短串联重复vWFⅢ扩增片段长度多态性在法医学应用的可行性研究

目的探讨STR位点vWFⅢ用于法医学鉴定中的实用价值。方法应用聚合酶链式反应（PCR），聚丙烯酰胺凝胶电泳结合染银显带的分离方法对STR位点vWFⅢ扩增片断长度多态性进行研究。结果经过优化筛选掌握了该位点的最适扩增条件，其对各类检材均获得稳定可靠的扩增产物。本方法的灵敏度达10pg基因组DNA、0．5μl全血、1μl新血痕、0．1μl精液、0．2μl新鲜精斑。结论本方法快速、灵敏、准确，在法医学个人识别和亲子鉴定中具有推广应用的价值。     

STR基因座特性及其多态性

微卫星ＤＮＡ(ｍｉｎｉｓａｔｅｌｌｉｔｅＤＮＡ)或称短串联重复序列(ｓｈｏｒｔｔａｎｄｅｍｒｅｐｅａｔ,ＳＴＲ),约占人类基因组的10%。其分布均匀,重复单位长1～6ｂｐ,重复次数10～60次。ＳＴＲ基因座等位基因片段短(100～500ｂｐ),适合于陈旧及降解检材的分析,避免短片段等位基因优先扩增而造成的错误判型;易进行复合扩增,提高有限检材的利用率和检验速度。因此,ＳＴＲ基因座在法医学领域得到广泛应用。目前已发现数千个ＳＴＲ基因座,常用的有20个左右。在欧洲,至少75%的实验室用四核苷酸重复基因座,即ＴＨ01、ｖＷＡ31、Ｆ13及ＦＥＳ…     

河南地区汉族群体9个STR基因座的频率分布调查

应用ＰＣＲ技术 ,对 9个ＳＴＲ基因座分三组 (Ⅰ组 :ＣＳＦ1ＰＯ ,ＴＰＯＸ ,ＴＨ0 1;Ⅱ组Ｆ13Ａ0 1,ＦＥＳＦＰＳ ,ｖＷＡ ;Ⅲ :Ｄ16Ｓ539.Ｄ7Ｓ82 0 ,Ｄ13Ｓ317)进行复合扩增 ,对河南地区汉族 10 0例无关个体血样ＤＮＡ进行群体调查 ,得到 9个基因座的基因频率。计算出各基因座及 9个基因座综合的杂合度 (Ｈ)、多态性信息总量(ＰＩＣ)、鉴别机率 (Ｄｐ)、匹配概率 (Ｐｍ)和非父排除率 (ＰＥ) ,并在常规的办案中应用三组 9个ＳＴＲ基因座对各类案件进行检验 ,结果报告如下。1　结果与讨论9个基因座的分型结果经 χ2 检验 ,均符合Ｈａｒｄｙ…     

D1S549、D3S1754和D22S683基因座在中国成都 地区汉族群体中的遗传多态性研究

目的　为了解中国成都地区汉族群体Ｄ１Ｓ５４９ 、Ｄ３Ｓ１７５４ 和Ｄ２２Ｓ６８３ 基因座基因频率分布,获得中国成都地区汉族群体三个ＳＴＲ 基因座的群体遗传数据, 探究在法医学应用中的意义。方法　应用ＰＣＲ 扩增技术, 聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳对Ｄ１Ｓ５４９ 、Ｄ３Ｓ１７５４ 和Ｄ２２Ｓ６８３ 基因座分型。结果　１０９ 个个体中Ｄ１Ｓ５４９ 共检出９ 个等位基因, ２３ 种基因型; Ｄ３Ｓ１７５４ 共检出９ 个等位基因, １５ 种基因型; Ｄ２２Ｓ６８３共检出１０ 个等位基因, ３０ 种基因型。三个ＳＴＲ 基因座基因型频率分布总的看来符合ＨａｒｄｙＷｅｉｎｂｅｒｇ 平衡。三个ＳＴＲ基因座在中国成都地区汉族群体中的观察杂合度分别为０．７ ～０．７６ , 非父排除概率分别为０．４７１１～０．６４０４ , 个人识别机率分别为０．８６９３ ～０．９４２２ 。结论　结果显示Ｄ１Ｓ５４９ 、Ｄ３Ｓ１７５４ 和Ｄ２２Ｓ６８３基因座在群体遗传学研究和法医学个人识别中有较高的应用价值     

联合应用多个DNA位点进行尸源鉴定

目的 研究联合应用多个ＤＮＡ位点在尸源鉴定方面的应用价值。方法 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离及银染显带的方法通过对无名尸休的有关检材与可疑双亲或子女进行亲权鉴定。结果 在８０例刑事案件尸源鉴定中,３８例无名尸体采用较新鲜肌肉,通过扩增ＶＮＴＲ、ＳＴＲ多个位点得以判明尸源;２９例采用腐败肌肉、６例采用骨骼和２例采用牙齿,通过扩增多个ＳＴＲ位点判明了尸源。仅有１例采用腐败肌肉、２     

荧光标记复合扩增对中国汉族群体8个STR基因座的多态性

应用ＳＴＲ复合扩增技术对ＦＢＩ推荐的 8个ＳＴＲ基因座 ,即Ｄ5Ｓ818,Ｄ13Ｓ317,Ｄ7Ｓ82 0 ,Ｄ16Ｓ539,ｖＷＡ ,ＴＨ0 1,ＴＰＯＸ ,ＣＳＦ1ＰＯ ,进行荧光复合扩增 ,其产物经ＡＢＩ377ＸＬ序列分析仪检测 ,对 110名中国汉人无关个体进行频率调查 ,为大规模ＤＮＡ数据库的建立提供有益探索。1　材料和方法1 1　实验材料无关个体血样来自本室日常检案积累 ;扩增及检测试剂购自美国ＰＲＯＭＥＧＡ公司 ;ＡＢＩ377ＸＬ序列分析仪。1 2　实验方法〔1、2〕　1 2 1　ＤＮＡ模板的制备　 5%ｃｈｅｌｅｘ10 0 (Ｂｉｏ ｒａｄ)2 0 0ｍｌ处理 ,56℃孵…     

哈尔滨地区汉族人群3个基因座的基因频率调查

短串联重复序列(ＳＴＲ)由2～5ｂｐ的核心序列串联重复构成。ＳＴＲ广泛分布于整个基因组中,是人类重要的遗传标记系统,现已被广泛用于法医个体识别和亲权鉴定中。本文作者对哈尔滨地区160名无关个体的Ｄ16Ｓ539、Ｄ7Ｓ820、Ｄ13Ｓ317基因座进行基因频率分布调查,其结果如下1　材料与方法11　材料160名本室检案积累的无关个体血样;Ｐｒｏｍｅｇａ公司的Ｓｉｌｖｅｒｌｌ复合扩增系统试剂盒。12　方法采用酚—氯仿抽提法提取血样ＤＮＡ。ＰＣＲ复合扩增,其基因座[1、2]引物,ＰＣＲ反应在25μｌ[3]体系中进行,25μｌ10×ｂｕｆｆｅｒ(10ｍｍｏ…     

GC/NPD、GC/FID分析生物样品中的氟乙酰胺

报道了用ＧＣ／ＮＰＤ、ＧＣ／ＦＩＤ分析生物试样中的氟乙酰胺的方法。在１ｇ肝组织中加入５．０μｇ氟乙酰胺,回收率为８５．１％,ＲＳＤ为５．３９（ｎ＝７）;１ｍｌ血中加５μｇ,回收率为８５．１％,ＲＳＤ为７．１１％;在１ｇ胃组织中加入１０μｇ,回收率为８１．６％,ＲＳＤ为１０．１％（ｎ＝７）。研究的方法经动物实验和中毒案件的应用,效果较好     

GC/NPD,GC/FID分析生物品中的氟乙酰胺

报道了用ＧＣ／ＮＰＤ、ＧＣ／ＦＩＤ分析生物试样中的氟乙酰胺的方法,在１ｇ肝组织中加入５．０μｇ氟乙酰胺,回收率为８５．１％,ＲＳＤ为５．３９（ｎ＝７）;１ｍｌ血中加５μｇ,回收率为８５．１５％,ＲＳＤ为７．１１％;在１ｇ胃组织中加入１０μｇ,回收率为８１．６％,ＲＳＤ为１０．１％（ｎ＝７）。研究的方法经实验和中毒案件的应用,效果较好。     

用PCR-SSP法分析中国辽宁汉族HLA-DRB1基因多态性

应用ＰＣＲ－ＳＳＰ方法对辽宁地区１５９名无关个体进行ＨＬＡ－ＤＲＢ１位点基因分型，检出８组等位基因（扩增片段大小为１００ｂｐ），基因频率范围在０．０２２０１￣０．２３８９９，３６种可能基因型中检出３３种。经ｘ＾２检验符合Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡定律。本地区汉族群体的期望杂合度为８５％，观察杂合度为８３％，个人鉴别机率（ＤＰ）为０．９４，非父排除率（ＥＰＰ）为６６％，本法具有简单，快速，结果     

哈尔滨(地区)人群CSF1 PO-TPOX-TH01基因座的基因频率调查

参照美国Ｐｒｏｍｅｇａ公司的方法 ,复合扩增ＣＳＦ1ＰＯ、ＴＰＯＸ、ＴＨ0 1基因座 ,并对 3个基因座的基因频率分布进行调查。1　材料和方法1 1　材料血样取自哈尔滨 (地区 )人群的无关个体。采耳血制成干血纱。1 2　方法1 2 1　引物　Ｐｒｏｍｅｇａ公司的ＣＴＴ复合扩增系统试剂盒提供。1 2 2　ＤＮＡ提取　用Ｃｈｅｌｅｘ〔1〕方法提取血纱ＤＮＡ。1 2 3　ＰＣＲ复合扩增　采用ＧｅｎｅｐｒｉｎｔＳＴＲｓｙｓｔｅｍＣＴＴ试剂盒 (ＰｒｏｍｅｇａＵＳＡ ) :2 5μｌ 10×ｂｕｆｆｅｒ(10ｍｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ ＨＣｌｐＨ9 0 ,50 0ｍ…     

浙江汉族人群9个STR基因座的遗传多态性调查

利用四色荧光标记复合扩增的方法 ,在同一反应管内复合扩增Ｄ3Ｓ1358、ｖＷＡ、ＦＧＡ、Ｄ8Ｓ1179、Ｄ2 1Ｓ11、Ｄ18Ｓ51、Ｄ5Ｓ818、Ｄ13Ｓ317及Ｄ7Ｓ82 0九个ＳＴＲ基因座。扩增产物用ＡＢＩ310型基因分析仪进行毛细管电泳分离 ,自动荧光检测予以分型。经对2 0 0名浙江汉族无关个体进行群体遗传学调查 ,获得该 9个ＳＴＲ基因座的频率分布 ,以及各基因座的杂合度 (Ｈ)、个人识别能力 (ＤＰ)、偶合率 (ＰＭ)、非父排除率 (ＥＰＰ)和多态性信息总量 (ＰＩＣ)等群体遗传学参数 ,为法医学应用提供理论依据 ,现报告如下。1　材料与方法1 1　实验…     

从聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA片段直接PCR的简易方法

将聚丙烯酸胺凝胶中ＤＮＡ片段于ＰＣＲ缓冲液中电洗脱，加入ＰＣＲ反应试剂，直接扩增目的ＤＮＡ作进一步分析，ＤＮＡ片段回收效率为０．８９±０．０５，本方法简便、快速。     

从聚丙烯酰凝胶中回收DNA片段直接PCR的简易方法

将聚丙烯酰胺凝胶中ＤＮＡＳ片段于ＰＣＲ缓冲液中洗脱，加入ＰＣＲ反应试剂直接扩增目的ＤＮＡ作进一步分析，ＤＮＡ片段回收效率为０．８９±０．０５，本方法简便、快速。     

武汉地区STR FGA座位的群体分布调查

应用ＰＣＲ技术对ＳＴＲＦＧＡ座位进行多态性调查,获得中国武汉汉族人群ＦＧＡ的基因频率分布资料,检出６３个基因型及２１个等位基因,其中包括７个插入等位基因。基因型频率分布符合Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡,５１个家系调查未发现突变基因,计算ＦＧＡ座位的Ｄｐ值０．９６１２,ＰＥ值０．７００７,ＰＩＣ值０．８３３３。应用ＦＧＡ作个人识别和亲子鉴定,获得满意效果,证明ＦＧＡ是一个高信息含量遗传标记系统     

STR复合扩增技术在法医学上的应用

ＳＴＲ分型技术自在法庭科学领域应用以来 ,由于其操作简单、灵敏度高、非放射性、易于推广等特点 ,受到广大法医工作者的普遍重视。不同的ＳＴＲ基因座 ,在不同地区和不同人种中的分布频率具有很大的差异性。为了解辽南地区人群中ＳＴＲ基因座的分布频率 ,作者选择了已经商品化并被广泛应用的Ｐｒｏｍｅｇａ公司的 3个复合扩增系统共 9个基因座(Ｂｅｔａ ＴｅｓｔＳｉｌｖｅｒＳＴＲＴＭ ⅢＳｙｓｔｅｍ ;ＧｅｎｅＰｔｉｎｔＴＭ ＳＴＲＭｕｌｔｉｐｌｅｘＳｙｓｔｅｍＣＳＦ1ＰＯＴＰＯＸＴＨ0 1;ＧｅｎｅＰｒｉｎｔＴＭＳＴＲＭｕｌｔｉ…     

哈尔滨(地区)汉族人群F13A01、FESFPS、vWA基因座多态性

参照美国Ｐｒｏｍｅｇａ公司Ｇｅｎｅｐｒｉｎｔ试剂盒提供的方法 ,采用Ｆ13Ａ0 1、ＦＥＳＦＰＳ、ｖＷＡ三基因座复合扩增技术 ,对哈尔滨 (地区 )汉族人群中 16 3个无关个体的 3个基因座进行基因频率分布调查 ,现报告如下。1　结果与讨论通过对 16 3名无关个体的血样经酚、氯仿萃取法提取ＤＮＡ ,ＰＣＲ扩增 ,用标准等位基因作参照物 ,电泳分离 ,银染检测后 ,进行ＤＮＡ分型和统计学分析。Ｆ13Ａ0 1基因座观察到 4个等位基因 ,9个基因型 ;ＦＥＳＦＰＳ基因座观察到6个等位基因 ,13个基因型 ;ｖＷＡ基因座观察到 8个等位基因 ,2 3个基因型 ;…     

不同机械性损伤皮肤创缘EGFR表达的研究

对５１例人体尸检材料及４０只ＳＤ大白鼠不同损伤时间组标本进行组织内表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的酶标染色，结果发现：生前不同方式损伤类型，ＥＧＦＲ阳性染色率在不同损伤时间表达不同。刀伤、枪伤ＥＧＦＲ阳性染色率为７０．０％－８０．０％，而挫伤和索沟皮损的ＥＧＦＲ阳性染色率较低，仅为４．０％－１０．０％左右。动物实验结果提示，损伤５分钟至３０分钟；ＥＤＦＲ阳性率较低，仅为４００％，从０．５小时至２小时、阳性染色率明显提高，为６０．０％～１００．０％，我们实验还发现，ＥＧＦＲ在人体和动物死后伤均为阴性染色。故此，可用其作为法医生前和死后伤参考指标。     

STR自动荧光分析法用于强奸案中混合血痕鉴定1例

ＳＴＲ位点扩增片段长度分析法已成为法医学中生物物证检验的常用方法 ,在实际应用中发挥了巨大作用 ,目前发展起来的多个位点复合扩增结合自动荧光分析技术 ,不仅提高了检测灵敏度、准确率与信息量 ,而且可以对ＰＣＲ扩增产物进行定量分析 ,使对混合样品分析结果解释变得正确、客观、科学。本文报道该技术在一起强奸案中的应用。１案情与检验方法某年某地发生一起强奸幼女案 ,受害人阴道被撕裂出血 ,嫌疑人不知何因也有出血现象 ,现场物证为受害人内裤 ,其上有血迹。我们用Ｃｈｅｌｅｘ［１］提取法提取内裤上血痕及上皮细胞混合ＤＮＡ(现…     

广州地区汉族人群Y染色体多个STR位点的研究

为建立一套高度多态且实用性强的Ｙ－ＳＴＲｓ标记系统,本文用ＰＣＲ结合银染显色技术研究了１１１例广州汉族男性ＤＹＳ１９、ＤＹＳ３８９Ⅰ／Ⅱ、ＤＹＳ３９０等位基因及单倍型分布状况。结果显示：广州地区汉族男性ＤＹＳ１９位点有Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ａ４、Ａ５五种等位基因,出现频率分别为１８．９％、３６．０％、３６．０％、７．２％、１．８％;ＤＹＳ３８９Ⅰ位点有Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ４四种等位基因,出现频率分别为６．３％、５２．２％、１７．１％、２４．３％;ＤＹＳ３８９Ⅱ位点有Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５五种等位基因,出现频率分别为１１．７％、３８．７％、２２．５％、１７．１％、９．９％,ＤＹＳ３９０位点有Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、Ｄ５五种等位基因,出现频率分别为２．７％、９．９％、４６．８％、２７．９％、１２．６％;χ２检验表明上述各等位基因分布存在明显的地域差异。此外,还观察到７２种由上述座位共同构成的单倍型,单倍型多样性达０．９８０,表明该系统具有较强的个体识别能力