ABO基因座限制性扩增片段长度多态性在法科学中的应用

研究ABO基因应限制性扩增片段长度多态性（AmP－RFLP）发现,该基因座在中国人群中有较高的识别能力（DP0．7146）［1］。笔者分别对血斑、混合斑、毛发、组织、唾液等生物检材及其最小量、最长检出时限、组织特异性进行ABO基因座Amp－RFLP分析,获得了令人满意的结果。1材料与方法1．1实验材料1．1．1血斑本实验室1995～1998年保存的20份血痕。1．1．2混合斑各地、市公安局送检的20份强奸案件物证检材（1995～1998）年。1．1．3头发1周内拔取不同个体的头发7份。1．1．4唾液斑本处室采取的7份唾液斑。1．1．5组织块7种同一个体不同…     

PuriTyper~(TM)法医学纯化试剂盒的性能验证

目的验证PuriTyperTM纯化试剂盒各项性能指标和法医学应用价值。方法收集及制备抗凝血液、常见案件检材(唾液、烟头、精液、毛发、指甲、骨骼及组织块)、斑痕样本(血斑、唾液斑、精斑)以及模拟添加抑制剂和模仿自然环境中放置的血斑。采用PuriTyperTM纯化试剂盒提取纯化并进行DNA定量,IdentifilerTM复合扩增试剂盒扩增,产物经ABI 3130遗传分析仪进行检测,Genemapper软件分析结果,对该试剂盒灵敏度、稳定性、重复性、检材适应性进行测试。结果采用该试剂盒提取0.1～40μL血液分别获得0.042～26.45ng/μL的DNA。3种斑痕样本DNA产量平行试验结果稳定。不同类型检材重复检验所获IPC的CT平均值在27.60至28.03之间。常见案件检材所得分型与已知结果均一致。结论 PuriTyperTM纯化试剂盒能够满足法医DNA检验的要求,对法医学实践具有重要的应用价值。     

应用血膜热解离法检测体液斑ABO血型

血膜热解离法检验体液斑中的ABO型物质，具有操作简单、检验时间短、灵敏、特异性高等优点，而且与中和法相比具有节省检材的特点，在实际检验中取得了较好的效果。材料和方法一、实验材料1.已知血型的人唾液斑、精斑、阴道分泌物斑纱布各1（）份（从医院提取）；2抗A、抗B血清（淮北市公安局血清室提供）；3‘）型血痕纱布（采耳血涂在白绷带纱布上，室温保存，最长为1年）。二、实验方法（一）血膜热解离法检测体液斑ABt）血型l取ZCC长唾液斑、精斑、阴道分泌物斑纱线加入本理盐水3滴浸泡半小时或充分搅拌，取二满分别满于载被片两侧…     

用特异兔抗人精蛋白抗体间接ELISA法检测人精斑

本文报告利用抗人精血清进一步精制而得的特异兔抗人精蛋白抗体进行间接ELISA试验检测人精斑的方法。经用61例各种常见体液斑检材及多人不同浓度的精液、唾液、乳汁、血液等体液稀释液进行测试,结果正确检出精斑的准确率达100％。对混合多人精液稀释液的最高检出稀释度为1/10000,非精斑检材均不出现阳性反应。该法的特异性完全适合精斑确证检验鉴定的需要,其灵敏度明显高于传统的精斑确证检验方法。本法操作简单,无需特殊仪器设备,使用的抗体来源方便,便于应用。     

矛盾分泌型精斑检验1例

1案情摘要1995年6月某日晚九时许，周某报称被人强奸．从周某被强奸时所穿的短裤上检出人精斑，笔者用中和法（凝集抑制试验）在斑速处检出B血型物质，确定为B血型精斑，而重大嫌疑人赵某血样呈AB型，似被排除作案可能．然而在对其唾液进行ABO血型检验时，意外发现其唾液中仅检出B型物质，未检出AH物质，与体液ABH物质分泌规律不符，表现为矛盾分泌型．其血型物质与精斑检材中血型物质一致，故不能排除其作案可能．案件经全面调查，最后确认赵某即为本强奸案的犯罪分子，且赵某对作案经过供认不讳．2讨论通常根据体液（唾液、精液等）…     

生物素掺入反向杂交法在法医学中应用的研究

建立了一套快速、准确检测人类 HLA－ DQA基因的反向杂交检测技术,可准确判定 HLA－ DQA基因位点的 6个等位基因即 0101、 0102、 0103、 0201、 0301、 0401。调查了中国北方汉族人群中 200例无关个体的 HLA－ DQA基因频率及基因型的频率分布,杂合度 (H)为 0.75,个体识别能力 (DP)为 0.928。采用生物素直接掺入 PCR扩增的方法, 1ng的 DNA样品即可准确判型。对血液、血斑、精斑、精液与阴道液的混合斑、肌肉组织等检材进行检测,效果良好。在刑事案件及亲子关系鉴定中应用,准确地判定了检材的 HLA－ DQA基因型,为侦察破案提供了科学依据。将此项技术商品化,完成了试剂盒的研制。     

应用高通量测序DNA甲基化差异体液识别研究

目的通过检测和分析DNA甲基化差异的方法识别三种法庭科学犯罪现场常见体液(唾液斑、精液斑、血液斑)细胞来源。方法利用亚硫酸氢盐法对唾液斑、精液斑、血液斑的DNA样品进行甲基化处理,对由文献[1]和实验过程中筛选得到的甲基化位点进行illumina高通量测序,检测三种体液斑中细胞DNA的甲基化程度,并通过BP神经网络分析每一个位点的甲基化程度与细胞来源的关系及全部检测位点的甲基化程度联合与细胞来源的关系。结果运用BP神经网络对35份样品的73个位点的甲基化程度进行训练和预测,可以将唾液、精液、血液三种来源的DNA样本分开,其准确率达到77.3%。其中精细胞在L81528位点中表现为高甲基化,唾液和血液表现为低甲基化,可将精细胞准确鉴别出来。结论本研究建立的高通量测序分析DNA甲基化差异的方法可通过增加检测位点和样品数量进一步提高识别体液细胞来源的准确率。     

DNA分析及其在法庭科学中的证据作用

在DNA分析技术应用于法医物证检验之前,法医物证技术只能对血液、精液、血斑、精斑、毛发、唾液斑等人体组织做有限的几种红细胞血型、酶型、血清蛋白型的检验,对血型不同的嫌疑人做出排除的结论,而血型相同时却达不到确认作案人的要求。1985年英国Leister大学遗传学部的Jeffreys首先将DNA分析技术应用于法医物证检验,为法医物证检验提供了新的检验方     

DNA的apoB位点扩增片段长度多态性的检测及其在法医学中的应用

用PCR方法对100例无关个体血样的apoB位点扩增片段进行研究,已发现有11个等位基因,片段长度分布于600～1100bp之间,基因频率为0.005～0.525,杂合度为70％。家系分析及对人体血液、血斑、精液、精斑、混合斑、带毛囊毛发及其它各种有核细胞组织的研究表明,该技术在个人识别及亲子鉴定上均能发挥重要作用。     

强奸案件物证检材的提取和保存

正在强奸案中,由于男女双方有着直接的身体接触,因此会在双方的身体及现场上留下衣物纤维、毛发、皮肤组织、血液、唾液、精液、阴道分泌物和汗液等物,上述组织和体液等构成了强奸犯罪的重要物证,由于基层客观条件所限,必须尽可能全面地予以收集,有条件的初检,妥善保存以备送检。1规范提取物证检材纤维、毛发检材脱落的纤维、毛发常存在于床上、衣物和体表(重点是阴部),必要时可借助放大镜     

VNTR-P~(33.6)基因座特殊变异1例

在近期受理的1例亲子鉴定案中,发现P33.6基因座的Amp－FI,P变异,现报道如下,供法医同仁们在实际办案中借鉴。l卖＊摘要1999年3月,某男（56岁,医生）和某女（52岁）协同“女儿”张某（女,33岁,干部）来本室做亲子鉴定。2DNA检验2．l检材可疑父亲某男（l号检材）、可疑女儿张某（2号检材）、可疑母亲某女（3号检材）各3mlEDTA抗凝静脉血。2．2DNA提取用酚、氯仿草取法分别从3份静脉血中提取DNATE溶解备检。2．3DNA检验2．3．IVNTR．PCR取l、2‘3号检材DNA样品,分别扩增pMCT“’、P3’‘、apoB三位点,扩增产物用5％T…     

DNA扩增技术用于轮奸案检材的检验

轮奸案物证检材的精斑成份往往来自多个个体，检验时相互干扰，影响环节较多。所以，对轮奸案精斑检材的提取检验及结果分析有很多问题值得探讨[1]。本文作者根据检案实践，对轮奸案件的检材搜集、DNA提取、分型等方面应注意的问题进行分析。实例资料例1．1993年1月至1994年3月，某市发生十几宗少女被轮奸系列案，其中一宗案件现场搜到18份卫生纸团。经检验，11份有人精斑。先后抓获谭某、奥莱等10名嫌疑人，疑犯均否认与案件有关。经DNA检验，其中2份卫生纸上精斑APO、DIS80、P33．6、D17530、HUMTH01、FABP等6个位点基因型均与…     

应用抗人精液单克隆抗体检验混合斑中精液成份的ABH血型物质

用本文报道的方法检测了123份混合斑检材（新鲜混合斑60份，陈旧混合斑63份），对保存在一年内的混合斑中精液成份中的血型物质检出率可达100％。     

ABO基因型检验及其法医学应用研究

目的采用ＰＣＲ技术对ＡＢＯ血型系统进行基因型检验。方法选择最佳扩增条件进行四引物复合扩增,用限制性内切酶ＫｐｎＩ和ＡｌｕＩ分别酶解扩增产物,电泳分离、银染显色法检验ＡＢＯ基因型。结果对２７０例血斑、２０例混合斑、２０根毛发（有毛囊）、１２份唾液斑等不同的生物检材进行了分型,与血清学方法检验结果相符。结论该方法能够应用于法医学的检验     

用特异兔抗人精蛋白抗体间接ELISA法检测人精斑

本文报告了利用抗人精血清进一步精制而得的特异兔抗人精蛋白抗体进行间接ELISA试验检测人精斑的方法。经用61例各种常见体液斑检材及多人不同浓度的精液、唾液、乳汁、血液等体液稀释液进行测试,正确检出精斑的准确率达100％。本法抗体来源方便,无需特殊仪器设备,操作简单,便于使用。     

法医生物检材管理存在的问题及改进办法的探讨

法医生物检材主要指与案件有关的人体血液(痕)、唾液(斑)、毛发、指甲、体液(精液、阴道斑)及各种组织及其分泌物、排泄物和某些动、植物斑迹,在实际案件工作中主要研究附着这些斑痕的载体,如:衣物、棍棒等。能使这些检材起到最大的证据作用的关键是正确的提取、科学的保存、规范的实验室操作和管理。但是国内的法医生物检材在提取、送检和保存的过程中存在许多问题,严重影响着法医物证学的发展和作为证据其法律的严肃性。笔者认为主要存在以下几方面的问题:(1)从现场提取的物证不及时预处理(如晾干等)、不及时送检,造成一些重要的生物检材…     

脱落细胞DNA检验破获系列团伙盗窃案1例

正对大部分基层实验室来说,常规生物检材DNA检验技术已经成熟,随着犯罪手段的多样化,反侦察能力的提升,现场发现血斑、精斑、唾液斑等常见生物物证的几率越来越低,要进一步发挥DNA在侦查破案中的作用就要提高对现场疑难检材的检出率。本实验室在实际工作中成功检出一枚指纹DNA分型,成功破获系列团伙盗窃案。1案例资料1.1简要案情及检材提取某年某区(县)发生1起入室盗窃案,经现场勘     

VNTR遗传标记的亲权鉴定研究

采用Amp－FLP技术研究人类血液、组织VNTR位点D1S80（pMCT118）、D17S30（pCNZ－22）和ApoB3’位点的遗传多态性，并应用于亲权鉴定案件，获得满意结果。D1S80、D17S30和ApoB3’的DP值分别为0．962、0．956和0．960，累积父权排除率（EPP）为94．51％，远远高于传统血型的DP值和EPP值，是亲权鉴定和个体识别有效方法。     

紫外线不同时间照射对血斑STR位点检验的影响

用PCR技术检验STR位点，已成为常规法医生物检验技术。随着该技术的广泛应用，防止及消除检验过程中的污染是检验成功与否的非常重要的环节犤１犦。紫外线照射是最常采用的防止及消除PCR污染的方法之一，其作用是，在相邻的嘧啶碱基之间形成环丁烷环，从而抑制了聚合酶介导的链延伸反应犤２，３犦。本文将５份血斑检材在相同条件紫外线下照射不同时间，观察紫外线对血斑STR位点检验的影响。１材料２００１年２月份收集的５份血斑检材，均匀涂于洁净滤纸上，阴干后室温保存。紫外线灯管。２方法２．１紫外线照射分别剪取适量上述１～５…     

用Chelex100法及有机溶剂提取法联合提取DNA扩增STR基因座的比较研究

为了比较不同方法提取DNA扩增STR基因座的成功率 ,本文用Chelex10 0法及Chelex10 0法联合有机溶剂提取法分别提取性犯罪案件 6份血斑及 6份混合斑中精子DNA ,并用PE公司ProfilerPlus系统复合扩增 ,ABI 310型基因分型仪检测。结果表明 ,常规采用Chelex10 0法提取血斑及精斑等生物检材DNA作STR基因座检验失败或所检测的位点较少时 ,应对Chelex10 0法提取的DNA上清液再用有机溶剂提取法提取 ,可极大提高DNA检验成功率。采用本文建立的Chelex10 0法联合有机溶剂提取法 ,提高了PCR扩增阳性率 ,对实际检案很有帮助 ;在PCR扩增前应常规进行DNA定量检验 ,否则对于重要检材应进行梯度扩增。