腐败后,只能用骨组织进行种属鉴定,性别鉴定和个人识别.骨组织DNA提取是骨组织DNA分析的关键.作者曾用多种方法提取过骨组织DNA,本文报道一种改良的骨组织DNA提取方法.     

混合斑中女性成分DNA检验2例

<正> 在强奸案的检验鉴定中,只要能从受害人的阴棉、内裤以及现场提取的物品上的精斑成分中鉴定出嫌疑男性的DNA,即可能为案件提供证据。但有时仅有男性DNA成分鉴定还不能完全构成强奸案的必要证据,必须同时鉴定精斑中的女性成分才能提供直接、确凿的证据。现报道两例如下。