精斑检验干扰因素的研究

目的研究精斑检验中预试验与确证试验结果的关系,以及取材时间、生活习惯对确证检验结果的干扰。方法取376例阴道拭子,用酸性磷酸酶(ACP)染色法、斑点ELISA法和抗人精PSA金标试纸法检测检测精斑。结果ACP阴性时,可检出P30、精子,性生活后精斑确证检验大部分阳性检出分布在48小时以内样本中,结果经X2检验,P<0.01,差异性显著,而不同的生活习惯对P30检测具有显著性差异。结论研究结果对精斑的检验以及检材的提取具有推广应用和指导性意义。     

性侵犯案件中对于精斑试纸条使用灵敏度以及特异性的研究

抗原胶体金免疫试纸条也就是精斑试纸条,这是一种使用色谱层析技术以及免疫学方法通过前列腺特异性抗原对特异性进行检测的办法.该办法在实际操作过程中具备简单、所耗费时间短、得出的结果容易判断以及没有特殊设备要求等诸多优势而在日常精斑确证试验中在法医学的实际检案上.在实际检测过程中,很可能会出现精子检测不到或者是男性的DNA不能进行扩增情况的发生,为对此种办法的灵敏度和特异性进行验证和比较,本文特对此课题做一探讨,相信本文能够对相关课题研究起到抛砖引玉的作用.     

NaCl溶液浓度对抗人P30胶体金检测试纸条试验的影响

抗人P30胶体金检测试纸条（简称试纸条）具有简单、快速、准确、灵敏、高度特异性及便于携带等优点，在法医实际检案中应用广泛。作者在实际检案中发现用不同浓度的NaCl溶液浸泡检材，对抗人P30胶体金检测试纸条结果有一定的影响，并针对此进行了实验观察，现将结果报告如下。     

自制与商业化抗人精液蛋白P30金标试剂条的法医学应用比较

目的　检测比较自制和商业销售的抗人精液蛋白P30 金标试剂条 ,探讨它们法医学应用的可靠性。方法　以人精液和人前列腺特异蛋白检测效价及灵敏度 ,以人阴道分泌物、人血清、人唾液和人初乳检测特异性 ,以保存不同年限的陈旧人精斑和斑痕类检材测定检验实际检材的能力。结果　自制抗人精液蛋白P30 金标试剂条效价及灵敏度与商业销售的试剂条中较好的基本相当 ,特异性则相当或好于商业试剂条 ,对非特异性测定均为阴性 ,而商业化试剂条则多有非特异性反应。结论　使用商业金标试剂条 ,要确定其是否合乎法医学检验标准与要求。     

用斑点ELISA方法检测p30确证人类精斑

作者建立了检测精浆特异性抗原p30的斑点ELISA试验方法,确证人类精斑。p30最小检出量为0.4ng。用该法盲测了室温存放1年的生物性斑痕180例,无一例假阳性和假阴性,证明用此法确证人类精斑的敏感性和特异性均优于传统的方法,具有操作简便、快速,检材用量小,结果准确等优点。     

抗人精液血清特异性的研究

确证精斑常用抗人精液血清作沉淀反应。这种抗血清特异性差,常与人类某些体液发生交叉反应,以致精斑确证试验结果不可靠,影响鉴定结果的准确性。作者用人类精子、精浆、精液与人类精浆特异性抗原p30分别免疫家兔,制备各种抗血清,用环状沉淀、琼脂双向扩散及免疫电泳等技术对这些抗血清的特异性进行了研究,报道如下。     

新型半定量精斑检测试纸条的研制及法医学应用

目的基于免疫层析技术,开发一种新型半定量精斑检测试剂条。方法采用双抗体夹心法,其中1株PSA单克隆抗体和1株羊抗小鼠IgG多克隆抗体分别包被在硝酸纤维素膜的T线(有两条线——T1和T2)和C线上;另外1株PSA单克隆抗体用彩色微球进行标记后,固定在玻璃纤维素膜上,制备成精斑检测检测卡,对其灵敏度及特异性等性能进行评估后,测试以下4个PSA内部校准品浓度(4ng/mL、40ng/mL、200ng/mL、500ng/mL),并对45份标本进行检测(其中有13份为陈旧精斑)。结果该方法的灵敏度为4ng/mL,检测的符合率为100%,检测高浓度样品(500ng/mL)时无明显的HOOK效应。能通过T1、T2线的显色情况判断检测样品的大致浓度,如当标准品浓度为4ng/mL时,仅有一条T1线及C线显色;当标准品浓度为40ng/mL时,T1、T2及C线均能显色,且T1线显色强度大于T2线;当标准品浓度为200ng/mL时,T1、T2及C线均能显色,且T2线显色强度大于T1线。结论建立了一种操作简便、灵敏度高,有良好准确性和重复性,可以有效避免HOOK效应且能对检测样品进行半定量检测的精斑试剂条检验方法。     

无精斑证据性犯罪案件其他物证DNA检验(附6例报告)

在性犯罪中最有效的取得证据的手段之一是对现场遗留的精斑及混合斑进行检验。但由于种种因素的影响 ,在实际检案中有许多性犯罪精斑检验为阴性 ,不能为性犯罪提供有力证据。笔者在性犯罪案件中注意提取与性犯罪有关的其他物证 (如血迹、唾液斑、阴毛等 ) ,通过作ＤＮＡ检验 ,为案件侦破提供了重要证据。现报告如下 :一、材料自我室自 1 997年 1月～ 1 999年 1 2月受理的ＰＣＲ检验强奸案件 6例 ,检材为血痕、唾液斑、阴道斑、组织块、带毛囊阴毛等。二、方法1 .ＤＮＡ提取 :血痕、唾液、阴道斑、组织块、带毛囊阴毛采用ｃｈｅｌｅ - 1 0 0…     

应用血膜热解离法检测体液斑ABO血型

血膜热解离法检验体液斑中的ABO型物质，具有操作简单、检验时间短、灵敏、特异性高等优点，而且与中和法相比具有节省检材的特点，在实际检验中取得了较好的效果。材料和方法一、实验材料1.已知血型的人唾液斑、精斑、阴道分泌物斑纱布各1（）份（从医院提取）；2抗A、抗B血清（淮北市公安局血清室提供）；3‘）型血痕纱布（采耳血涂在白绷带纱布上，室温保存，最长为1年）。二、实验方法（一）血膜热解离法检测体液斑ABt）血型l取ZCC长唾液斑、精斑、阴道分泌物斑纱线加入本理盐水3滴浸泡半小时或充分搅拌，取二满分别满于载被片两侧…     

试纸法检测ACP

精斑(seminal stain)是检验强奸案的常用物证,因此做好精斑检验十分重要。ACP试验以其灵敏度极高(1/2万)和简便、直观而成为基层法医物症检验人员最常用的精斑预试验方法,但其缓冲液及显色剂的配制很繁琐,并且,容易失效(4℃冰箱中的储存期为半个月左右),需经常配制,至使试剂的使用效率极低,造成药品的浪费。 笔者通过多次试验,证明定性滤纸具有吸水性强,均匀吸附电解质,易干燥等特点,可将ACP试验用试剂吸附于定性滤纸上,凉干,得到ACP试纸。现将该试纸的制作、使用方法及优点介绍如下:     

用反相杂交技术对HLA-DQA1基因分型及其应用

目的 :HLA -DQA1其因的分型研究及在实际办案中的应用。方法 :PCR结合反相杂交检测技术对HLA -DQA1基因进行分型。结果 :检见7种基因 ,24种基因型 ,获得上海地区HLA -DQA1基因的基因频率及基因型的频率分布数据。结论 :对法医学中常见的血液 (痕 )、牙齿、精斑、混合斑、人体组织等检材进行HLA -DQA1分型检测 ,其结果稳定可靠 ,为实际办案提供了科学依据     

P30试验阴性检出精子基因型1例

1案例某男怀疑其女友有外遇,自行提取女友黑色三角内裤一件送检,要求检验是否含人精斑。接案后,按照精斑检验常规,进行酸性磷酸酶(磷酸苯二钠)预试验和胶体金P30抗原检测试剂条(购自公安部物证鉴定中心)试验,结果均呈阴性,阴阳性对照结果准确。沉渣涂片,HE染色,镜下见有大量精子,透明顶体明显,大小一致,未能见明显尾部;分步消化后用硅珠法提取DNA,经荧光标记STR复合扩增技术,检出样品中15个位点的男性DNA。2讨论酸性磷酸酶(磷酸苯二钠)试验灵敏度较高,稀释20000倍的精液仍呈阳性反应;P30为前列腺特异性抗原(prostatespecificantigen P…     

人阴道分泌物中ABO(H)血型物质的存留

<正> 我们收集了50份怀孕和未怀孕妇女的无精斑阴道分泌物样品,并对它们进行了研究,以检测特异性血型物质在阴道分泌物中的存在。用吸收—抑制和吸收—洗脱方法通过反复地分析样品观察到ABO(H)血型物质在阴道分泌物斑痕中的存在。用吸收—抑制方法发现84％     

精斑定性检验52例回顾分析

在性犯8罪物证检验中,确认精斑存在与否是非常关键的.检验精斑的方法很多,如P30检验、抗人精血消沉淀环及琼脂糖扩散试验等,其特点各异.最近笔者以Dot-ELISA进行P30检验、抗人精血清沉淀环试验及沉渣涂片镜检精子3种不同的方法对52例性犯罪案件进行了检验并做了统计分析,报告如下1 检验方法(1)P30检验,以DO-ELIA直接法进行(HRP-P30购于公安部第二研究所)(2)沉淀环试验,所用抗人精血清效价为1:2000,分别购于公安部第二研究所及淮北市公安局(3)精子检验,沉渣涂片,用美蓝染色后直接镜检,一般可用化人精血清沉淀环试验后的沉渣涂片,不必干燥     

用酶免疫斑点法快速检测精浆特异蛋白P_(30)鉴定人精斑

作者用自制的辣根过氧化物酶标记的抗精浆特异蛋白P_(30) 单克隆抗体,建立了简便快速检测精斑中P_(30) 鉴定人精斑的斑点法。通过颜色变化判定结果,阳性为紫蓝色斑点,阴性为无色。结果表明,仅人类精斑和前列腺浸液出现阳性斑点,人体其他体液及组织器官浸液均为阴性。对动物血、精斑也无交叉反应。标定精斑稀释到1600倍亦可得到阳性结果。     

通过阴茎擦拭物上女性脱落细胞DNA检验破获强奸案

1 案例简介 犯罪嫌疑人李某在自家旅店内趁前来住店的被害人张某男朋友外出之机,将被害人强奸.案发后被害人到公安机关报案,犯罪嫌疑人拒不交代犯罪事实.技术人员提取阴道拭子和阴茎擦拭物以及犯罪嫌疑人和被害人的血纱,进行DNA检验.阴道拭子经抗P30金标试纸条检测为阴性.     

人类岩藻糖基转移酶5特异性分布及其在精细胞的表达与定位

目的研究人类岩藻糖基转移酶5(fucosyltransferase 5,FUT5)的特异性分布及在精细胞的表达与定位。方法收集健康志愿者的精液(分离精细胞并提取精细胞膜蛋白)、阴道拭子、唾液及静脉血,应用免疫印迹方法检测FUT5在人类精细胞膜、精浆、阴道液、唾液及血清中的表达量,采用免疫荧光技术检测FUT5在精细胞中的表达与定位。结果免疫印迹方法结果显示FUT5在精细胞膜及血清中有较高表达,但在精浆、阴道液及唾液中未被检测到。免疫荧光实验结果显示FUT5主要存在于精细胞头部。表明人类精细胞膜存在一定表达量的特异性FUT5,可采用抗原-抗体反应分离精液和阴道液混合斑中的精细胞。结论人类FUT5表现出分布特异性,可应用到法医学性犯罪案件中混合斑的鉴定。     

双面胶带法快速检验精斑

精液及精斑是常见的生物物证,精斑的确证主要有3大类方法:形态学检查、免疫学检验及生化分析,而形态学检查是认定精斑存在最简便、可靠的方法[1]。在实际检案中,笔者总结了一种简单实用的精子快速检出方法———双面胶带法。介绍如下:1设备与材料1.1器材双面胶带,载玻片,盖玻片,分离针,吹风机。1.2试剂染色Ⅰ液(酸性品红液):将媒染剂硫酸铝5g溶解于100ml煮沸的蒸馏水中,再加0.1g酸品红于溶液中进行搅拌,使之充分溶解。染色Ⅱ液(苦酸靛蓝胭脂红液):取靛蓝胭脂红1g,置于饱和苦味酸溶液300ml中进行溶解,过滤后使用。1%的盐酸溶液,95%乙醇溶液,…     

胶乳凝集试验及其在精斑检验中的应用

<正> 精斑检验在鉴定法医学性犯罪案件中有很重要的作用,精斑确证试验的方法主要有:形态学方法、化学方法、生物化学方法及免疫学方法。这些方法各有其优点和一定的局限性,目前仍较多地采用精子检出法和抗人精液血清琼脂双扩,而输精管结扎术者及精子缺乏症者其精斑中无精子,抗人精液血清特异性不够好便难以检出。近几年来用特异性抗-P30血清作     

10起案件陈旧微量生物检材的DNA检验分析

正作者对濮阳市1992-2002年间未破命案进行了梳理,收集了其中10起命案的生物学检材,进行STR检验,得到较理想的结果,并侦破了4起命案,现报道如下。1材料与方法1.1样本来源10起未破命案检材30份。(1)精斑类检材10份(内衣4份、阴道擦拭物4份、床单2份);(2)血痕类检材11份(木质载体2份、金属载体3份、棉纱载体6份);(3)接触类检材9份(提包1个、手表5只、