羔羊大肠杆菌腹泻双价基因工程菌毛苗应用的研究

对２９１只怀孕母羊皮下注射菌毛苗０．５ｍｇ／只，其局部和全身均无任何不良反应，不会造成母羊流产、早产及羔羊畸形，进一步证明该菌毛苗安全性好。应用菌毛苗主动免疫的怀羔母羊所产羔羊通过吃初孔获得被动免疫，攻毒结果，保护率均在８０％以上，证明该苗具有较强的Ｋ＿（９９）和Ｆ＿（４１）免疫原性，可使羔羊获得确实的被动免疫，对羔羊的生长发育产生良好的影响。     

牛羊大肠杆菌性腹泻及K_（99）－F_（41）基因工程菌苗免疫试验

牛羊大肠杆菌性腹泻及Ｋ_（９９）－Ｆ_（４１）基因工程菌苗免疫试验许崇波，冯书章，刘，刘晓明（解放军农牧大学军事医学研究所长春１３００１２）岑福英王玉炯孙殿和（黑龙江省八五一一农场畜牧公司）（宁夏农学院）（吉林省通榆县兽医总站）犊牛、羔羊毒素源性大肠杆...     

K_（88）K_（99）双价菌苗预防仔猪黄痢

Ｋ_（８８）Ｋ_（９９）双价菌苗预防仔猪黄痢仔猪黄痢又名初生仔猪大肠杆菌病，是常见的腹泻病之一。据１９８９年乐清市畜禽疫病普查中统计，该病发病率约占２５％，死亡率为４５％～５３％。１９９４年我站推广应用仔猪腹泻基因工程Ｋ８８Ｋ９９双价灭活菌苗，在后所、...     

猪流行性腹泻弱毒疫苗的研究

用从广州地区流行性腹泻病猪分离并适应到Ｖｅｒｏ等传代细胞的猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）Ｇ１强毒株，通过Ｖｅｒｏ、ｐＫ１５、ＳＴ细胞株的连续传代，证明第７２代毒已被致弱。用８３代毒（Ｐ８３）对吃初乳前的小猪以８～１０ｍｌ剂量口服连续传５代，每代都从接种猪小肠取样接种细胞进行培养鉴定，并于增殖后作为次代接种材料，结果５代毒均未引起小猪发病，证实该代次毒株的安全、稳定，达到了常规弱毒疫苗株要求的标准。用Ｐ８３制成弱毒疫苗，对２２头８～１０日龄小猪进行免疾效力试验，１４头口服免疫，８头颈肌注射免疫，剂量均为２ｍｌ／头。免疫后２１ｄ以最小发病量（即原毒液的１：１２稀释液）及原毒液的２倍、４倍和８倍的稀释液经口进行强毒攻击，对照组１２头也以相对剂量同时攻击。结果免疫组仅口服免疫、经大于最小强毒攻击量６倍剂量攻击组中１头（１／２）有一过性轻微腹泻，发病不到２４ｈ即恢复。对照组的１２头中有１０头典型发病，严重腹泻，并有寒颤等症状，病程长达３～６ｄ，７ｄ后腹泻症状消失，但体况明显削瘦。试验证明Ｐ８３制备的弱毒疫苗的总免疫效力达９４．６％，表明Ｐ８３已具备弱毒疫苗株的要求。     

牛O-A型口蹄疫双价灭活苗研究——小白鼠接种疫苗后的细胞免疫应答

用牛Ｏ型和Ａ型口蹄疫（ＦＭＤ）双价灭活苗免疫小白鼠后，通过四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）比色分析法检测了其病毒特异性Ｔ细胞增殖应答，相应抗原对免疫组淋巴结细胞的刺激增生作用高于未免疫对照组；通过氨基黑－１０Ｂ比色分析法检测了其致敏淋巴细胞对靶细胞的杀伤率，免疫组为１４．３％～１５．５％，未免疫组为３．２％；通过常规毛细管法检测了白细胞移动指数（ＭＩ），免疫组为０．７５和０．７０，未免疫组为１．１３。以上３项检测结果经Ｆ检验，均达到１％的显著水平，表明小白鼠接种牛Ｏ型和Ａ型ＦＭＤ双价灭活苗后，激发了病毒特异性细胞免疫应答     

中草药对犊牛腹泻治验

中草药对犊牛腹泻治验犊牛腹泻属常见病，据社旗县城郊乡３个自然村调查，１９９５年共产犊牛１１２头，发生腹泻７２头，发病率为６４％，该病多发生在１０～７０日龄，以秋、冬、春季多发。临床特征以体温升高为主，一般在３９．３～４０．５℃；呼吸粗厉，８０～１２０...     

新城疫V_4株弱毒疫苗的研究─—口服免疫剂量免疫期及保存期试验

本实验结果表明：新城疫Ｖ_４株弱毒苗的最小口服免疫剂量小于１０￣（－５）×０．５ｍｌ，Ｖ_４株弱毒冻干苗在室温（１８～３０℃）避光可保存１９个月以上；Ｖ_４株弱毒湿苗在室温（１８～３０℃）避光可保存５１天对鸡胚感染性不变；Ｖ_４株弱毒苗１次口服免疫的免疫期可达７个月以上。     

阿维菌素浇注剂对牛皮蝇第三期幼虫的驱杀效果试验

将自然感染牛皮蝇第三期幼虫的杂交牛分成５组，每组１０头，第１～４组分别用阿维菌素浇注剂（阿维必淋）０．２，０．４和０．５ｍｇ／ｋｇ体重剂量皮肤浇注给药和阿维菌素注射液０．２ｍｇ／ｋｇ体重剂量皮下注射，第５组为不治疗对照组。治疗后第７，１５，３０和４５ｄ连续检查结果，在阿维菌素浇注剂０．２ｍｇ／ｋｇ和０．４ｍｇ／ｋｇ剂量组各发现１头牛皮下有１个第三期幼虫存活，两组的驱杀率和治愈率都分别为９９．４％和９０．０％；阿维菌素浇注剂０．５ｍｇ／ｋｇ剂量组和阿维菌素注射液０．２ｍｇ／ｋｇ剂量组牛没有发现存活的第三期幼虫，驱杀率和治愈率均为１００％。     

湖南省牛的隐孢子虫病调查及小鼠感染试验

对湖南省８个县（市）的２９６头奶牛、１７７头水牛及１２头黄牛进行了隐孢子虫病的调查。发现６个县（市）的牛有隐孢子虫的感染。奶牛感染率为５．３％～２８．８％，其中某牧场１岁以下犊牛的感染率（４６．７％）高于１岁以上午（２３．９％），３、４月龄犊牛的感染率（分别为１００％和６０％）高于４月龄以上的犊牛；水牛感染率为６．６％～４０％；黄牛中未发现隐孢子虫感染。以牛粪中分离出的隐孢子虫卵囊人工感染小鼠成功，从而证实牛的隐孢子虫在同一宿主纲内不具有宿主特异性。     

成年乳牛球虫病的诊治

牛球虫病多见于犊牛，成年牛一般为隐性感染。广州某奶牛场舍饲黑白花乳牛８２０头，其中成年母牛４５５头、青年牛２３４头、犊牛１３１头。１９９７年１１月１２～２９日，该场先后有９头成年母牛发生以血便为主症的疾病。临床症状病牛体瘦弱，体温３７．５～３８．６℃...     

鸡新城疫－减蛋综合征蜂胶佐剂灭活二联苗的研究

首次用蜂胶作为佐剂，研制出鸡新城疫－减蛋综合征（ＮＤ－ＥＤＳ）二联灭活苗。在开产前１个月左右，用该苗按０．５ｍｌ／只的剂量皮下或肌肉注射免疫蛋鸡，接种后２０ｄ测ＮＤ抗体（ＨＩ法）效价为６．２５～７．０（ｌｏｇ２，下同），ＥＤＳ－７６抗体（ＨＩ法）效价为６．５～８．０。用ＮＤ－ＥＤＳ油乳剂灭活二联苗做对照，进行免疫持续期平行测定对比试验，免疫后１８０ｄ，蜂胶苗免疫组鸡的ＮＤ抗体滴度为８．５～８．７，ＥＤＳ－７６抗体滴度为８．３～８．５，与油苗免疫对照组鸡的ＮＤ抗体（８．６）和ＥＤＳ－７６抗体（８．１）效价相比，无明显差异（Ｐ＞０．０５，Ｐ＞０．０５）。用禽胚做中和试验揭示，该苗免疫半年后，其保护率仍可达９０％以上。田间试验表明该苗安全性理想；免疫４．５月ＮＤ抗体效价达９．０，ＥＤＳ－７６抗体效价为８．０     

日本血吸虫重组抗原Sj GST Paramyosin 和 Sj 23对绵羊的保护性免疫试验

１９９４～１９９５和１９９７年应用日本血吸虫３类候选疫苗分别免疫绵羊，各组的减虫率、粪便虫卵减少率和组织（肝、大肠、小肠）的虫卵减少率分别是：虫体副肌球蛋白（ｎ－ｐａｒａｍｙｏｓｉｎ）组１７．４％～５５．３％，１４．６％～６８．１％和４８．９％～７６．７％；重组副肌球蛋白（ｒ－ｐａｒａｍｙｏｓｉｎ）组４１．４％～４４．２％，１５．９％～２５．１％和４１．１％～４８．０％；Ｓｊ２６谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴ）组５３．４％～６２．１％，１１．０％～３８．６％和１４．０％～６５．０％；ｒＳｊ２８ＧＳＴ组６１．４％～６８．５％，２２．９％～６０．０％和３９．０％～７６．０％；重组日本血吸虫２３ｋｕ大亲水区表膜蛋白（ｒＳｊ２３）组５１．２％～６６．１％，２１．９％～５８．４％和５４．３％～７６．７％。以ＥＬＩＳＡ检测免疫后的绵羊血清，３类抗原均诱发高水平的特异性ＩｇＧ抗体，表明以上疫苗具有诱发绵羊产生保护性免疫的作用。     

不同日龄雏鸡对柔嫩艾美球虫早熟株卵囊的易感性及免疫力

对１,７和２５日龄鸡分别感染１０００个早熟柔嫩艾美球虫孢子化卵囊,感染１２０ｈ后,每２４ｈ收集粪便１次,进行卵囊计数,连续７ｄ,３种日龄鸡排卵囊总数分别为４６０．９,８０２．０和１４１７．７万个／只。感染后１４ｄ对１日龄和７日龄鸡的免疫组及相对应的２个不免疫对照组每只鸡攻击１００个柔嫩艾美球虫亲本株孢子化卵囊,攻毒１４４ｈ后,每２４ｈ收集粪便１次,进行卵囊计数,连续５ｄ,各组鸡的卵囊总量分别为４１．４,５．８和８９１．０,９７７．１万个／只。结果表明球虫卵囊对１日龄和７日龄雏鸡具有一定的感染力,分别占２５日龄雏鸡的３２．５％和５６．６％,与对照组相比,保护率分别为９５．４％和９９．４％。     

羊流产衣原体灭活苗后海穴注射免疫的试验研究

用羊衣原体灭活苗经后海穴注射免疫山羊，第１５大有２／４检出血清抗体，且滴度较低，至第７５天血清抗体达到高峰，一直维持到１１３天；皮下注射免疫的山羊血清抗体虽出现较早，但在后期的抗休滴度和持续时间略低于后海穴注射免疫组。对初产怀孕绵羊和山羊用灭活苗后海穴注射免疫后，在怀孕后期用羊衣原体强毒攻击，均获完全保护。田间试验中后海穴注射免疫羊１３０２０只，皮下注射免疫羊４０７８只，另设对照羊３１５１只，经一个产羔季节观察，后海穴注射免疫羊的流产率为１．６４％，皮下注射免疫羊的流产率为１．９６％，对照羊的流产率为５．２１％。后海穴免疫剂量仅为皮下免疫剂量的１／３，采用后海穴免疫途径可节省疫苗用量，降低免疫费用。     

水牛犊类圆线虫病的调查与防治

用饱和盐水漂浮法检查1850头水牛犊粪便，类圆线虫阳性率为18％。其中175头腹泻水牛犊阳性率为13.8％；检查1～10日龄犊牛56头，均为阴性；11～90日龄犊牛850头，阳性率为23％；91～161日龄犊牛450头，阳性率为17％；161～360日龄犊牛494头，阳性率为14.6％。1～3月份检查536头阳性率为17％；4～8月份检查982头，阳性率为20.5％；9～12月份检查332头，阳性率为12％。     

脑多头蚴细胞苗对犬的免疫试验

用脑多头蚴细胞系制备细胞苗，对１．５～２月龄试验犬进行免疫保护试验。试验犬共进行了两次，其间隔为２周。第二次免疫后１４～１９天进行攻虫。攻虫后８０天进行剖检；剖检结果表明，用脑多头蚴细胞苗对犬进行免疫是可行的；经免疫的大体内仅见少量不成熟的虫体或无虫，而未免疫大体内见有大量虫体。     

银黑狐空肠弯曲菌和致病性大肠埃希氏菌带菌状况的研究

对２２６只银黑狐粪便拭子进行空肠弯曲菌检查，共检出带菌狐１４只，其中成年公狐（４０只）、成年母狐（１２１只）、母仔狐（４０只）和公仔狐（２５只）分别检出３，８，２和１只，检出率依次为７．５％，６．６％，５．０％和４．０％，平均检出率为６．２％。对１８９只银黑狐粪便进行致病性大肠埃希氏菌检查，检出带菌狐３１只，其中成年公狐（１３只）、成年母狐（１２２只）、母仔狐（５１只）和公仔狐（３只），分别检出４，１８，８和１只，检出率依次为３０．８％，１４．８％，１５．７％和３３．３％，平均检出率为１６．４％；共检出致病性大肠埃希氏菌３４株，代表１５个血清型。对６９只银黑狐粪便检查，未检出Ａ～Ｆ群沙门氏菌及Ａ群Ⅰ、Ａ群Ⅱ、Ｂ群和Ｄ群的志贺氏菌。对一起３日龄仔狐死亡原因调查，证实是由肠道致病性大肠埃希氏菌Ｏ１１４Ｋ９０所致。     

牛传染性鼻气管炎灭活疫苗的安全性和免疫保护效果

将牛传染性鼻气管炎病毒分离株LN01/08株经BEI灭活,与206佐剂混合乳化制成牛传染性鼻气管炎灭活疫苗,对制备的灭活疫苗进行了安全性和免疫保护效果研究。将该疫苗分别接种1月龄犊牛、6～8月龄牛、后备母牛及不同怀孕阶段母牛,接种剂量为4mL(2头份),检验疫苗的安全性;将疫苗接种6～8月龄牛,接种剂量为2mL(1头份),首免后第21天进行二免,二免后第21天用强毒进行攻击,检验疫苗的保护效力。结果显示,不同月龄的牛及不同怀孕阶段的母牛接种疫苗后体温正常,无任何临床异常表现;怀孕牛无流产、产死胎及木乃伊胎现象。疫苗接种牛对强毒攻击的保护率达80%以上。研究表明,该疫苗对牛安全,且免疫保护效果良好。     

Vero-2和MA-104细胞系染色体组型分析与致癌─致瘤性研究——在犬五联疫苗制备中替代BHK-21细胞系细胞株的筛选和检定

在用纯化３代的猫肾原代细胞（ＦＫＣ）和犬肾原代细胞（ＣＫＣ）皮下接种裸鼠无致癌致瘤性,以人类子宫颈癌细胞系（Ｈｅｌａ）超二倍体ＫＢ株、Ｘ株及超二倍体和亚四倍体ＮＭ２０／Ｘ株皮下接种裸鼠产生进行性恶性肿瘤比率分别为１０／１０,２５／２５和５／５的前提下,非洲绿猴肾细胞系亚二倍体（Ｖｅｒｏ２）ＪＣ株５～１９代和超二倍体ＹＡ株１２～１８代分别皮下接种２０和１０只裸鼠,均未产生肿瘤,恒河猴肾细胞系亚四倍体（ＭＡ１０４）ＪＣ株４代皮下接种５只裸鼠亦未产生肿瘤。不同株的Ｈｅｌａ和地鼠肾细胞系（ＢＨＫ２１）在３．３ｇ／Ｌ琼脂中均具有抛锚独立生长特性,并在终浓度３．１２５～２００ｍｇ／ｍＬ植物凝集素（ＰＨＡ）作用下出现凝集现象,而ＦＫＣ、ＣＫＣ及Ｖｅｒｏ２细胞系ＪＣ株、ＹＡ株既不具有抛锚独立生长特性,在不同浓度ＰＨＡ作用下也不发生凝集,符合非肿瘤源性细胞的特性。因此,Ｖｅｒｏ２细胞系ＪＣ株可用作病毒疫苗毒株的传代培养,而Ｖｅｒｏ２细胞系ＹＡ株和ＭＡ１０４细胞系ＪＣ株则不适宜。     

鸡传染性法氏囊病蜂胶灭活苗的研究─—疫苗制造安全性与免疫效力试验

用分离自甘肃兰州和天水的鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）Ｌ＿２株和Ｔｓ株，以对倍的蜂胶水乳剂为佐剂，制备鸡传染性法氏囊病蜂胶灭活疫苗。用该苗０．５ｍｌ接种５日龄或７日龄雏鸡，免疫后２１天ＡＧＰ抗体阳性率可达５０％～６０％，免疫后２８天，ＡＧＰ抗体阳性率可达１００％。用该苗１ｍｌ免疫产蛋鸡，免疫后２１天ＡＧＰ卵黄抗体效价可达１：６４以上。