用酶标抗人精液单克隆抗体A_(10)C_6建立ELISA斑点法快速鉴定人精(液)斑

作者用过氧化物酶标记自己研制的抗人精液单克隆抗体A10C6建立了简便快速鉴定人精斑的ELISA斑点法，直接通过酶标抗体上的酶催化底物显示颜色变化，来判断结果，阳性呈灰色斑点，阴性为无色。其结果只对人精斑浸出液显示阳性斑点，对人的其他组织器官及体液均呈阴性，对动物精斑也无交叉反应，精斑浸出液稀释到1：3200倍仍呈阳性结果。     

精斑检验干扰因素的研究

目的研究精斑检验中预试验与确证试验结果的关系,以及取材时间、生活习惯对确证检验结果的干扰。方法取376例阴道拭子,用酸性磷酸酶(ACP)染色法、斑点ELISA法和抗人精PSA金标试纸法检测检测精斑。结果ACP阴性时,可检出P30、精子,性生活后精斑确证检验大部分阳性检出分布在48小时以内样本中,结果经X2检验,P<0.01,差异性显著,而不同的生活习惯对P30检测具有显著性差异。结论研究结果对精斑的检验以及检材的提取具有推广应用和指导性意义。     

用斑点ELISA方法检测p30确证人类精斑

作者建立了检测精浆特异性抗原p30的斑点ELISA试验方法,确证人类精斑。p30最小检出量为0.4ng。用该法盲测了室温存放1年的生物性斑痕180例,无一例假阳性和假阴性,证明用此法确证人类精斑的敏感性和特异性均优于传统的方法,具有操作简便、快速,检材用量小,结果准确等优点。     

分泌抗人精液特异蛋白P_(30)单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立和初步应用

作者通过杂交瘤技术建立了9株产生抗精浆特异蛋白 P_(30) 单克隆抗体的杂交瘤细胞系。它们是由 SP2/0骨髓瘤与经 P_(30) 免疫的 BALB/C 小鼠脾细胞按常规方法进行细胞融合、并经克隆化筛选得出.这些细胞株均经体外培养3个月以上能够稳定分泌抗 P_(30) 单克隆抗体。该抗体只能识别纯化的 P_(30) 和精液中的 P_(30) ;与人精液以外的其他体液和多种人体组织无交叉反应;与几种常见动物的精液和血液无交叉反应。这些 P_(30) 单克隆抗体均属 IgG 类和 IgG_1亚类。其培养上清液和腹水的抗体效价最高分别达到320和128,000。以 ELISA 法应用这些单克隆抗体能很好地鉴定精液和精斑。     

PSA试验在精斑检验中的应用探讨

目的通过比较、分析PSA实验结果,探讨PSA试验在精斑检验中的合理应用。方法对检材进行PSA试验后,通过差异裂解法获得上清及沉渣STR分型。结果经STR检测,与PSA试验结果存在不一致,其中假阳性13例,假阴性1例;上清中检出男性成分2例,男女混合9例。结论 PSA试验存在一定假阳性及假阴性率,检验经差异裂解法分离得到的上清不仅可以增加精斑检验的成功率,还可以作为补充为精斑检验带来更多有价值的信息。     

抗P30胶体金免疫试纸条灵敏度和特异性探讨

抗P30胶体金免疫试纸条(又称精斑试纸条)是利用免疫学方法和色谱层析技术对前列腺特异性抗原(PSA,又称P30)进行特异性检测的一种简便方法[1]。由于操作简单、耗时短、无需特殊设备和结果易判读等优点而被广泛用作法医学实际检案中的精斑确证试验。但在实际案件中,有时会出现精斑试纸条检测呈现阳性结果,却检测不到精子或无法扩增男性DNA的情况,为验证及比较灵敏度及特异性,本文进行了一些探讨,现报道如下。1材料和方法1.1材料精斑试纸条:购自美国E-boat Dallas公司。样品:10支阴道棉签拭子取自一周内无性生活的女性志愿者,阴道分泌液斑…     

用ELISA检测精液及精斑中精子抗原的研究

本实验应用单克隆抗人精子抗体和酶标记羊抗人精子抗体,采用ELISA方法确定精子抗原成份的存在。对10份新鲜精液,15份精斑进行了验测,其结果阳性率为100%。新鲜精液(精子数约10,000万个/ml)稀释100万倍,精斑浸出液稀释50万倍,均可出现阳性。对唾液斑、尿斑、乳汁斑、阴道斑、汗斑及输精管结扎的精液均为阴性。实验结果表明,本法检验精子抗原具有灵敏度高,特异性好的优点。     

用等电聚焦酶免疫技术检测人精液（斑）的ORM表型

作者用等电聚焦酶免疫技术从人精液(斑)中检出了 ORM 表型。10份精液的 ORM 表型分别与其配对血清表型一致。4℃存放50天的精斑全部能正确定型,室温存放的精斑100%正确分型的最长时限为30天。本研究为法医学性犯罪案件精斑个人识别提供了新手段。     

无精子精斑的STR基因型检验研究及在物证鉴定中的应用

在对强奸案的法医物证检验中,有时会遇到因行为人曾经做过输精管结扎术或行为人患无精子症,此时,行为人遗留下的精斑中无精子(精斑预试验和抗人精试验均阳性,但找不到精子),一般称为无精子精斑.对此种物证如沿用常规的精斑DNA提取方法检验,毫无结果.为了解决检案中对无精子精斑无法确定犯罪嫌疑人的问题,作者对此进行了试验研究,取得了满意的效果,并成功的应用于实际鉴定工作中.     

碘化碘钾法检验精斑150例

1 150例精斑检验结果的概况 (1)102例是案发后1个月内的斑迹,均出现多量的碘化碘钾结晶阳性反应,镜下(40×15倍)容易发现精子。 (2)23例是案发后2～3个月的斑迹,均出现多量的碘化碘钾结晶阳性反应,镜下皆发现精子。 (3)25例是用棉签蘸取被奸人尸体的阴道内液斑,在案发后1个月内进行试验,也都出现碘化碘钾结晶的阳性反应,同时发现精子。另用无精液的阴道液斑,作空白对照试验,均呈阴性结果。 2 陈旧的精斑检材和配制不同时间碘化碘钾试剂的实验情况     

D20S161和D8S384两个基因座在法医学中的应用

评估D2 0S16 1和D8S384两个基因座在法医学中的应用价值。用自制的D2 0S16 1和D8S384两个DNA分型试剂盒 ,对人血、人精液、人唾液、动物血、人血与动物血的混合检材和人血痕、人精液斑、人唾液斑、动物血痕、人血与动物血的混合斑痕检材 ,以及陈旧血痕检材进行检测分型 ,并用这两个基因座PCR引物序列与DNA数据库进行联网对比分析。自制的D2 0S16 1和D8S384两个DNA分型试剂盒能对人血、人精液、人唾液、人血与动物血的混合检材分型 ,而动物血没有PCR产物 ;自制的D2 0S16 1和D8S384两个DNA分型试剂盒能对人血痕、人精斑、人唾液斑和人血与动物血的混合斑痕检材正确分型 ,而动物血痕没有PCR产物 ;斑痕检材分型结果与对应体液检材分型结果无差异 ;5 0份陈旧血痕检材全部获得阳性分型结果。DNA数据库联网比较提示 ,D2 0S16 1和D8S384基因座引物除了能与各自的模板序列发生特异性扩增外 ,理论上不能与DNA数据库中 6 0 6 36 4种已知序列产生PCR产物。D2 0S16 1和D8S384两个基因座具有高度的种属特异性 ,抗污染能力强 ,不易受降解的影响 ,是解决法医现场生物检材个人识别和亲子鉴定的理想手段     

用胶乳凝集抑制试验鉴定人类精斑

作者用人类精浆致敏的胶乳和人初乳吸收后的抗人精液血清,采用胶乳凝集抑制试验凹玻板法盲测了180份生物性斑痕,结果表明此法确证人类精斑的敏感性,准确性均高于精子检出法,而与抗 p30血清琼脂双向扩散结果一致,且可用于混合斑的检验,具有快速、准确、简便等优点。     

ELISA检测精浆特异蛋白P_(30)鉴定人精斑

<正> 1978年美国Sensabaugh分离出精浆特异蛋白P30,并成功的制备出相应的抗P30血清。1987年我国也研制出抗人精浆特异蛋白P30血清,并应用该种抗血清建立了几种琼脂扩散和电泳方法鉴定人精斑。由于人精液中P30含量不高,平均为1.52±0.676mg/ml,鉴定微量精斑存在困难。为了更有效的提高方法的灵敏度。我们建立了鉴定微量人精斑的ELISA固相P30抗体法,现报告如下。     

鸡血清异种凝集素的应用研究

通过实验研究，证明家养鸡血清小含有“抗Ａ”、“抗Ｂ”及“抗Ｈ”三种异种凝集素。鸡血清中“Ｈ”凝集素能应用于体液班（唾液斑、精燃）Ｈ物质的检测。我们已在教学及检案实践小使用，效果良好。     

用人血清-唾液-初乳斑痕吸收免疫抗血清制备特异性抗人精液血清

本研究采用人血清-唾液-初乳混合液斑痕吸收抗人精液免疫血清,以消除抗血清的外器官特异性交叉反应。吸收后的抗人精液血清,仅和人精液及附睾和前列腺组织提取液发生反应,和人血清、唾液、初乳、阴道分泌液及尿液等5种人类体液分泌液及22种人体组织浸取液无交叉免疫反应;和8种动物精液也无交叉反应,具有良好的器官及种属特异性。获得的抗血清清亮透明,效价高。血清吸收方法简便易行,成本低,易于普及推广。     

用等电聚焦酶免疫分析法检测人类精斑GC表现型

本文用IEF结合使用过氧化物酶标记第二抗体的酶免疫分析法检测了17名键康成年男性的精液(斑)和唾液斑及10名健康成年女性的阴道分泌液中的GC表现型。结果发现17份人类精斑均可测出三种GC蛋白普通表现型。在10份阴道液中测出一份样本的GC表现型,3份样本有不甚清楚的GC带,不能定型,其他样本均无GC带。17份唾液斑未测出GC。本法的灵敏度(0.675ng)比文献报道的用过氧化物酶标记第二抗体的酶免疫分析(5.6ng)高。     

Presumptive screening of suspected semen stain in situ using cotton swabs and bromochloroindolyl phosphate to detect prostatic acid phosphatase activity

A novel approach to the presumptive screening of questioned semen stains has been developed which enables the rapid identification of stains which are devoid of semen. Questioned semen stains can be swabbed with a moist cotton swab, and the prostatic acid phosphatase (SAP) activity transferred to the swab identified through assay with 5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate (BCIP). Controlled laboratory studies revealed that the BCIP swab procedure was as sensitive as the semiquantitative SAP test currently employed in the FBI Laboratory for the presumptive screening of semen stains. A validation study of the BCIP swab procedure in parallel with the current procedure using 4305 case evidence stains indicated that the BCIP swab procedure was as effective as the current procedure in identifying those questioned stains which lack semen. The advantage of the BCIP swab procedure is that it can be performed on questioned stains in situ and thereby avoids the requirement of removing and extracting the stain before assay of SAP activity.     

应用抗人精液单克隆抗体检验混合斑中精液成份的ABH血型物质

用本文报道的方法检测了123份混合斑检材（新鲜混合斑60份，陈旧混合斑63份），对保存在一年内的混合斑中精液成份中的血型物质检出率可达100％。     

Developmental validation of RSID™-Semen: a lateral flow immunochromatographic strip test for the forensic detection of human semen

Abstract: Tests for the identification of semen commonly involve the microscopic visualization of spermatozoa or assays for the presence of seminal markers such as acid phosphatase (AP) or prostate‐specific antigen (PSA). Here, we describe the rapid stain identification kit for the identification of semen (RSID?‐Semen), a lateral flow immunochromatographic strip test that uses two antihuman semenogelin monoclonal antibodies to detect the presence of semenogelin. The RSID?‐Semen strip is specific for human semen, detecting <2.5 nL of semen, and does not cross‐react with other human or nonhuman tissues tested. RSID?‐Semen is more sensitive with certain forensic evidence samples containing mixtures of vaginal secretions and semen than either of the commercially available PSA‐based forensic semen detection tests or tests that measure AP activity that were tested in parallel. The RSID?‐Semen kit also allows sampling a fraction of a questioned stain while retaining the majority of the sample for further processing through short tandem repeat analysis.