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牛羊赤羽病病毒环介导等温扩增检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
为建立一种能够快速、简便地检测牛、羊赤羽病病毒的分子生物学方法,根据赤羽病病毒特异性S基因的6个特异区域设计了2对引物,首次建立了赤羽病病毒环介导等温扩增(LAMP)检测方法,对LAMP反应条件进行了优化,并将其与普通PCR方法进行比较。结果显示,LAMP检测方法的特异性好,只对赤羽病病毒进行扩增,且操作简便。本研究确定的最佳反应温度为63℃,核酸检测的最低检出限为1.08ng/μL,比普通PCR的灵敏度高2个数量级。该方法为赤羽病病毒的一种最新的快速、简便的检测方法,可用于出入境牛、羊赤羽病的快速检测。 相似文献
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为深入研究牛分枝杆菌PtpA基因在细胞免疫过程中所发挥的具体调控作用,本研究以牛分枝杆菌基因组为模板扩增得到PtpA基因,通过分子克隆的方法构建完成PtpA基因原核表达载体,并将表达载体质粒转入感受态细菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE分析,在约35 ku处可见特异性蛋白条带。以抗组氨酸标签(HIS)单抗为一抗,对表达产物进行Western-blot检测,结果显示,表达产物可与抗HIS标签单克隆抗体发生特异性结合,证明该蛋白为所需的PtpA蛋白。通过免疫新西兰大白兔获得抗PtpA血清,所得血清用间接ELISA方法测得的血清抗体效价超过1∶1 000 000,具有较好的灵敏性。采用制备的PtpA多克隆抗体检测表达纯化的PtpA融合蛋白及真核表达的PtpA蛋白,结果可在约35 ku和约20 ku处产生特异性条带,表明该抗体有较强的特异性。本研究为后续PtpA基因调控细胞免疫的具体机制的研究奠定了基础。 相似文献
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正1963年3月5日,首都各大报纸都在头版显著位置刊登了毛泽东为学习雷锋题词的手迹:"向雷锋同志学习。"3月6日,《解放军报》又刊登了周恩来、刘少奇、朱德、邓小平等的题词手迹。7月8日,陈云也题了词。在老一辈革命家的倡导下,雷锋精神迅速为人熟知,学雷锋活动在全国广泛开展起来。 相似文献
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本研究利用RT-PCR扩增比格犬Notch1基因的胞内域(notch1 Intracellular domain of Notch,N1ICD),将其克隆到真核表达载体中,在293T细胞中表达,进一步鉴定其分子生物学特征。结果,首次克隆获得犬N1ICD基因,序列长度为2 469 bp,编码822个氨基酸,蛋白质分子质量为87.3 ku。序列分析结果显示,核酸序列与大鼠、马、牛、黑猩猩、绵羊、小鼠、猕猴、人的相似性分别为83.0%、87.9%、86.8%、86.4%、87.4%、83.2%、86.5%、86.3%,进化上与马的关系最近;氨基酸序列与大鼠、马、牛、黑猩猩、绵羊、小鼠、猕猴、人的相似性分别为87.8%、91.5%、89.9%、88.5%、90.9%、87.8%、89.2%、88.7%,进化上同样与马的关系最近。预测的二级结构可能存在63个α-螺旋、65个β-折叠、48个无规则卷曲。本试验成功构建了p3×FLAG-CMV10-N1ICD真核表达载体,为进一步研究犬N1ICD与犬乳腺肿瘤之间的作用奠定了基础。 相似文献
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贾坤 《天水行政学院学报》2015,(2):122-124
天水伏羲庙碑廊有众多石碑,这些石碑记载了伏羲庙的变迁历史以及祭祀沿革。整理、研究这些碑文,对于系统开发伏羲文化,打造伏羲文化品牌具有重要意义。本文选取了其中一块碑文进行研究,以期对天水伏羲文化建设做一些工作。 相似文献
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贾坤 《思想政治工作研究》2011,(1):57-57
从执政意义上看,简朴已成为时下官员转变作风、勤政廉政的必需基因。
有智者说:"谁能保持简朴的态度,谁就能有清醒和缜密的思考;谁能实践简朴的生活,谁就能以简驭繁,不致被烦心困扰。"此言可谓触及当今社会生活的"软肋",发人深省。 相似文献