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以本实验室构建的含有GpIL-18编码区序列的质粒pMD-GpIL-18为模板,PCR扩增GpIL-18ORF后连接到pET-28a原核表达载体,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达,纯化目的蛋白(PGpIL-18)。利用荧光定量PCR检测PGpIL-18蛋白对C57BL/6J小鼠脾细胞中细胞因子的影响。将PGpIL-18蛋白与细菌疫苗同时注射小鼠,检测其免疫增强效应。Western-blot结果表明,IPTG诱导PGpIL-18融合表达;其产物PGpIL-18能刺激小鼠脾细胞大量分泌IFN-γ,增加GM-CSF和TNF-α的表达量。同时注射PGpIL-18蛋白和细菌疫苗的小鼠血清中IgG的质量浓度明显高于对照组。同时,通过金黄色葡萄球菌和大肠杆菌攻毒试验,发现PGpIL-18蛋白可以提高疫苗对小鼠的保护率。PGpIL-18能促进特异性免疫应答的发生,这一结果为重组PGpIL-18蛋白作为佐剂的开发利用奠定了理论基础。 相似文献
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为了研究动物溶组织内阿米巴基因工程疫苗,以川西猕猴溶组织内阿米巴分离株中提取的总基因组DNA为模板,扩增了hgl基因抗原区LC3段,将其重组于原核表达载体pET-32b(+)中,构建了pET-32b(+)-hglLC3表达载体,转化至大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达融合蛋白,获得了1200bp的hgl基因LC3编码区片段;SDS-PAGE分析结果显示,重组表达质粒产生了大小为66ku的目的条带,与预期的结果一致;Western-blot分析结果显示,重组蛋白与兔超免疫血清呈阳性反应,表明,该抗原可作为动物溶组织内阿米巴疫苗的候选抗原。 相似文献
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成都大熊猫繁育研究基地的大熊猫幼仔华华及其母兽冰冰同时发生腹泻。通过对其粪便菌群检测，确诊为β溶血性链球菌病，经用对该菌敏感的环丙沙星治疗，腹泻很快停止而康复。１ 发病大熊猫幼仔的基本情况大熊猫华华（谱系号４５２）为冰冰（谱系号３１４）１９９７年所产的幼仔，初生体重１０９ｇ，出生后肤色红润，叫声洪亮，蹬踢有力，由冰冰自行哺育；后因冰冰奶量不足，华华增重较慢，曾人工补充少量山羊冻初乳。２ 临床症状发病前无明显临床症状，华华突然发生腹泻，排黄白色稀粪，精神较差；冰冰也同时发生水样腹泻，排黄色稀粪。… 相似文献
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