纤维联接蛋白在法医病理学中的研究和应用前景

1984年 Morrison 等发现血浆中有一种遇冷后易凝集的蛋白,取名为冷凝蛋白(Cold-insoluble globulin CIg),后来它又有不少名称,多与其分布和功能有关。1976年Kussela 等将其命名为纤维联接蛋白(Fibro-nectin Fn)并得到了公认。Fn 是一种大分子糖蛋白,是由双股分子量各约为220,000的多肽亚单位组成。根据分布     

纤维连接蛋白与皮肤创伤的研究

纤维连接蛋白（Fihronection，Fn）是一类广泛存在于机体组织中的大分子糖蛋白。它由两个类似、但不相等、通过二硫键连接的亚基组成，分子量约45万道尔顿。可溶性的血浆型Fn分布于血浆和其它体液；不溶性的细胞（或组织）型Fn分布于细胞表面、基底膜、细胞外基质和结缔组织基质。两型Fn免疫原性相同、结构类似，可以互相转换，两者间存在着动态平衡[1]。Fn在胚胎发生、炎症、肿瘤和创伤修复的组织中含量较高，并发现它在创伤修复过程中有许多重要的作用[2、3]。一、创伤修复的过程皮肤对损伤的反应可分四个阶段，即凝血；炎症反应；肉芽…     

LSAB法检测肌动蛋白肌红蛋白纤维联接蛋白在心肌梗死中的应用

利用LSAB法，比较抗肌动蛋白单克隆抗体（HHF35）、抗肌红蛋白（Mb）和抗纤维联接蛋白（Fn）多克隆抗体在22例实际案例人心肌梗死检材中的应用效果。发现：在22例人心肌切片中，HE均能显示明显心肌梗死区，三种抗体的免疫组化都能在同区内显示心肌梗死，对于梗死心肌细胞的反应，表现为HHF35、Mb出现心肌细胞的缺染或弱染，Fn在梗死心肌细胞呈阳性特异性染色。图像分析表明：在相同视野内梗死面积所占比率为HHF35＞Fn＞Mb＞HE；在染色效果上，HHF35明显最佳。     

大鼠纤维连接蛋白的分离纯化及抗血清制备

目前，纤维连接蛋白（Fibronecrtin，简称Fn）已应用于法医学研究[1]。由于人体标本来源困难，研究Fn仍以动物为主[2]。至今为止，国内外尚无抗动物Fn血清出售，从而给Fn研究工作造成困难。因此，本实验的目的是从Wistar鼠血浆中分离纯化Fn，用以免疫家兔，制备兔抗鼠Fn血清。材料和方法一、试剂1．Sephorase－4B（pharmacia）1．gelatin-Sephorase-4B（pharmacia）3．PMSF（sigma）4兔抗人Fn血清（上海生物制品所）5．标准分子量蛋白（Bio－Rad）二、生器仪器泳Zs－4型紫外光检测器（中国军事医学p学院实验仪器厂）。2自动分步收集…     

脑源性神经营养因子前体蛋白研究进展

脑源性神经营养因子前体蛋白（pro-BDNF）是成熟型脑源性神经营养因子（mBDNF）的前体形式。最新研究表明，pro-BDNF不仅作为mBDNF的前体形式存在，还可由神经细胞分泌到胞外，发挥与mBDNF不同的生物学效应。本文综述了pro-BDNF蛋白的分子结构、在中枢神经系统的分布、受体、生理效应、分泌与调节以及pro-BDNF与长时程抑制、突触可塑性、记忆形成及毒品成瘾的相关性等方面的研究进展。     

法医学检验所用人血清蛋白抗血清研制与分析

在法医学科研与办案实践中，人血清蛋白占有很重要的位置。这是由于很多人血清蛋白具有遗传多态性，呈现出个体差异，能起到个人识别的作用，如型特异性成份（Gc）、转铁蛋白（Tf）、触珠蛋白（Hp）、α1抗胰蛋白酶（α1AT）、某些补体成份、免疫球蛋白同种异型遗传标志Gm和Km等。有的人血清蛋白在组织和体液中、正常和病态时有不同的分布或表现，因而对法医学检验及办案具有鉴定价值，如前白蛋白（PA）、α1酸性糖蛋白（α1AG）、人纤维蛋白原（Fg）、纤维结合蛋白（Fn）[1、2]、纤维蛋白溶酶原、（Pg）等。人血清蛋白的检验，抗血清…     

血浆蛋白成分的免疫组织化学研究在诊断早期心肌缺血中的应用

早期心肌缺血（Earlymyocardialischemia，EMI）的病理形态学诊断一直是法医病理学的重要课题。随着免疫组织化学（Immunohis－tochemistry，IHC）技术的迅速发展，国内外学者应用这一技术对EMI进行了大量的研究，表明IHC技术较以往使用的常规组织学染色、酶组织学染色、特殊染色、荧光显微镜和电镜技术等，具有灵敏度高、特异性强、实用性好的优点。进入并沉积于心肌细胞内的血浆蛋白成分，用IHC技术检测，诊断EMI，国内外学者进行了许多研究。现将有关补体、纤维联结蛋白、纤维蛋白原、白蛋白等文献综述如下。一、IHC方法检测心…     

迟发性外伤性脑内血肿脑组织GFAP、S-100和NSE的免疫组织化学研究

应用免疫组织化学ABC法和S－P法，对6例伤后1．5天至2年发生的迟发性外伤性脑内血肿（DTICH）脑组织标本进行神经胶质细胞内胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、S－100蛋白（S－100）和神经元细胞内特异性烯醇化酶（NSE）变化和应用价值的研究。尸检和组织学检查发现有脑挫伤等病变。6例DTICH脑组织挫伤及周围区均有明显的GFAP、S－100阳性的细胞变化，细胞数目增多，胞体肥大、增生，免疫组化反应产物增多、深染；神经元细胞NSE免疫组化染色均呈阴性改变。结果表明：6例DTICH脑组织中GFAP、S－100的NSE的免疫组织化学变化是有一定时间间隔的外伤性陈旧性改变，在DTICH的病理诊断上具有重要价值，可作为DTICH法医学鉴定的一个辅助手段。     

热休克蛋白的分类,基因调控及其功能

已往研究发现,所有生物体细胞在环境温度突然升高时,会发生一种非常相似的反应,最初称之为热休克反应（heash。kresPOns）,其典型表现为细胞内一组蛋白质的表达迅速增加,乃将其命名为热休克蛋白（Heatshockproteins,HSPs）。随后,人们发现热休克反应除了能被热损伤所诱导外,也能被其他因素诱导,其中包括：氨基酸类似物、各种重金属、代谢性毒物、缺血、缺氧、损伤等。目前认为各种应激因子引起的热休克反应更确切地应称为应激反应（stressresronse）,是一种以基因表达和调控方面变化为主的细胞应激反应,热休克蛋白应称为应激…     

NF-kB在神经元变性中的作用

<正> 细胞核因子kB(Nudear Factor—kB,NF—kB)是1986年由Sen和Baltimore首先描述,是一种B细胞核因子,可与免疫球蛋白的轻链(k链)增强子结合并具有结构性转录激活活性,故命名为细胞核因子或称k基因核因子。随着研究的进一步深入,发现NF-kB是一类普遍存在的细胞转录因子,在其它细胞中也有表达[1]。它调控着编码细胞因子、生长因子、细胞粘附分子和一些在健康和疾病状态下的急性蛋白因子。     

人血浆Fn的纯化、抗体制备及法医学应用的研究

本文用Gelatin－Senharose4B亲合层析法提纯人血浆Fn抗原，免疫家兔，收集抗血清，经过去Fn血浆制成的免疫固相吸附剂处理后，制备特异性抗人Fn血清。此抗血清1：200稀释，用于免疫组化PAP、DAB染色法，观察人头皮枪弹创、头皮挫裂创、腹部皮肤切创各4例创缘区Fn含量、分布变化的研究，能反映创线区Fn变化的规律，为法医学创伤的研究，进一步开展定量分析和定量测定，作了抗体准备。     

应用PAP法检测成人皮肤切创纤维连接蛋白推断损伤时间

应用PAP法，对15例成人腹部不同时间组（2小时以内）手术切创皮肤进行研究，观察Fn的分布、含量变化及其与损伤时间的关系；同时作H．E和Masson三色染色对比观察。结果发现：创伤即刻，创壁仅有少量Fn阳性颗粒；15分钟后，创壁表面Fn含量增多，呈薄层、断续的细条状；以后，随着时间延长，创壁表面Fn含量逐渐增多，呈连续细带状；至2小时，创伤局部Fn含量明显增多，创壁表面Fn是较宽带状，创壁内Fn亦增多，并是浓度梯度改变。PAP法检测Fn，可为鉴别生前与死后损伤、推断早期损伤时间，提供新的手段。     

FAK—ERK的研究进展及其法医学应用价值

细胞内黏着斑激酶（focal adhesion kinase，FAK）和细胞外信号调节蛋白激酶（extracellular signal—regulated protein kinase，ERK）均是重要的信号转导分子，二者在信号从表面受体转导至细胞核过程中起到关键作用。当受到细胞外刺激时，FAK被激活而发生磷酸化，磷酸化的FAK激活下游的ERK，通过ERK改变细胞行为。这样，FAK-ERK信号传导因子就参与了细胞增殖、分化、应激、凋亡和恶变等多种生物学反应。本文对FAK—ERK的生物学特性以及其在组织损伤中作用的研究进展作一综述，以期为组织损伤时间推断的法医学研究提供更为有效的方法。     

星形胶质细胞及其标志蛋白GFAP在脑损伤时间推断中的研究进展

推断脑损伤时间是法医学需要解决的重要问题之一。中枢神经系统受到损伤后，损伤部位常由星形胶质细胞进行修复，并通过增生形成胶质瘢痕。在此过程中，星形胶质细胞的形态、数目、胞内酶、胶质原纤维酸性蛋白（GlialFibrillalyAcidichaein，GFAP）的量及其基因表达均会发生改变。此外，星形胶质细胞分泌一系列细胞因子（包括神经营养因子），并表达其受体。这些改变均与伤后时间过程有关，有可能用于推断脑损伤时间。互星形胶质细胞的形态、分类及功能中枢神经系统中有多种间质细胞，被统称为神经胶质细胞（Nde），其数量多（为神经元…     

血浆蛋白的LSAB检测在青壮年猝死综合征的应用

用免疫组织化学LSAB法观察9例青壮年摔死综合征（SMDS）心传导系统组织及心肌细胞内血浆蛋白Al、Fn的改变，并以冠心病和非心脏病死亡者之心脏标本作对照。结果：SMDS组，8例Al阳性染色，7例Fn阳性染色；冠心病组，7例Al、Fn均呈阳性染色；非心脏病组心肌细胞内Al、Fn均呈阴性，而部分血管壁、结缔组织则呈阳性。提示部分SMDS病例有早期心肌缺血、心肌梗死的病理改变，其死亡原因应属心性猝死范畴。     

应用ELISA测定成人皮肤切创纤维连接蛋白

应用双抗体夹心酶联免疫吸附剂测定法（ELISA），定量研究了12例成人腹部2小时以内手术切创皮肤可检测的Fn。实验批内变异系数＜5％，批间变异系数＜10％，检测Fn浓度范围3．91～1000ng／ml。结果：成人腹部每克皮肤可检测Fn含量为7．5920±1．7364μg（M±SD）；随着损伤时间延长，不同时间段创伤局部皮肤Fn的含量逐渐升高；各不同时间段与损伤即刻皮肤Fn含量的差值和损伤时间之间存在直线相关（r=0．9843）。经方差分析处理，发现创伤局部皮肤Fn含量在损伤经历30分钟后，有显著增加。本此结果可为推断切创形成的时间提供参考数据。     

远离电击部位电流通路上骨骼肌的病理学研究

研究电损伤时骨骼肌中肌红蛋白(Mb)和纤维连接蛋白(Fn)的异常分布情况。采用大鼠模型和人体电击死标本,对电流通路上骨骼肌组织进行肌红蛋白、纤维连接蛋白免疫组化(LSAB)检测。结果显示:电流通路上肌细胞呈现深浅不同竹节样改变,免疫组化法见Mb脱失,Fn呈阳性,呈蟒蛇状纹理。电流通路上骨骼肌竹节样和蟒蛇纹理改变对无典型电流斑法医学鉴定有实用价值。     

胶质细胞源性神经营养因子与缺血缺氧脑损害研究进展

1993年 ,Lin等[1] 从鼠胶质细胞系B49中分离出一种能有效促进多巴胺神经元摄取多巴胺的因子 ,命名为胶质细胞源性神经营养因子 (Glialcellline derivedneurotrophicfactor ,GDNF)。自GDNF被发现以来 ,学者们对它进行了大量深入的研究 ,本文作者就近年来对GDNF的研究情况作一综述 ,并探讨其在法医学中的应用前景。1　GDNF的分子结构与基因1997年 ,Eigenbrot和Gerber报道了大鼠GDNF的晶体结构 ,与TGFβ 2十分相似 ,含有TGF β超家族的 7个保守半胱氨酸残基 ,其成熟多肽链结构中的 7个保守半胱氨酸 ,分别由 41和 10 2、 68和 13 1…     

纤维连接蛋白mRNA可变剪接及其影响因素

纤维连接蛋白（fibronectin,FN）是一种广泛存在于细胞外基质、血浆及其他体液中的高分子糖蛋白,自1948年Motrison首次发现以来,对FN蛋白水平的研究方兴未艾,并于七、八十年代达到高潮。国内外法医界已将FN蛋白水平的变化应用于生前死后伤及创伤时间推断。1983年Knornblihtt等通过人Hs578T细胞RNA的提取获得了FNCDNA[1],拉开了FN基因研究的序幕;此后,先后发现了FNmRNA前体（pre－mRNA）可在两个不同位点上剪接而形成多种异型体[2-4];1987年Schwarzbauer与Zardi又先后在大鼠和人FN基因中发现第三个剪接位点[5,6],FN…     

肿瘤坏死因子的研究进展

自E·A·Carswell等（1975）提出“肿瘤坏死因子”（TumorNecrosisFactor，TNF）这个概念以来，人们对十NF的结构、组成及作用等进行了广泛的研究。现已知道，TNF是一种具有多种生物学活性的细胞因子（Cytokine）。根据其来源不同可分为两大类：一类是由巨噬细胞产生的TNF－a（恶液素）；另一类是由激活淋巴细胞产生的TNF卡（淋巴毒素）。它们在肿瘤治疗、病毒防御、免疫调节和炎症反应等方面具有广阔研究前景。一、TNF的研究历史TNF的研究可追溯到IOO多年前。当时发现，有些肿瘤患者在伴有细菌感染时，可导致肿瘤的自发消退。…