口蹄疫研究进展

口蹄疫（ＦｏｏｔａｎｄＭｏｕｔｈＤｉｓｅａｓｅ，ＦＭＤ）是致偶蹄动物的一种急性、高度接触性、发热性传染病，以传播迅速、感染率高而著称，国际兽疫局（ＯＩＥ）将其列为Ａ类传染病之首。该病病原为口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ），属于小ＲＮＡ病毒科口蹄疫病毒属。ＦＭＤ...     

马立克氏病毒单克隆抗体的制备及应用

用ＭＤ＿（１１）／７５ｃ，ＳＢ＿１，ＨＶＴ＿（ＦＣ１２６）三个马立克氏病毒株分别免疫Ｂａｌ／ｃ小鼠，获得１０株分泌抗马立克氏病毒（ＭＤＶ）单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为ＦＭ＿３、ＦＭ＿（１７）、ＦＭ＿（２４）、ＦＭ＿（２８）、ＦＭ＿（４２）、ＦＭ＿（４５）、ＦＭ＿（６２）、ＦＭ＿（５３）、ＦＭ＿（５４）、ＦＭ＿（１５９）．这些单克隆抗体都具有免疫萤光反应特性，其腹水抗体的ＦＡ效价为１０￣３～１０￣５，其中ＦＭ＿３、ＦＭ＿（４２）、ＦＭ＿（５３）、ＦＭ＿（１５９）等单抗具有ＥＬＩＳＡ特性，腹水抗体效价为１０￣３～１０￣５。ＦＭ＿（１５０）识别血清Ｉ型ＭＤＶ；ＦＭ＿３、ＦＭ＿１７识别血清Ｉ型ＭＤＶ；ＦＭ＿（５３）、ＦＭ＿（５７）识别血清Ⅲ型ＭＤＶ；ＦＭ＿（４５）识别血清Ｉ和Ⅱ型ＭＤＶ；ＦＭ＿（２４）识别血清Ⅱ型和Ⅲ型ＭＤＶ；ＦＭ＿（４２）能识别三个血清型ＭＤＶ。这些单克隆抗体可用于ＭＤ早期诊断，和疫苗质量的监测。     

应用高效液相色谱仪对口蹄疫病毒的初步分析

应用高效液相色谱仪对口蹄疫病毒的初步分析肖昭彭张强（中国农业科学院兰州兽医研究所７３００４６）魏芸（中国科学院兰州化学物理研究所口蹄疫是由口蹄疫病毒（Ｆｏｏｔａｎｄｍｏｕｔｈｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ，ＦＭＤＶ）引起偶蹄动物的一种的烈性传染病。该病在世...     

口蹄疫免疫学研究进展

口蹄疫免疫学研究进展张立昌，刘尚高（北京农业大学动物医学院１０００９４）口蹄疫（ＦＭＤ）是偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，其病原为口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）。本病传播途径多、传染性强、为多种动物共患，曾多次在世界上发生过大流行，经济损失惨重￣...     

分泌抗禽呼肠孤病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立与鉴定

采用腹腔接种和１次脾内注射禽呼肠孤病毒（ＡＲＶ）蛋白免疫小鼠，经３次融合后，共筛选出８株分泌抗禽呼肠孤病毒（单克隆抗体杂交瘤细胞株。这８株ＭｃＡｂ均可与ＡＲＶＳ１１３３株、ＦＤＯ株发生反应，而与ＩＢＤＶ，ＭＤＶ，ＥＤＳ－７６病毒不发生反应。经亚类鉴定，ＡＥ７，ＡＦ８，ＢＤ１，ＤＨ１０，ＥＥ５为ＩｇＧ１；ＡＤ６，ＣＧ４为ＩｇＧ２ａ；ＡＧ７为ＩｇＧ２ｂ。腹水效价在１０￣３～１０￣５之间。     

口蹄疫病毒的混合种

口蹄疫 (ＦＭＤ)是偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病 ,可以感染多种偶蹄家畜及野生动物 ,对畜牧业生产危害极大 ,是影响动物产品 (包括动物 )国际贸易的主要疾病之一。其病原为口蹄疫病毒 (ＦＭＤＶ) ,具有 7个血清型 ,型间互不交叉保护 ,型内各毒株间抗原变异大[1] ,这给ＦＭＤ的预防带来极大的困难。因此 ,研究ＦＭＤＶ的变异及其机理 ,对更好的预防以至消灭本病有重要意义。1　ＦＭＤＶ的分子结构及抗原性1.1　ＦＭＤＶ的分子结构　ＦＭＤＶ属于小ＲＮＡ病毒科 (Ｐｉｃｏｒ ｎａｖｉｒｄａｅ)、口蹄疫病毒属 (Ａｐｈｔｈｏｖ…     

浅谈家畜口蹄疫及其防制

口蹄疫（ＦＭＤ）是由口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）引起的牛、羊、猪等偶蹄动物以口腔粘膜及蹄部的特征性水泡病变为特征的急性流行性传染病,在一些国家零星散发或呈地方性流行,造成了巨大的经济损失。这些经济损失不仅表现在动物生产的性能方面,而且影响着国际间的动物及畜...     

反转录－聚合酶链反应检测牛食道－咽部分泌物中的口蹄疫病毒

应用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测牛食道－咽部分泌物（Ｏ－Ｐ液）中的口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）。第１组６份Ｏ－Ｐ液，采自人工感染发病牛，ＰＣＲ检测结果都是阳性；查毒试验结果５／６阳性。其中１份样品的１０－１，１０－２，１０－３和１０－３．７稀释液的ＰＣＲ检测结果也都是阳性；同样稀释的样品接种细胞，每稀释度２瓶，１０－１～１０－３都是２／２出现ＦＭＤＶ所致的细胞病变（ＣＰＥ），１０－３．７１／２出现ＣＰＥ。第２组样品是从野外采集的水牛Ｏ－Ｐ液，共５２份。ＰＣＲ检测结果９份为阳性，另７份为可疑（弱阳性）；取接种了这７份Ｏ－Ｐ液的细胞培养液（无ＣＰＥ）再作ＰＣＲ检测，结果全部是阳性。５２份Ｏ－Ｐ液样品分别接种ＩＢ－ＲＳ－２细胞培养物，并盲传３代，均未观察到典型的ＣＰＥ。研究结果表明，建立的ＲＴ－ＰＣＲ方法不仅可用于检测细胞培养物和动物组织，也适用于检测牛Ｏ－Ｐ液中的ＦＭＤＶ。该方法比目前常规的查毒试验显著的快速和灵敏     

口蹄疫病毒12S抗原免疫学性质的研究

用口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）Ａ型１２Ｓ基础免疫，Ｏ型１２Ｓ加强免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞与ＳＰ２／０细胞融合，筛迭，得到了一组群特异性单抗。用ＲＰＨＩ，ＡＧＤ，ＥＬＩＳＡ及阻断式和竞争式ＥＬＩＳＡ分析这组单抗得出以下结论：１２Ｓ抗原至少存在一个１２Ｓ独有的型间交叉的群特异性抗原表位，该表位是非中和性抗原表位，免疫原性较低；这组群特异性单抗可与ＦＭＤＶＯ，Ａ，Ｃ，Ａｓｉａ－１型１２Ｓ发生不同程度的反应，表明该表位存在于ＦＭＤＶＯ，Ａ，Ｃ，Ａｓｉａ－１型１２Ｓ上，但不同血清型的１２Ｓ表位构成存在细微的差别     

胶乳凝集试验在鸡传染性法氏囊病诊断中的应用

应用鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体（ＩＢＤＶ－ＭｃＡｂ）致敏的聚苯乙稀胶乳，建立了检测ＩＢＤＶ抗原和抗体的胶乳凝集（ＬＰＡ）和胶乳凝集抑制（ＬＰＡＩ）试验。ＬＰＡ可检测出６ｍｇ／Ｌ的ＩＢＤＶ蛋白。比较了ＬＰＡ、直接萤光抗体试验（ＤＦＡ）和琼脂扩散沉淀试验（ＡＧＰ）三种方法检测ＩＢＤＶ抗原的特异性、敏感性和相关性，明确了ＬＰＡ和ＤＦＡ的检出率高于ＡＧＰ，ＬＰＡ和ＤＦＡ检测结果的符合率为８６％。     

口蹄疫超免疫血清的制备

超免疫血清 (ｈｙｐｅｒｉｍｍｕｎｅｓｅｒｕｍ )是一种含有高效价特异性抗体的动物血清。口蹄疫 (ＦＭＤ)超免疫血清是采用口蹄疫病毒(ＦＭＤＶ)佐剂抗原作免疫原 ,通过逐次增大抗原含量多次免疫豚鼠 ,使豚鼠不断产生免疫应答 ,从而获得抗ＦＭＤＶ的高效价特异性抗体血清。该血清主要用于ＦＭＤ的中和试验、补体结合试验 ,也可用来生产诊断制剂 ,用于ＦＭＤＶ型的鉴定及易感动物的被动免疫。　　我们通过试验 ,以ＦＭＤＶ和弗氏不完全佐剂制备抗原结合物免疫豚鼠 ,定期采血 ,用补体结合试验监测抗体水平 ,使ＦＭＤ超免疫血清效价达到 1∶1…     

不同保存条件对BHK-21细胞生长及其增殖口蹄疫病毒(FMDV)的影响

不同保存条件对ＢＨＫ┐２１细胞生长及其增殖口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）的影响方玉珍张永光王永录蒋守田况乾惕（中国农业科学院兰州兽医研究所７３００４６活的敏感细胞是病毒增殖的唯一场所，也是为病毒增殖提供能量和原材料的唯一载体。因此，细胞培养技术作为组织培养的...     

口蹄疫病毒研究概况

长期以来 ,世界各国对口蹄疫 (ＦＭＤ)防制十分重视 ,进行了广泛深入的研究 ,但近年来 ,本病在一些国家和地区频繁暴发流行 ,造成了巨大经济损失。1　口蹄疫病毒和口蹄疫ＦＭＤ是由口蹄疫病毒 (ＦＭＤＶ)引起的偶蹄动物的一种急性高度传染性疫病 ,被国际兽疫局列为Ａ类动物传染病之首。易感动物包括牛、水牛、绵羊、山羊、骆驼和猪等 2 0个科的 70多种家养和野生哺乳动物。猪和牛的临床表现最严重 (也有猪发病而牛不发病 ) ,羊只表现亚临床感染。在自然状态下ＦＭＤＶ可经消化道感染 ,经呼吸道感染是最主要的传播途径 ,数个感染性病毒颗粒即…     

应用聚合酶链反应鉴别诊断马立克氏病病毒及免疫效果监测

应用３对引物建立了３套聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测体系。用该技术分别检测马立克氏病病毒（ＭＤＶ）１型、３型毒株，并能鉴别１型致癌性强毒株和非致癌性弱毒株；可从强毒感染发病鸡病变脏器和弱毒免疫的ＳＰＦ雏鸡不同时期采集的羽髓中检测到ＭＤＶ１型病毒的ＤＮＡ；可鉴别强毒发病鸡羽髓和弱毒免疫鸡羽髓。以羽髓为检测材料，应用上述ＰＣＲ技术可对ＭＤＶ１型弱毒疫苗免疫鸡群进行免疫效果监测。     

口蹄疫病毒持续性感染形成原因的探讨

口蹄疫病毒 (Ｆｏｏｔ ａｎｄ ｍｏｕｔｈｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ ,ＦＭＤＶ)是一种小ＲＮＡ病毒 ,主要引起偶蹄兽发生口蹄疫 (ＦＭＤ)。其发病特点是起病急、传播快、发病率高、病畜生产性能迅速下降等 ,给畜牧业带来严重的经济损失。因此 ,该病历来都是国际社会最为关注的传染病之一。ＦＭＤ十分顽固 ,一旦发生 ,就很难消灭 ,有的国家甚至在宣布消灭ＦＭＤ后 ,仍会再度暴发该病。研究表明 ,这可能与ＦＭＤＶ能建立持续性感染 (ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｔｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ)有关。所谓持续性感染 ,是指病毒在动物体内持续存活数月乃至多年 …     

牛O-A型口蹄疫双价灭活苗研究——小白鼠接种疫苗后的细胞免疫应答

用牛Ｏ型和Ａ型口蹄疫（ＦＭＤ）双价灭活苗免疫小白鼠后，通过四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）比色分析法检测了其病毒特异性Ｔ细胞增殖应答，相应抗原对免疫组淋巴结细胞的刺激增生作用高于未免疫对照组；通过氨基黑－１０Ｂ比色分析法检测了其致敏淋巴细胞对靶细胞的杀伤率，免疫组为１４．３％～１５．５％，未免疫组为３．２％；通过常规毛细管法检测了白细胞移动指数（ＭＩ），免疫组为０．７５和０．７０，未免疫组为１．１３。以上３项检测结果经Ｆ检验，均达到１％的显著水平，表明小白鼠接种牛Ｏ型和Ａ型ＦＭＤ双价灭活苗后，激发了病毒特异性细胞免疫应答     

应用反转录-聚合酶链反应检测动物组织中的口蹄疫病毒

应用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测了猪和牛的扁桃体、淋巴结、脊髓、肌肉和蹄冠皮肤中的口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）。与接种乳鼠测毒法比较，该方法的灵敏度达０．１６ＬＤ５０～０．３２ＬＤ５０病毒量。检测人工感染后７～３５ｄ的猪组织样品７７份，２５份为阳性；接种乳鼠并盲传３代，乳鼠－间接血凝试验（ＩＨＡ）鉴定６份为阳性。检测人工感染后４～７ｄ的牛组织样品５２份，２０份为阳性；接种乳鼠－ＩＨＡ鉴定１２份为阳性。检测野外鲜肉样品４７份，１２份为阳性；任选其中８份样品接种细胞单层，盲传至第６～７代，先后有５份样品产生ＣＰＥ；其中６份样品同时接种乳鼠，盲传至第６～７代，３组乳鼠出现ＦＭＤＶ致病症状，ＩＨＡ鉴定为阳性。检测冻猪肉样品３７份，３份为阳性；冻牛肉样品９份、冻羊肉样品１０份，均为阴性     

磷酸钙介导马立克氏病病毒DNA转染鸡胚成纤维细胞

提取马立克氏病病毒（ＭＤＶ）Ｒｉｓｐｅｎｓｅ株感染的鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）总ＤＮＡ，运用磷酸钙－ＤＮＡ沉淀转染ＣＥＦ，可以成功地得到ＭＤＶ的病变空斑。用每份沉淀含２０μｇ的ＭＤＶ和细胞总ＤＮＡ转染次代ＣＥＦ，其转染形成空斑的数量为４～２２１个，转染频率约为１０－６～１０－５；将磷酸钙－ＤＮＡ沉淀加入到ＣＥＦ中，于３７℃５％ＣＯ２培养箱中培养４ｈ后，室温下用１５％甘油休克２ｍｉｎ，由此可以提高转染频率约２０倍；转染后形成的ＭＤＶ空斑与原始感染病毒的空斑形态、生长速度一致。ＭＤＶＤＮＡ通过磷酸钙沉淀法以较高的频率转染ＣＥＦ，为研究ＭＤＶ基因组的调控、重组ＤＮＡ的表达及构建高效基因工程疫苗提供了可靠的技术手段     

用口蹄疫非结构蛋白鉴别康复动物与注射疫苗动物的研究及应用

1996年 ,Ｂｒｏｗｎ等从口蹄疫病毒 (ＦＭＤＶ)感染的组织液中发现了病毒感染相关 (ｖｉｒｕｓｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ,ＶＩＡ )抗原 ,即ＦＭＤＶ非结构蛋白 3Ｄ ,并建立了琼脂免疫扩散 (ＡＧＩＤ)试验 ,用于进出境动物检疫 ,以区分ＦＭＤＶ感染动物和注射疫苗动物。之后Ｐｉｎｔｏ等在用ＡＧＩＤ试验进一步研究注射灭活疫苗动物的ＶＩＡ抗体时发现 ,注射疫苗前和接种一次疫苗的动物血清ＶＩＡ抗体均为阴性 ,而重复接种福尔马林灭活疫苗或ＡＥＩ灭活疫苗的动物 ,其血清中都不同程度的含有ＶＩＡ抗体。这一结果对用ＡＧＩ…     

分泌抗鸡病毒性关节炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用鸡病毒性关节炎病毒（ＲｅｏＶ）免疫８ＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与ＳＰ＿２／Ｏ细胞在聚乙二醇作用下融合，用ＥＬＩＳＡ法检测和筛选，以有限稀译法克隆３次，获得４株分泌抗ＲｅｏＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞，在传代期间能稳定地分泌ＭｃＡｂ。用杂交瘤细胞注射ＥＡＬＢ／Ｃ小鼠诱生腹水，其ＥＬＩＳＡ抗体效阶达４０００～８０００，在－７０℃条件下保存半年，其抗体效价不变。特异性分析结果表明，该ＭｃＡｂ只特异地与ＲｅｏＶ发生反应，而不与ＮＤＶ、ＩＢＶ、ＩＢＤＶ发生反应。