灵芝多糖乙酰化及其抗氧化活性研究

目的 通过化学修饰改变灵芝多糖分子结构，并研究其体内抗氧化活性。方法 乙酰化修饰灵芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharide，GLP），得到GLP乙酰化衍生物（GLP acetyl derivatives,GLPa）；将昆明种小鼠随机分成空白对照组，阳性对照组，GLP高、低剂量组及GLPa高、低剂量组，测定小鼠血清和肝脏丙二醛（malondialdehyde，MDA）、总抗氧化能力（total antioxidant capacity，T-AOC）和过氧化氢酶（catalase，CAT）；建立高脂血症大鼠抗氧化损伤模型，考察GLP及GLPa的抗氧化能力。结果 GLPa及GLP均可以显著提高正常小鼠肝组织CAT活力及T-AOC，降低小鼠血清及肝脏MDA含量，GLPa抗氧化活性明显优于GLP，且与给药剂量相关。此外，GLPa及GLP还可以显著降低四氧嘧啶致高脂大鼠的氧化损伤程度，提高其血清超氧化物歧化酶活力及肝脏T-AOC，并降低其血清MDA含量。结论 乙酰化修饰可显著提高灵芝多糖的抗氧化活性。     

灵芝多糖的生物活性研究进展

灵芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharides，GLP）存在于灵芝属真菌的菌丝体和子实体中，是灵芝的主要有效成分之一，是由肽多糖、葡聚糖、杂多糖等组成的混合物。葡聚糖中大部分为β葡聚糖，少数为α葡聚糖，而β葡聚糖是其发挥活性的主要成分。GLP药理活性广泛，具有提高机体免疫功能、抗肿瘤、消除机体内自由基、抗辐射、提高肝脏解毒功能等作用。笔拟对灵芝多糖的生物活性研究进行述评。     

灵芝孢子粉对四氯化碳致大鼠肝硬化的干预作用

目的:观察灵芝孢子粉对肝硬化大鼠脏器指数及肝组织形态的影响.方法: 80只健康SD大鼠被随机均分为4组, 即空白对照组、模型组、灵芝孢子粉低剂量组、灵芝孢子粉高剂量组.除空白对照组不做处理外,其他各组采用四氯化碳菜籽油溶液复制模型,模型复制同时灌胃给予灵芝孢子粉混悬液,连续8周后测量肝脾湿质量,取肝左叶制备切片用于苏木精-伊红染色.结果:①与空白对照组比较,模型组体质量显著降低(P＜0.05),肝湿质量、肝指数、脾指数显著增加(P＜0.05);与模型组比较,灵芝孢子粉低、高剂量组肝指数显著降低(P＜0.05).②与模型组比较,灵芝孢子粉低、高剂量组肝脏汇管区有少量纤维组织增生,但未见假小叶结构.结论:灵芝孢子粉可以抑制四氯化碳对大鼠肝纤维化的作用.     

灵芝酸治疗阿尔茨海默病作用机制的网络药理学研究

目的 利用网络药理学技术确定灵芝酸治疗阿尔茨海默病（Alzheimer''s disease，AD）的相关靶点，探讨灵芝酸治疗AD的潜在机制。方法 采用Swiss Target Prediction药物靶点预测平台预测灵芝酸的靶点，并借助Disgenet数据库、Drugbank数据库和Genecards数据库检索AD的相关靶点；将化合物靶点与疾病靶点作交集得到灵芝酸作用于AD的潜在靶点。进一步使用STRING平台构建蛋白质相互作用（protein-protein interactions，PPI）网络，并通过网络拓扑分析筛选核心靶点；Bioconducter生物信息软件包对交集靶点进行GO与KEGG功能富集分析，筛选出灵芝酸与AD关联程度较高的信号通路。最后通过细胞实验，验证其中富集程度最高的靶点，进一步明确灵芝酸作用于AD的核心靶点。结果 从数据库中共获得灵芝酸与AD靶点1 211个，其中共同靶点56个。PPI网络拓扑分析发现，AKT1、ALB、MAPK3、CASP3、TNF等是灵芝酸治疗AD的关键靶点。KEGG通路富集分析结果显示，灵芝酸治疗AD的通路涉及AD、神经变性途径、人巨噬细胞感染途径、卡波西氏肉瘤相关疱疹病毒感染途径等。细胞实验验证发现，灵芝酸A的最佳给药浓度为50 μmol/L，可以通过抑制p-PI3K和p-AKT的表达，保护受Aβ25-35毒性损伤的PC12细胞。结论 灵芝酸可能通过关键蛋白和重要通路达到靶向治疗AD的作用。     

灵芝孢子油自微乳的制备及其质量评价

目的 制备不同粒径灵芝孢子油自微乳给药系统并对其质量进行评价。方法 通过优化处方工艺制备不同粒径的灵芝孢子油自微乳,并对其外观、粒径、电位、自乳化时间、载药量以及稳定性等进行考察;采用高效液相色谱法建立灵芝孢子油自微乳的质量评价方法。结果 4种不同处方的灵芝孢子油自微乳粒径分别为（27.3±1.2）、（91.1±2.5）、（142.8±2.1）、（202.6±3.4）nm,相应的电位分别为（-12.1±0.5）、（-10.8±0.7）、（-12.3±0.6）、（-11.2±1.0）mV;高温和高强光实验显示,4组不同粒径的灵芝孢子油自微乳体系质量稳定。结论 自制的不同粒径灵芝孢子油自微乳质量稳定可控。     

华蟾素注射液抑制小鼠黑色素瘤的作用及机制研究

摘要：目的：体内实验探讨华蟾素注射液对小鼠黑色素瘤的抑制作用及其机制。方法：建立黑色素瘤B16F10 C57BL/6小鼠移植瘤模型，将造模成功的40只黑色素瘤移植瘤小鼠按随机分组原则分为四组：对照组（腹腔注射0.15 mL生理盐水）、华蟾素注射液低剂量组（腹腔注射0.15 mL，156 mg/mL）、中剂量组（腹腔注射0.15 mL，312 mg/mL）和高剂量组（腹腔注射0.15 mL，468 mg/mL）；H&E染色后观察黑色素瘤移植瘤的病理变化；免疫组织化学法观察移植瘤组织MMP-2、vimentin、MMP-9、 E-cadherin、N-cadherin、和Ki-67蛋白的表达。结果：与对照组比较，华蟾素注射液高、中、低剂量组小鼠移植瘤质量均明显降低，而小鼠体重变化无明显差异；H&E染色结果表明华蟾素注射液高、中、低剂量组黑色素瘤细胞形成的巢均减少、细胞密度均降低以及细胞体积均增大；免疫组化结果表明华蟾素注射液中、高剂量组下调了Ki-67蛋白的表达（均P<0.01）；华蟾素注射液中、高剂量组可上调黑色素瘤移植瘤中E-cadherin蛋白的表达（P<0.05）；华蟾素注射液低、中、高剂量组可显著降低N-cadherin、MMP-9蛋白的表达（均P<0.05）；华蟾素注射液中、高剂量组可显著下调MMP-2和vimentin蛋白的表达（均P<0.05）。结论：华蟾素注射液在体内具有抑制小鼠黑色素瘤的作用，其作用机制与抑制黑色素瘤EMT的发生有关。     

培补肝肾方对帕金森病模型小鼠单胺类递质的影响

目的：观察培补肝肾方对帕金森病模型小鼠脑组织单胺类神经递质的作用。方法：采用高效液相色谱．电化学检测法，测定各组小鼠脑区单胺类神经递质的含量。结果：①自然恢复组小鼠黑质、纹状体多巴胺（DA）、3，4-羟基苯乙酸（DOPAC）、去甲肾上腺素（NE）、高香草酸（HVA）、5-羟色胺（5-HT）水平均显著低于正常组、中药保护组、中药治疗组、美多芭治疗组、复合治疗组（P〈0．05或P〈0．01），中药治疗组、美多芭治疗组、复合治疗组上述指标与正常组比较，差异无显著性（P〉0．05）。②中药保护组、自然恢复组小鼠黑质3-甲氧基-4-羟基笨乙二醇（MHPG）均低于正常组、中药治疗组、美多芭治疗组、复合治疗组（P〈0．05），中药治疗组、美多芭治疗组、复合治疗组该指标与正常组比较，差异无显著性（P〉0．05）。③各组小鼠的黑质、纹状体DOPAC／DA、MHPG／NE、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）、5-HIAA/5-HT，纹状体MHPG水平差异无显著性（P〉0．05）。结论：培补肝肾方药对帕金森病小鼠模型的治疗作用可能与恢复DA耗竭，使黑质、纹状体下降的DA、DOPAC、NE、HVA、5-HT水平升高有关。     

电针对慢性不可预见性温和应激致抑郁小鼠海马氧化应激-calpain-炎症信号轴的影响

目的 基于海马氧化应激-calpain-炎症信号轴探讨电针对小鼠抑郁样行为的干预作用及机制。方法 采用慢性不可预见性温和应激方法复制小鼠抑郁模型，将24只小鼠随机分为正常组、模型组、电针组和维生素C（vitamin C，VC）组，每组6只；正常组、模型组、电针组小鼠给予0.5 mL生理盐水灌胃3周，VC组小鼠给予10 mg/kg VC注射液灌胃3周，电针组小鼠电针“百会-神门-三阴交”组穴，每日1次，每次20 min，连续干预3周，正常组、模型组和VC组小鼠不予电针干预。另有24只小鼠给予腹腔注射脂多糖复制急性抑郁模型，将24只小鼠分为正常组、模型组、钙蛋白酶抑制剂（calpeptin inhibitor，CI）组和N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine，NAC）组，每组6只；NAC组小鼠经脑定位注射3 μL NAC到侧脑室，CI组小鼠按2 mg/kg经腹腔注射CI。观察并记录小鼠体质量变化；采用蔗糖水偏好实验、旷场实验、强迫游泳实验、悬尾实验评价电针对小鼠抑郁样行为的干预效果；ELISA法检测小鼠海马组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性，丙二醛（malondialdehyde，MDA）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素（interleukin，IL）-1β、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）水平及血清皮质酮（corticosterone，CORT）水平；Western blot法检测小鼠海马组织calpain-1、超视交叉核生物钟振荡蛋白（suprachiamatic nucleus circadian oscillatory protein，SCOP）和IL-1β表达水平。结果 模型组小鼠表现出典型的抑郁样行为，小鼠体质量、糖水偏好指数显著下降（P＜0.05），强迫游泳实验和悬尾实验中小鼠静止不动时间显著增加（P＜0.05），海马组织5-HT水平显著降低（P＜0.05），血清CORT水平显著升高（P＜0.05）；模型组小鼠海马组织SOD活性显著下降（P＜0.05），MDA水平显著上升（P＜0.05），calpain-1、TNF-α、IL-1β水平显著升高（P＜0.05），SCOP水平显著下降（P＜0.05）。而经电针干预后，小鼠抑郁样行为得到显著改善（P＜0.05）；且电针干预能显著改善慢性不可预见性温和刺激诱导的小鼠海马组织的氧化损伤，下调calpain-1及炎症因子的水平（P＜0.05），并能抑制慢性不可预见性温和刺激诱导的小鼠海马组织SCOP表达水平的降低（P＜0.05）。结论 电针“百会-神门-三阴交”组穴能改善慢性不可预见性温和应激诱导的小鼠抑郁样行为，其作用机制可能与调控小鼠海马氧化应激-calpain-炎症信号轴有关。     

补肾颗粒延缓衰老作用研究

目的：研究补肾颗粒延缓衰老作用。方法：大鼠、小鼠以D—半乳糖皮下注射50d复制模型成亚急性衰老模型动物,观察灌胃给予补肾颗粒对亚急性衰老模型小鼠的耐低氧、抗疲劳、学习记忆能力的影响及对模型大鼠血清自由基指标的影响。结果：补肾颗粒可显著延长模型小鼠的耐低氧时间和游泳时间,显著延长跳台试验触电潜伏期、减少错误反应次数,显著升高模型大鼠血清超氧化物歧化酶活力水平、降低血清丙二醛含量。结论：补肾颗粒具有显著延缓衰老作用,其作用机制可能与其清除自由基有关。     

松针提取液对小鼠肝脏自由基代谢和糖代谢的影响

目的:研究松针提取液对小鼠肝脏自由基和糖代谢的影响.方法:80只昆明种小鼠随机分成安静组和训练组,两组又分设对照组和松针提取液组.服药组小鼠短期连续服用松针提取液,20天后小鼠力竭游泳造成疲劳,测定肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)等指标.结果:肝脏超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)的活性均有显著性升高,肝脏丙二醛(MDA)含量显著性降低.结论:松针提取液具有保护肝脏免受自由基损伤的功能.     

霍山石斛通过上调突触蛋白Arc表达增强衰老小鼠学习记忆的研究

目的 探讨霍山石斛对小鼠学习记忆能力减退的影响及其可能机制.方法 将33只SPF级C57BL/6小鼠随机分为模型组、早期给药组和晚期给药组,另取11只12周龄C57BL/6青年小鼠作为对照组.采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力;应用透射电子显微镜观察海马CA3区超微结构,采用免疫印迹检测海马CA3区Arc蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,模型组小鼠游泳距离显著延长(P<0.05),靶象限游泳时间明显减少(P<0.05);与模型组比较,早期给药组小鼠游泳路程显著缩短(P<0.05),靶象限游泳时间显著延长(P<0.05).透射电子显微镜显示,早期给药组和对照组小鼠海马CA3区可见较多结构清晰的线粒体,线粒体嵴排列较整齐,突触结构较清晰且较多;模型组和晚期给药组小鼠较多出现线粒体空泡化和嵴断裂或扭曲,线粒体数量和突触数量减少,突触后膜较致密.与对照组比较,模型组小鼠海马CA3区Arc表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,早期给药组小鼠CA3区Arc表达水平显著升高(P<0.05).结论 早期给予霍山石斛可以延缓或预防小鼠学习记忆能力减退,其机制可能与其上调突触蛋白Arc的表达水平进而影响海马突触结构有关.     

维药迪娜口服液对急性肝损伤小鼠的保护作用

目的 研究迪娜口服液对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法 取小鼠60只，随机分成正常组，模型组，联苯双酯组，迪娜口服液小、中、大剂量组。连续给药6 d后，采用0.15％四氯化碳腹腔注射（10 ml/kg）复制急性肝损伤模型。禁食不禁水18 h后，测定各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase，ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(aspartate transaminase，AST)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)水平，观察各组小鼠肝脏组织形态变化。结果 与模型组比较，各给药组小鼠血清中ALT和AST水平均显著降低，其中迪娜口服液中、大剂量组ALT水平显著低于联苯双酯组和迪娜口服液小剂量组 （P<0.01）。各组小鼠血清ALP水平比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。联苯双酯组和迪娜口服液小、中、大剂量组肝小叶结构破坏程度和水肿变性程度较模型组明显减轻，肝索排列较整齐。结论 迪娜口服液对四氯化碳致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用。     

肝纤康防治肝纤维化的实验研究

目的：观察肝纤康对小鼠实验性肝纤维化的防治作用及其机制。方法：采用四氯化碳（CCl4）复制小鼠肝纤维化模型，同时予以肝纤康灌胃治疗，观察小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬酸氨基转移酶（AST）、白蛋白（Alb）、肝组织羟脯氨酸（Hyp）含量及肝组织病理改变。结果：模型组小鼠ALT、AST、Hyp显升高，Alb显降低，肝纤维化病变明显；给药组ALT、AST、Hyp明显降低，Alb明显升高，与模型且比较差异有显性（P＜0．01或P＜0．05）；并能明显减轻小鼠肝细胞损害和胶原纤维增生的程度。结论：肝纤康有较好的保护肝功能和防治肝纤维化作用。     

艾灸肾俞延缓衰老的实验研究

目的：探讨艾灸延缓衰老的作用机理。方法：应用老龄小鼠模型，采用免疫和生化等实验技术，观察灸治“肾俞”穴对其自由基代谢，免疫功能和单胺类神经递质的影响，结果：艾灸能提高老龄小鼠血清和肝组织中的ＳＯＤ活性，降低ＭＤＡ水平，改善自由基代谢，能提高胸腺指数，增强脾淋巴细胞增反应和免疫功能；提高脑内５－ＨＴ，５－ＨＩＡＡ，ＮＥ，ＤＡ的含量，调整神经递质水平。上述指标中，艾灸组测值均高于老龄组，差异显著（Ｐ〉     

冷香饮的药理作用

Ｐ＜０．０１２．２通便作用小鼠４０只，随机均分为４组，按表２分组剂量ｉｇ给药后，每鼠单笼饲养，笼底垫有滤纸。观察２ｈ内每小鼠的大便总粒数、稀大便粒数及有稀大便的鼠数，结果冷香饮能明显增加小鼠排便数，大剂量使部分动物出现稀便；牛黄清心丸组的通便作用则不明显（见表２）。２．３对象兔血压及心电图的影响家兔１２只，随机均分为３组，以戊巴比妥钠３０ｍｇ／ｋｇｉｖ麻醉．按插管测压法［３］测量颈总动脉血压，同时记录Ⅱ导联心电图。结果冷香饮能明显降低家兔动脉血压，以ｉｖ给药后５ｍｉｎ血压下降最大，３０ｍｉｎ逐渐恢复到给药前水平，牛黄清心丸的作用与冷香饮组相同，两组对家兔的心电图无显著性影响（见表３）。２．４解热作用选Ｗｉｓｔａｒ幼年大鼠，雄，体重４０～     

脑创宁对脑组织含水量和血脑屏障通透性影响

目的：考察脑创宁对闭合性脑外伤小鼠脑水肿、血脑屏障通透性的作用。方法：采用自由落体法复制闭合性脑外伤小鼠模型，测定脑组织含水量和伊思蓝含量。结果：脑创宁可明显减轻模型小鼠脑水肿程度，降低伊思蓝含量，保护血脑屏障。结论：脑创宁对闭合性脑外僵小鼠脑组织有一定的保护作用。     

四力维康饮对动物耐力和抗衰老作用的研究

四力维康饮10、20g生药/kg剂量,明显延长小鼠在高、低水温的游泳时间,提高耐寒能力,增加大鼠肾上腺重量,降低肾上腺内维生素C和胆固醇含量,促进幼鼠体重增长;20、40g生药/kg剂量,增强小鼠耐常压、减压缺氧的能力;抑制过氧化脂质的形成。120g/kg胃饲,3天内未见毒性反应。     

茶多酚急性、慢性毒性实验研究

目的：观察对茶多酚的急性和慢性的毒性反应。方法：小鼠分５组，剂量比值为１：０．８，连续灌胃７ｄ。按Ｂｌｉｓｓ法计算茶多酚ＬＤ５０。大鼠分对照组，茶多酚高、中、低剂量组，连续灌胃９０ｄ。结果：茶多酚ＬＤ５０为２．４９９ｇ／ｋｇ。动物长期服用茶多酚未出现体重、血常规、肝肾功能及脏器组织的毒性变化。结论：茶多酚属低毒性，对大鼠０．８ｇ／ｋｇ·ｄ＾－１的剂量相当于成人用量的１００倍以上，提示临床用药量是安     

仙茅苷对电刺激应激小鼠神经精神活动的影响

目的 探讨仙茅苷对电刺激应激小鼠记忆、抑郁、焦虑样行为的影响。方法 采用电刺激前和电刺激后两个时间点给药,通过恐惧记忆测试、强迫游泳及旷场实验,观察仙茅苷（每日20 mg/kg,腹腔注射,7 d）对电刺激应激小鼠恐惧记忆、抑郁及焦虑等神经活动的影响。结果 与对照组小鼠比较,电刺激前给药不影响小鼠在受到电击24 h及48 h后的凝滞时间;而电刺激后给药的小鼠在给药结束后再次测得的凝滞时间较对照组显著提高（P<0.05）。在电刺激后给药的实验中,仙茅苷能显著缩短小鼠不动时间（P<0.05）;电刺激前给药组亦有相同趋势,但差异并无统计学意义（P>0.05）。电刺激前后给药均不影响小鼠在中央格停留时间比（P>0.05）;与对照组比较,药物组电刺激前后给药具有提高小鼠运动总路程的趋势,但差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 仙茅苷具有改善电刺激应激小鼠抑郁的症状及抑制记忆退化的作用。     

艾灸疗法对慢性疲劳鼠行为学变化及下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴相关激素的影响

目的:探讨艾灸疗法调节慢性疲劳(chronic fatigue syndrome, CFS)的作用机制.方法:采用悬吊冷水游泳复合应激的方法复制CFS大鼠模型,艾灸组在复制模型同时艾灸双侧肝俞、脾俞、肾俞;通过Morris迷宫实验、鼠尾悬挂实验、力竭游泳实验进行行为学检测;采用放射免疫法检测下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(corticotrophin releasing hormone, CRH)、血浆促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone, ACTH)、皮质醇(cortisol, CORT)水平.结果:①模型组大鼠空间学习记忆力显著下降、力竭游泳时间显著缩短、悬挂不动时间显著延长,下丘脑CRH、血浆ACTH和CORT浓度显著升高,与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.01).②与模型组比较,艾灸组大鼠的行为学变化显著改善,下丘脑CRH、血浆ACTH和CORT水平显著降低(P<0.01).结论:艾灸通过抑制下丘脑CRH,血浆ACTH、CORT的过度分泌,以纠正异常的HPA轴功能,达到治疗CFS目的.