常染色体InDel基因座判定疑难单亲鉴定1例

<正>1案例资料1.1案例来源王某,28岁,要求对其与女儿进行亲权鉴定。1.2检验方法DNA提取采用常规Chelex-100法提取基因组DNA。STR分型采用Goldeneye?20A试剂盒、AGCU EX22试剂盒及AGCU 21+1试剂盒在AB公司9700型PCR仪扩增,进行常染色体的STR分型检测,采用Investigator DIPplex kit(Qiagen,     

MiniFiler及Yfiler试剂盒无创产前亲子鉴定的可能性探究

目的采用Mini Filer~(TM)及YFiler~(TM)试剂盒对孕妇血浆进行STR分型,评估上述试剂盒进行无创产前亲子鉴定的可行性。方法采用Mini Filer~(TM)及YFiler~(TM)试剂盒,对2例成人男性的全血及血浆进行STR分型,评估血浆检材的分型准确率及适用性;对8组已知亲子关系的孕妇家系(4组非父,4组亲父,均为男胎样本)采用Mini Filer~(TM)及YFiler~(TM)试剂盒进行STR分型,对STR分型图谱直接观察,总结归纳孕妇血浆STR图谱的特征,探讨进行无创产前亲子鉴定的可行性。结果血浆检材的STR分型结果与全血STR分型结果 100%一致,且等位基因峰高接近,表明血浆是一类可以进行STR分型的检材;观察8组孕妇血浆检材的STR分型图谱,可获得2~5个可用(含胎儿STR信息)Mini-STR位点,1~8个可用Y-STR位点,且在位点充足的情况下(6个),肯定父权家系可计算累计父权指数达192 653,否定父权家系中有3~7个位点支持否定父权。结论采用Mini Filer~(TM)及Yfiler~(TM)试剂盒对孕妇血浆进行STR分型,存在进行无创产前亲子鉴定的可能性。     

两个X-STR基因座变异亲子鉴定1例

1案例资料 1.1 简要案情及DNA分型检验 因申报户口,需要鉴定某男与1名女孩是否存在亲生血缘关系.采集某男、女孩以及其生母的末梢血液.用Chelex-100法提取DNA,采用Identifiler试剂盒(AB公司)进行15个常染色体STR基因座检测,并使用Investigator Argus X-12试剂盒(QIAGEN公司)进行12个X-STR基因座检测.实验操作按照使用说明书进行,在ABI 9700型基因扩增仪进行复合扩增,产物在ABI 3130基因分析仪上进行毛细管电泳,分别采用LIZ 500及BT0 550分子量标准为内标,用GeneMapper ID v3.2软件进行基因分型.     

STR基因座中检出三带型等位基因3例CSCD

目前,国内外进行亲子鉴定主要采用短串联重复序列(STR)分型方法。常用STR分型试剂盒中的STR基因座多为四核苷酸或五核苷酸重复序列的基因座。正常情况下,常染色体上的单个STR基因座纯合子个体的分型图谱表现为只有1条带或1个峰.     

X-STR分型在特殊二联体亲子鉴定中的应用1例

1 案例 1.1简要案情 两名男子委托本鉴定所对他们与1名女孩是否存在亲生血缘关系进行鉴定. 1.2检验过程 本鉴定所采集3人指血,Chelex-100法提取DNA,采用PowerPlex(R) 21系统(美国Promega公司)检测20个常染色体STR基因座以及1个性别基因座,采用Investigator Argus X-12试剂盒(德国QIAGEN公司)检测12个X-STR基因座,以上扩增均在9700型基因扩增仪(美国AB公司)上完成,扩增体系和条件均按照使用说明书操作,扩增产物在3130遗传分析仪(美国AB公司)上进行毛细管电泳,用GeneMapper ID v3.2软件进行基因分型.     

D18S51基因座等位基因丢失3例

正随着STR试剂盒的应用越来越普遍,在过去几年内研究人员做了大量的引物一致性研究,使用不同STR试剂盒,在某个基因座会出现不同分型结果~([1])。本鉴定所在采用GoldenEye~(TM) 20A试剂盒(由北京基点认知技术有限公司生产)和PowerPlex~?21试剂盒(由美国Promega公司生产)进行亲子鉴定过程中,发现了3个案例两种类型D18S51基因座等位基因丢失情况。     

MiniFiler试剂盒进行微量细胞STR分型可行性探讨

目的探讨采用MiniFiler试剂盒进行微量细胞STR分型的可行性。方法利用显微操作法捕获微量口腔上皮细胞,采用MiniFiler试剂盒进行STR复合扩增,ABI 3130遗传分析仪检测STR分型。结果10个口腔上皮细胞能够获得稳定的STR分型;1、3、5个口腔上皮细胞能够获得完整的STR分型,但存在随机性。结论微量细胞进行STR分型具有不稳定性,目前还难以在实际检案中应用,但可以通过增加模板量来提高分型的成功率。     

基于二代测序的24个STR基因座序列多态性

目的对95名中国汉族无关个体的24个STR基因座序列多态性进行调查。方法采用Thermo Fisher公司25重早期测试试剂盒进行STR基因座复合扩增,应用HID-Ion AmpliSeq~(TM)文库试剂盒进行文库构建,使用Ion PGM~(TM)基因测序仪进行测序反应,对Ion Torrent Suite~(TM) v4.6软件显示的STR基因分型结果分析评估,使用PowerStats分析软件计算法庭科学参数,并与STR长度多态性的参数进行比较。结果 24个STR基因座共观察到252个不同重复序列的等位基因。其中,12个STR基因座具有相同长度的不同等位基因核心序列,其累计随机匹配概率为3.5×10~(-15),其累计非父排除率达0.999 998 2。序列多态与长度多态STR的累计随机匹配概率相差两个数量级。结论针对调查的中国汉族人群,本文24个序列多态STR基因座具有较好的个体识别能力,该数据为法医STR基因座序列多态性研究提供很好的参考。     

亲缘关系鉴定1例

1 案件简介 某年3月，某市发现一具未知名男尸．被张某（男）和王某夫妇二人前来认尸，怀疑死者为其儿子张某某。为此提取死者肋骨（1号）．张某（2号）和王某（3号）血样．对死者、张某、王某进行DNA检验，采用ID plus试剂盒（AB公司）扩增检测，三者STR分型见表1。     

STR基因座中检出三带型等位基因3例

<正>目前,国内外进行亲子鉴定主要采用短串联重复序列(STR)分型方法。常用STR分型试剂盒中的STR基因座多为四核苷酸或五核苷酸重复序列的基因座。正常情况下,常染色体上的单个STR基因座纯合子个体的分型图谱表现为只有1条带或1个峰,杂合子个体的分型图谱表现为2条带或2个     

Identifiler体系单基因排除的三联体亲权1例

1案例王某,男,33岁,1999年与前妻张某离婚,婚生子判由王某抚养。后王某再婚,但三年来一直没有生育,去医院检查得知自己生育能力极低,遂怀疑前妻所生之子不是自己亲生,来我处申请进行亲子鉴定。2检验分别抽取王某、张某与其子的静脉血各0.1mL,EDTA抗凝。用Chelex-100法提取上述血样的DNA,用ABI公司IdentifilerKit荧光标记复合扩增试剂盒扩增,ABI310型基因分析仪对扩增产物进行检测,Genotyperv2.5.2软件进行基因分型,所得STR基因型结果见表1。由表1可见在所检测的15个STR基因座中仅有D16S539位点孩子与王某不符合遗传关系。遂采用…     

AmpF(l)STR(R) Identifiler(R) Plus试剂盒快速直接PCR扩增初探

目的 探索可应用于法医实践的快速直接PCR扩增方法,以缩短扩增时间,提高STR分型速率.方法 联合运用AmpF(l)STR(R) Identifiler(R) Plus试剂盒与TaKaRa快速PCR检测试剂构建快速直接PCR体系,以FTA血卡为模板,采用优化后的扩增程序在快速PCR仪上进行扩增,分型结果与常规直接扩增方法相比较.结果 AmpF(l)fSTR(R) Identifiler(R) Plus试剂盒与TaKaRa的快速PCR检测试剂针对血卡的联合扩增,所得STR分型结果与常规方法一致,扩增用时由常规直接扩增所需的175 min缩短为55 min.结论 采用快速直接PCR方法进行扩增,可得到与常规直接扩增一致的DNA分型,扩增时间明显缩短,DNA分型速率大幅提高.     

不同商品化试剂盒STR分型异常的2例分析

<正>近年来,随着STR技术在法庭科学的广泛应用,各家公司均纷纷推出各种STR荧光标记复合扩增试剂盒,在使用不同试剂盒过程中出现分型差异的现象也越来越引起法庭工作者的重视。本文对日常检案中采用不同的试剂盒遇到的STR基因座分型差异的样本,进行克隆测序,对基因座分型差异的成因进行分析探究,现报告如下。1材料和方法1.1样本2份血滤纸样本,均为本实验室日常积累。1.2 STR分型方法     

不同分型方法的STR分型差异

目的调查不同的STR分型系统之间分型的一致性。方法 10 0例不同个体的DNA样本分别用单位点聚丙烯酰胺凝胶银染法和PowerPlex16System试剂盒对 13个法医学常用STR位点进行基因分型 ,并比较两种不同分型系统间的分型结果。结果 1例样本在D8S1179位点出现了分型不一致的结果 :银染法的基因型为 12 / 14 ,而用PowerPlex16System试剂盒的分型则为 12 / 15。结论不同的STR分型系统可导致不同的基因分型     

湖南土家族人群D2S1360等12个STR基因座多态性

本研究采用 Investigator HDplex 试剂盒（德国QIAGEN公司）,对湖南200名土家族无关个体进行基因分型,获取了12个STR基因座在湖南土家族的群体遗传学数据,为该地区土家族人群的法医学应用提供基础数据,现报道如下。     

MiniFiler试剂盒运用于法医微量物证的检验

目的应用MiniFiler试剂盒对法医微量物证进行DNA分析。方法采用MiniFiler试剂盒对样本进行DNA分型,确定样本9个STR基因座的等位基因型。结果10pg DNA模板经MiniFiler试剂盒扩增后,能够进行DNA分型,但40pg以上的DNA方可得到稳定可靠的分型结果。结论MiniFiler试剂盒可以用于法医微量物证的STR分析。     

采用STR和SNP遗传标记鉴定全同胞姐妹关系

目的 通过对常染色体和X染色体遗传标记的检测,探讨全同胞姐妹关系的鉴定策略.方法 提取姐妹个体的DNA,采用SinofileTM试剂盒检验常染色体上的15个STR基因座、采用Mentype(R) Argus X-8试剂盒和多重X染色体STR检测试剂盒检验X染色体上的17个STR基因座,同时采用TaqMan技术对11个X-SNP位点进行分型检测.结果 依据常染色体STR基因座的检测结果计算全同胞指数,不排除被检个体的同胞姐妹关系:X染色体上各个STR基因座和SNP位点均检见1～2个相同的等位基因,进一步支持被检个体的同胞姐妹关系.结论 对于全同胞姐妹关系的鉴定案例,除了检测常染色体STR基因座外,还可以从X染色体上选择多态性遗传标记进行检测,获得更多的遗传信息.     

D12S391、D6S1043在西藏藏族和四川汉族人群中的遗传多态性

<正>由美国AB公司开发的华夏PCR直接扩增试剂盒已经广泛应用于全国公安机关DNA数据库的检验工作,该试剂盒是依据中国人群的遗传信息,将Identifiler试剂盒中TPOX、TH01两个STR基因座换为D12S391、D6S1043。本实验通过使用华夏PCR直接扩增试剂盒,对西藏自治区藏族人群和四川汉族人群中1079名无关个体进行STR分型,统计了D12S391、D6S1043     

国产STR荧光复合试剂盒DNAtyper15应用结果分析

DNAtyper15是公安部第二研究所研制的STR荧光试剂盒,为检验应用该试剂盒检测样本基因分型的准确性和稳定性,本文对日常案件中的样本进行处理,在实验室内和实验室之间进行基因分型结果比较,并与PE公司Identifiler试剂盒基因分型结果一致性进行调查.     

河北汉族人群Investigator HDplex 12个STR基因座遗传多态性

本研究对中国河北地区汉族183个健康无关个体进行12个STR基因座遗传多态性调查。采用QIAamp DNA midi试剂盒提取样本DNA,用Investigator HDplex试剂盒进行扩增及检测。结果在12个STR基因座共检测出167个等位基因和637种基因型,其分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P0.05)。所调查的汉族人群12个STR基因座具有较好识别能力。