土埋56年尸骨DNA检验1例

骨骼检验是法医学个人识别和亲子鉴定中一种较为常见的生物检材，有大量的科研工作着重于研究骨组织的DNA提取。而成功检验50年以上的尸骨较为罕见，本文作者遇到1例土埋56年的尸骨，成功进行了STR分型检验。     

环氧乙烷消杀DNA污染效果初探

目的初探环氧乙烷消杀DNA污染的效果。方法收集98例分别含有唾液、皮屑、汗斑、毛发、血斑、肋软骨的法医物证样本,分两组进行环氧乙烷灭菌6h和8h,提取DNA后扩增,使用3130XL或3500XL测序仪检测进行STR分型。结果 EO 6h组44例样本中有2例口腔拭子检出阳性结果,EO 8h组54例样本中有1例毛发检出阳性结果,阳性样本STR图谱表明仅有少量DNA残留,其余生物样本未检测到STR图谱。结论环氧乙烷能有效消杀DNA污染,可适用于DNA检验耗材的灭菌。     

泥土中二氧化硅对硅珠法提取现场生物物证DNA的影响

目的 研究泥土中二氧化硅对硅珠法提取现场生物物证DNA的影响。方法 泥浆悬液和稀释血混合,制成混有灰尘、泥土的生物样本以模拟现场生物物证,分别用加热裂解和胍盐化学裂解的方式进行细胞裂解,硅珠法提取DNA后用Identifiler Plus试剂盒进行PCR扩增及毛细管电泳检测,并对电泳结果进行比较;用泥浆悬液代替硅珠提取稀释血DNA,反向验证泥土中二氧化硅对硅珠法提取现场生物物证DNA的影响。结果 混有泥浆悬液的4μL、20μL稀释血加热裂解,提取扩增后得到完整STR分型,平均峰高1 969.7±376.9 RFU、9 706.7±349.8 RFU;混有泥浆悬液的4μL稀释血胍盐化学裂解,提取扩增后无法获得完整STR分型;混有泥浆悬液的20μL稀释血胍盐化学裂解,提取扩增后得到完整STR分型,平均峰高1 899.8±801.3 RFU;泥浆悬液代替硅珠提取20μL稀释血得到完整STR分型。结论 泥土中的二氧化硅在胍盐存在条件下会与DNA结合,导致硅珠法提取现场生物物证DNA的回收效率降低。     

DYS526a/b,DYS626,DYS713基因座在不同试剂盒中分型差异的研究

目的 探讨 DYS526a/b,DYS626,DYS713 基因座在 AGCU Y SUPP PLUS 试剂盒与 Goldeneye^TM Y ADD 试剂盒片段长度多态性分型存在差异的原因。方法 用上述两个试剂盒对 9948 标准品进行 STR 检测，并用9948 标准品对上述 4 个基因座进行 Sanger 测序，根据文献报道、国际法医遗传学会 Y-STR 命名原则，以及国家公共安全行业标准对 4 个基因座的测序结果进行结构分析，按照不同的基序计算分型。结果 9948 标准品在上述两个试剂盒中的 DYS526a/b,DYS626,DYS713 基因座都存在分型差异。依据测序结果，根据 DYS526a 公认的基序（CCTT）_n，分型应为 13；根据行业标准《序列多态 STR 等位基因命名规则》中对 DYS526b 和 DYS626 确定的基序，分型均为 25;DYS713 的基序虽没有统一标准，但根据 Y-STR 命名指导意见，笔者认为 9948 的分型应为 45。结论DYS526a/b,DYS626,DYS713 基因座作为公安机关数...     

磁珠法自动化纯化现场检材DNA方法研究

目的利用TE-MAGS在TECAN工作站上结合磁珠试剂盒,建立自动化工作站批量纯化现场检材DNA的方法,并探讨其在法医物证检案中的应用。方法灵敏度测试:标准品使用0.1ng/μL 9947A,用200μL TES稀释制备DNA总量0.1ng~1ng共10种的标准样品,采用本文方法提取纯化,使用IdentifilerTM试剂盒扩增,用3130XL型测序仪检测,Gene Mapper ID-X分析,分析STR图谱质量;纯化能力测试:在1ng总量的标准样品中加入腐殖酸、血红素,采用本文方法提取纯化、扩增检测,分析STR图谱质量;实际案件应用对比:收集304份现场检材,分别采用本方法和硅珠法进行提取纯化,经扩增检测,统计对比两种提取纯化方法 STR分型成功率。结果灵敏度测试:0.1ng~0.2ng总量标准样品提取的DNA模板,扩增后可检测到部分基因座STR图谱,0.3ng~1ng总量标准样品提取的DNA模板,扩增后可以得到完整的STR图谱;纯化能力测试:对混合有一定浓度的腐殖酸、血红素的标准样品的提取产物检测图谱未见明显抑制;实际案件应用对比测试:304份现场检材工作站磁珠法检出成功率(50%)高于硅珠法(40.8%)。结论本文所建立的方法缓冲范围较大,回收率高,纯化能力强,提取产物STR分型成功率高,适合现场检材批量化DNA检验。     

改良差异裂解法结合硅珠法提取混合斑精子DNA

目的采用改良差异裂解法结合硅珠法提取混合斑中精子DNA,并评价其应用价值。方法收集52例经常规差异裂解法检验含有女性分型的混合斑检材,采用改良差异裂解法结合硅珠法提取精子细胞DNA,IdentifilerTM试剂盒进行PCR扩增检验。并将常规差异裂解法结果作为对照。结果52例混合斑检材中,采用改良差异裂解法结合硅珠法检出单一男性精子成分有38例,男性分型检出率达到98．08％。结论改良差异裂解法结合硅珠法适合提取混合斑中精子DNA。     

基于切口酶的等温全基因组扩增体系的建立与应用

目的 建立依赖切口酶Nt.BstNBI的等温全基因组扩增体系，并对该体系的微量生物物证STR分型效能进行验证。方法 选用切口酶Nt.BstNBI（识别序列为GAGTC）和等温扩增的聚合酶Bst，建立切口酶依赖的扩增体系（NDA）。对DNA样本进行NDA并纯化NDA产物，对NDA前后的样本进行复合扩增和毛细管电泳，检测该方法的有效性、灵敏性。结果 007标准品12个常染色体基因座的扩增效率提高2倍以上，灵敏度约为3 pg/μL;19个Y染色体个基因座的扩增效率提高2倍以上，灵敏度约为6 pg/μL。8个人血样本扩增效率提高2倍以上的常染色体基因座与007标准品一致。结论 本文建立的NDA体系准确性好，能够对包含特定侧翼序列的STR基因座进行有效的线性扩增，对法医微量生物物证的高效扩增检测具有重要意义。     

多种遗传标记联合应用判定同胞关系3例

<正>全同胞关系是指同父母所生的子女之间的关系，属于复杂亲缘关系的主要类型之一。本人在实际工作中联合运用常染色体、Y染色体、X染色体的STR检验及线粒体DNA的SNP检验，成功判定了3起案件中当事人的同胞亲缘关系，可以为类似的案件提供一定的借鉴。1案例资料【案例1】包某海（男，编号1X）称其1955年左右在某地走失。采集其唾液样本检验比对，发现其DYS19等41个Y染色体STR分型与其走失地的李姓家系相同。该李姓家系的李某华（女，编号1A）称其有一弟弟幼年走失，其父母现已去世，需鉴定包某海与李某华是否具有全同胞关系。