陈旧骨骼DNA提取方法的应用研究

在法医实践中,DNA检验已成为个体识别鉴定的常规技术。现场提取的检材中,骨组织具有耐腐败特性,当其他检材完全腐败后,骨组织仍能够作为DNA检验的重要材料。但陈旧尸骨骨组织中DNA含量少且高度降解,给提取DNA带来一定难度。本文采用较高温度脱钙,在磷酸盐缓冲液条件下经SDS-PK、GuSCN消化裂解骨细胞,含DNA的裂解产物经硅珠纯化,从1~16年的陈旧骨骼中提取到高质量DNA模板用于STR分型,成功率为95.5%。现将方法报告如下:1材料与方法1.1材料骨骼样本89根,来源于送检案件。其中完整长骨78根,断骨和骨片11根。现场条件有泥土掩埋、水…     

一种改良的骨组织DNA提取方法

骨组织耐腐败 ,当其他软组织已完全腐败后 ,只能用骨组织进行种属鉴定 ,性别鉴定和个人识别。骨组织ＤＮＡ提取是骨组织ＤＮＡ分析的关键。作者曾用多种方法提取过骨组织ＤＮＡ ,本文报道一种改良的骨组织ＤＮＡ提取方法。方法1 去除骨骼表面的异物及残留的腐败软组织 ,用钢锯锯开骨组织 ,锯下骨松质骨片 2ｃｍ× 2ｃｍ× 0 5ｃｍ一块。2 ＥＤＴＡ脱钙 3天 ,每日更换一次脱钙液 ,(ＥＤＴＡ脱钙液 :0 2ＭＴｉｓ溶液 1 0 0ｍｌ +ＥＤＴＡ -2Ｎａ2 1 0 ｇ,用ＮａＯＨ缓慢调整ＰＨ7 0 )。3 剪碎已脱钙的海绵状骨松质于 2只 1 5ｍｌ消毒离心…     

骨骼DNA提取方法刍议

<正> 近几年,自从 DNA 检测进入司法实践,逐步形成了稳定的检验方法如血液(痕)、精斑、毛发、组织等的检验,但是骨骼(尤其是陈旧骨骼)DNA 提取一直是实际检案的难点,在炎热潮湿季节的尸体以及开棺验尸等案件中,由于骨组织耐腐败即成为唯一的物证,这对骨骼 DNA 的提取提出了实际要求。多年来许多学者和法医工作者在这方面作过探索和实践,摸索了许多骨骼 DNA 的提取方法,如:Kurosaki 1999年将骨组织放于液氮中冷冻处理后。研成粉末状,经 EDTA 脱钙,TNE、蛋白酶消     

骨骼脱钙后DNA含量损失问题初探

骨骼是一类特殊的生物检材,是一种致密的结缔组织,相对于人体其他的组织脏器腐败降解得更慢。对高度腐败及白骨化的尸体,骨骼是进行DNA检验的唯一检材,但由于骨骼的特殊组织结构及环境因素的影响,使骨骼DNA的提取较困难。因此,为使骨组织中DNA易于释放,在提取中往往采用单独EDTA脱钙的步骤,以去除羟基磷灰石中的钙元素[1-2]。     

腐败尸体不同组织的DNA扩增效果

<正> 在法医实际检案工作中,经常需对腐败尸体进行DNA鉴定。提取腐败尸体组织进行DNA检验所需的检材,不同检验技术要求不尽相同。为提高腐败检材检出效率,本文作者对从高度腐败尸体上提取的软骨、指甲、肌肉、头皮、血液等进行DNA的提取、荧光标记STR复合扩增技术进行扩增分型,并比较分析了扩增效果,现报道如下。     

二次消化结合磁珠法提取腐败组织DNA

目的 研究二次消化结合磁珠法对3种腐败组织DNA的提取效果.方法 采用二次消化结合磁珠法对用常规磁珠法提取DNA失败的91例高度腐败尸体的软骨、指(趾)甲、关节囊组织提取DNA,QuantifilerTM试剂盒进行DNA定量,用SinofilerTM或MinifilerTM试剂盒进行STR检测分型. 结果 91例高度腐...     

亲子鉴定DNA检验结果分析1例

1案例资料 1.1简要案情 2011年6月15日,本市警方发现1具高度腐败无名男性尸体,为确定尸源,提取该无名尸体肋软骨、张某(嫌疑为其子)及母亲血样进行亲缘鉴定. 1.2 DNA检验 上述3份检材均采用Chelex-100法提取DNA.分别使用Sinofiler试剂盒、GoldenEye20A试剂盒和Y-filer试剂盒进行复合扩增,扩增产物用ABI-3130遗传分析仪进行电泳分析.     

两种DNA提取法对腐败胎盘组织STR分型结果的比较

在法医物证检验工作中.对于新鲜的人体组织检材,一般采用Chelex-100法提取DNA就可得到理想的STR分型结果,但是对于高度腐败的人体组织,单纯地依靠此法检测存在失败的可能.笔者运用两种不同的DNA提取法对高度腐败的胎盘组织进行了DNA提取,并对其STR基因座分型的检出率、DNA含量及纯度进行了比较.     

硅珠法提取骨组织DNA

骨骼是硬组织 ,抗腐蚀性好 ,当其它软组织完全腐败后 ,骨组织在鉴定中可发挥重要作用。但由于骨组织中细胞含量少[1] ,加上环境因素的影响 ,使陈旧骨骼的ＤＮＡ提取成为鉴定工作的难点[2 ] 。本文研究了骨组织ＤＮＡ的硅珠提取法 ,并将其运用于法医物证检验。1　材料与方法1 1　样本收集75例骨骼样本来自本实验室受理的刑事案件检材 (检材保存时间最久为 14年 )。1 2　试剂脱钙液 :0 2ｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ溶液 10 0ｍｌＥＤＴＡ Ｎａ2 10 ｇ ,ｐＨ 7 0 [3] 。裂解液 :12 ｇ ＧｕＳＣＮ + 10ｍｌ0 1ｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ ＨＣｌｐＨ 6 4 + 2 2…     

腐败尸体DNA提取的新方法

在法医日常检案中,对于无名尸体常需要提取并检测DNA以确定尸体身源,传统提取肋软骨的方法是开放式提取法,即用手术刀“十字”划开肋软骨相应部位的皮肤而后切取部分肋软骨,此方法效率低,对尸体有较大破坏.本文介绍一种利用穿刺针提取腐败尸体肋软骨DNA的新方法.