抗弓形虫感染免疫中T淋巴细胞亚群的变化与功能

抗弓形虫感染免疫中Ｔ淋巴细胞亚群的变化与功能张君（青海省畜牧兽医科学院西宁８１０００３）杜重波（审校）（中国农业科学院兰州兽医研究所）弓形虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｇｏｎｄｉ）是严格的细胞内寄生原虫，可感染包括人类在内的多种动物。在正常情况下，感染的弓...     

对小白鼠经不同途径注射抗原后脾单个核细胞的细胞因子IL-1βIL-2和IFN-γ的mRNA表达

应用ＲＴＰＣＲ结合激光密度扫描定量分析方法，观察了不同途径免疫小白鼠的脾单个核细胞的细胞因子ＩＬ１β，ＩＬ２和ＩＦＮγ的ｍＲＮＡ动态表达水平。结果显示，穴位免疫组细胞因子ＩＬ１β和ＩＬ２的ｍＲＮＡ表达峰值和持续时间均大于非穴位免疫对照组。穴位免疫组与对照组比较，ＩＦＮγ的ｍＲＮＡ表达水平无统计学差异。这一结果在ｍＲＮＡ水平上证明经后海穴途径免疫可增强机体的免疫功能。提示在穴位免疫激活机体免疫应答的过程中，除了免疫系统自身调节外，尚有其他因素参与免疫调节。     

热应激对鸡免疫功能影响的研究

在不同热应激处理下分别用新城疫油乳剂灭活苗和Ｎ７９弱毒苗免疫伊莎蛋用雏鸡，各试验组抗体效价和淋巴细胞转化率均有不同程度下降。高温处理２４ｈ的雏鸡，无论用油乳剂灭活苗还是用Ｎ７９弱毒苗免疫，与对照组间无明显差异；高温处理４８ｈ的油乳剂灭活苗免疫组鸡，在免疫初期（免疫后８ｄ）抗体效价和淋巴细胞转化率均下降（Ｐ＜０．０５），以后逐渐上升，与对照组间无明显差异；而Ｎ７９弱毒苗免疫鸡在整个试验期抗体效价明显低于对照组。     

淋巴细胞功能相关抗原3对鸡新城疫免疫的促进作用

淋巴细胞功能相关抗原３对鸡新城疫免疫的促进作用王爱华靳亚平肖俊杰赵友琴孙联辉（西北农业大学动物医学系陕西杨陵７１２１００）淋巴细胞功能相关抗原－３（ＬＦＡ－３）是广泛分布于体内多种细胞及血小板表面的一种糖蛋白。体外试验证明，它可通过与淋巴细胞表面的Ｃ...     

大肠埃希氏菌内毒素诱导山羊肝线粒体膜损伤过程中ATP酶活性变化及654-2的保护效应

通过静脉注射方法，研究了大肠埃希氏菌内毒素（ＥＴ）对山羊肝线粒体膜损伤过程中，膜泵分子活性的变化及山莨菪碱（６５４２）的保护效应。结果，ＥＴ处理组Ｎａ＋Ｋ＋ＡＴＰａｓｅ，Ｃａ２＋ＡＴＰａｓｅ和Ｍｇ２＋ＡＴＰａｓｅ活性在５ｈ和１２ｈ均低于对照组和６５４２处理组（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）；６５４２处理组３种ＡＴＰａｓｅ活性均高于对照组，除５ｈＮａ＋Ｋ＋ＡＴＰａｓｅ，Ｃａ２＋ＡＴＰａｓｅ差异显著（Ｐ＜０．０５）外，其余与对照组无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结果提示，ＥＴ具有诱导线粒体膜泵分子３种ＡＴＰａｓｅ活性降低的效应，而６５４２有明显保护膜泵分子活性的作用。     

鸡IL-2基因的克隆及序列测定

根据已发表的鸡白细胞介素２（ＩＬ２）基因序列设计引物,用ＲＴＰＣＲ方法从新城疫病毒感染的雏鸡脾淋巴细胞培养物中扩增出鸡的ＩＬ２基因ｃＤＮＡ,并进行序列测定,为进一步表达鸡ＩＬ２并深入研究其功能奠定了基础。     

四甲基偶氮唑盐比色分析法及其在细胞免疫研究中的应用

四甲基偶氮唑盐比色分析法及其在细胞免疫研究中的应用王永录（甘肃省定西地区临洮农校７３０５００）细胞免疫是致敏Ｔ淋巴细胞介导的免疫。对Ｔ细胞的各种生物学活性及其分泌的各种淋巴因子进行体外检测是细胞免疫研究的关键。长期以来，用以测定Ｔ细胞生物学活性及淋巴...     

鸡马立克氏病单价活疫苗免疫效力比较试验

用农业部南京药械厂和三家外国动物保健品公司生产的４种火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）冻干苗、实验室制备的ＣＶＩ９８８细胞结合苗和ＨＶＴ细胞结合苗等６种鸡马立克氏病（ＭＤ）单价活疫苗免疫１日龄ＳＰＦ白来航鸡，８日龄时用鸡马立克氏病强毒（ｖＭＤＶ）ＧＡ株攻击，同时以Ｚ４＋ＦＣ１２６双价活疫苗作对照，进行免疫效力比较试验。结果表明，６种ＭＤ单价活疫苗均能使免疫鸡群获得对ｖＭＤＶ攻击的免疫保护力，免疫效力强弱顺序依次是ＣＶＩ９８８，ＨＶＴ细胞结合苗和ＨＶＴ冻干苗；国产ＨＶＴ冻干苗的免疫效力不低于三家外国公司生产的ＨＶＴ冻干苗；Ｚ４＋ＦＣ１２６双价苗的免疫效力显著高于各种ＭＤ单价苗     

人工感染vMDV雏鸡IL-2活性和淋巴细胞增殖反应的变化

对１ 日龄ＡＡ 肉用雏鸡人工感染马立克氏病强毒（ｖ ＭＤＶ） 后,脾Ｔ 淋巴细胞ＩＬ２ 诱生活性和Ｔ 淋巴细胞增殖反应减弱（ Ｐ＞ ０ ．０５） 或显著减弱（ Ｐ＜ ０ ．０５） ;ＭＤ 平均发病率为３３ ．７５ ％ ,平均死亡率为１１ ．２５ ％     

乳牛产后期生理性免疫状态的研究

为了研究乳牛在产后期的生理性免疫状态,检测了产后期乳牛淋巴细胞及其亚群数量和淋巴细胞增殖活化功能及其变化。结果发现,乳牛淋巴细胞及其亚群数量和淋巴细胞增殖活化功能在分娩后第1 d最低,然后表现出缓慢上升的总体趋势。CD3细胞数在产后第15 d低于产后第1 d,到产后第30 d时达到最高值;CD4细胞数一直多于CD8细胞数;CD21细胞数在产后第15 d时达到最高值,以后缓慢下降;淋巴细胞的增殖活化能力在产后第30 d最高,未观察到淋巴细胞有明显的凋亡和增生现象。结果表明,乳牛免疫状态在产后第1 d最低,以后逐渐升高,第15 d时细胞免疫最低而体液免疫最高,第30 d时细胞免疫最强。     

动物E-玫瑰花环试验及应用

淋巴细胞是动物体内的免疫活性细胞之一。由于淋巴细胞表面标志和功能不同,可将其分为T淋巴细胞和B淋巴细胞两大类。各类淋巴细胞在机体免疫反应中具有不同的免疫功能。因而检查淋巴细胞的数量、分布和功能有助于了解机体的免疫状态和某些疫病的发病原因及免疫反应机理,为临床防治提供依据。 淋巴细胞表面标志的差异是体外检测各类淋巴细胞的依据之一。目前检测T淋巴细胞的方法较多,但     

脑多头蚴细胞苗对犬的免疫试验

用脑多头蚴细胞系制备细胞苗，对１．５～２月龄试验犬进行免疫保护试验。试验犬共进行了两次，其间隔为２周。第二次免疫后１４～１９天进行攻虫。攻虫后８０天进行剖检；剖检结果表明，用脑多头蚴细胞苗对犬进行免疫是可行的；经免疫的大体内仅见少量不成熟的虫体或无虫，而未免疫大体内见有大量虫体。     

鸡病毒性关节炎JN－1株疫苗的免疫研究

将鸡病毒性关节炎病毒（ＡＶＡＶ）Ｊ－１株经一系列培养和蚀斑克隆，筛选出一株蚀斑大小为２．７～３．１ｍｍ的克隆株（ＪＮ－１株）。该株分别以１０￣（５·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０）足掌皮下注射和１０￣（４·７２５）～１０￣（６·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０）肌肉注射１日龄肉鸡，以５×１０￣（６·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０）肌肉注射肉用种鸡，均不产生任何临床症状和病理变化；在敏感雏鸡体内传代５次和鸡胚细胞内传代１０次，无毒力返强现象。雏鸡的最低免疫剂量为１０￣（３·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０），抗体持续时间达９个月以上。用ＪＮ－１株免疫１日龄肉用雏鸡后７、１４、２１和２８天分别用强毒于足掌皮下攻击，临床保护率分别为２／１０、９／１０、１０／１０、１０／１０，病理保护率分别０／１０、７／１０、９／１０、１０／１０。抗体应答反应和特异性淋巴细胞转化试验证明，ＪＮ－１株的免疫作用是由细胞免疫和体液免疫共同完成。体外中和病毒试验显示，ＪＮ－１株抗血清能中和Ｊ－１、Ｓ＿（１１３３）、ＦＤＯ和Ｈ＿（９３０７）株。在５个有疫情的肉用种鸡场共免疫２８０００余只仔鸡和种鸡，免疫后再无ＡＶＡ疫情发生。     

兔圆小囊及肠道组织中抗菌肽的免疫组织化学和免疫电镜细胞化学定位

采用免疫组织化学和免疫电镜细胞化学技术观察了兔圆小囊及其他肠道组织中产抗菌肽细胞的分布定位.免疫组织化学观察发现,产抗菌肽细胞在兔圆小囊的黏膜上皮、圆顶上皮以及淋巴组织的滤泡生发中心、圆顶区和帽区均有分布;在兔感染多杀性巴氏杆菌后,圆小囊及其他肠道组织中的抗菌肽免疫组织化学阳性细胞数量明显增多,阳性反应增强.免疫电镜细胞化学观察结果显示,除肠道黏膜上皮细胞、异嗜性白细胞、巨噬细胞中存在抗茵肽免疫组织化学阳性反应信号外,在淋巴细胞内也发现阳性反应信号,尤其是在圆小囊淋巴组织中的DNES细胞内发现抗菌肽免疫组织化学阳性反应信号.表明圆小囊的DNES细胞和淋巴细胞均可产生抗菌肽.     

白细胞介素3对猪瘟病毒E_2基因疫苗免疫增强作用的研究

以昆明系小白鼠为试验动物,观察了白细胞介素３（ＩＬ３） 对猪瘟病毒Ｅ２ 囊膜糖蛋白（ ＨＣＶ Ｅ２） 基因疫苗免疫效果的增强作用。用ＤＮＡ 重组技术将ＨＣＶ Ｅ２ 基因和小白鼠ＩＬ３ 基因克隆到ｐＩＲＥＳ１ｎｅｏ 质粒,因在两者之间有脑心肌炎病毒（ＥＭＣＶ） 的核糖体进入位点（ＩＲＥＳ） 片段,可得到ＨＣＶ Ｅ２ 基因和小白鼠ＩＬ３ 基因双表达质粒ｐＩＲＳＴ ＩＬ３ ,用ｐＩＲＳＴＩＬ３ 免疫小白鼠后,经ＥＬＩＳＡ 法检测免疫小白鼠血清中抗ＨＣＶ Ｅ２ 抗体效价。结果显示,ＩＬ３ 能显著提高ＨＣＶ Ｅ２ 基因疫苗的免疫效果,表明ＩＬ３ 可作为ＨＣＶ Ｅ２ 基因疫苗的细胞因子佐剂。     

志贺氏菌样毒素Ⅱ型变异体单克隆抗体的制备及其应用

应用淋巴细胞杂交瘤技术,获得１株针对志贺氏菌样毒素Ⅱ型变异体（ＳｈｉｇａｌｉｋｅｔｏｘｉｎⅡｖａｒｉａｎｔ,ＳＬＴⅡｖ）Ａ亚基单位的杂交瘤细胞,并建立了以硝酸纤维素膜为载体的菌落ＥＬＩＳＡ法。用此法检测１５株分离自猪水肿病的野毒菌株和３株产其它型ＳＬＴ的标准菌株,发现该单克隆抗体与１４株野毒菌株呈阳性反应,与产ＳＬＴⅡ的９３３Ｗ株菌有微弱交叉反应,但与产ＳＬＴⅠ和ＶＴ２的菌株（Ｈ３０和Ｅ３２５１１）均无反应。这表明该法能特异、敏感、简便、快速地鉴定产ＳＬＴⅡｖ的大肠埃希氏菌,适用于猪水肿病临床诊断及流行病学调查     

提纯的马立克氏病肿瘤相关表面抗原在鸡体内的免疫应答

应用木瓜蛋白酶消化法，从马立克氏病病毒（ＭＤＶ）人工感染鸡的淋巴细胞瘤表面提取马立克氏病相关肿瘤表面抗原（ＭＡＴＳＡ）。所获得的抗原与从肿瘤细胞表面洗脱的抗ＭＡＴＳＡ抗体在ＥＬＩＳＡ中呈阳性反应。将这种抗原与白油佐剂乳化，给２０日龄鸡肌注免疫３次。应用间接ＥＬＩＳＡ对被免疫鸡的ＭＡＴＳＡ抗体进行了监测。结果表明：免疫前正常鸡的血清中无ＭＡＴＳＡ抗体存在，而用这种抗原免疫后１０天即可形成抗体应答，ＥＬＩＳＡ的ＯＤ值（Ｘ）为０．２３，至第３次免疫后１０天，ＯＤ值（Ｘ）为０．４４。这表明从鸡ＭＤ肿瘤细胞提取的ＭＡＴＳＡ，再好鸡免疫接种后可出现明显的抗体应答。木研究结果为ＭＤ肿瘤疫苗的研制提供了重要的参考依据。     

鸡大肠杆菌病疫苗滴鼻与注射免疫方法的比较试验

目前国内鸡大肠杆菌病疫苗多使用鸡源大肠埃希氏菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）Ｏ１，Ｏ２和Ｏ７８抗原提纯菌毛配以油佐剂或福氏佐剂制备，也有用鸡源大肠埃希氏菌Ｏ２，Ｏ７８和Ｏ３５抗原用甲醛灭活再加油佐剂或氢氧化铝佐剂制备。免疫途径多为鸡皮下和泄殖腔...     

注射亚硒酸钠对仔猪免疫功能的影响

对２０日龄仔猪用猪瘟弱毒疫苗免疫，同时分别颈部皮下注射亚硒酸钠（Ｎａ＿２ＳｅＯ＿３）３ｍｇ或６ｍｇ，并设免疫不注射Ｎａ＿２ＳｅＯ＿３的对照组。分别在试验前和２５，３２，３９，４６和５３日龄采血，检测全血Ｓｅ、血液学指标、淋巴细胞转化率、α－醋酸萘酯酶（ＡＮＡＥ）活性、免疫球蛋白水平和猪瘟抗体水平。结果表明，注射Ｎａ＿２ＳｅＯ＿３可有效的提高仔猪哺乳期内的血Ｓｅ水平，且补Ｓｅ量越大，血Ｓｅ水平越高；Ｓｅ对仔猪红细胞、血红蛋白含量及红细胞压积没有影响；Ｓｅ对ＡＮＡＥ￣＋细胞含量影响不大；补Ｓｅ虽然没有改变２０日龄前后血清ＩｇＧ水平下降的趋势，但试验ＩｇＧ含量明显高于对照组；补Ｓｅ可显著提高猪瘟抗体水平，因此进行猪瘟疫苗免疫的同时补Ｓｅ，可有效提高猪瘟疫苗的免疫效果。     

巨型艾美球虫在免疫鸡体内发育的组织学观察

巨型艾美球虫（Ｅｉｍｅｒｉａｍａｘｉｍａ）在非免疫鸡体内有３代裂殖生殖，在其第１代和第２代裂殖生殖阶段，虫体寄生的空肠组织发生粘液变性；在裂殖生殖后期和配子生殖阶段，空肠绒毛组织变化明显，包括粘膜上皮细胞大量脱落，固有层淋巴细胞浸润等，有时出现大量上皮间淋巴细胞（ＩＥＬ）。试验鸡经巨型艾美球虫攻击后，在其子孢子侵入、移行阶段就受到抑制。随着时间推移，第１代、第２代和第３代裂殖生殖受到日益加重的抑制，最终使虫体没有进入到有性生殖阶段。对免疫鸡攻虫后第１ｄ可见空肠固有层淋巴细胞浸润、ＩＥＬ增多、肠腺上皮细胞增生等反应。研究结果表明，免疫反应的靶阶段虫体包括子孢子及裂殖生殖各阶段的虫体；空肠固有层淋巴细胞、ＩＥＬ可能参与了抗巨型艾美球虫感染的保护性免疫。