激光显微捕获口腔上皮细胞的DNA分型

目的探索激光显微技术(lasercapturemicrodissectionsystem,LCM)捕获口腔上皮细胞,并进行STR-DNA分型检测的方法。方法用VERITAS显微切割仪红外低能激光显微捕获一定数量口腔上皮细胞,进行ProfilerPlus试剂盒STR复合扩增,检测DNA基因型。结果7～8个口腔上皮细胞能成功获得STR-DNA分型。3～4个口腔上皮细胞不能成功获得STR-DNA分型。结论激光显微捕获作为一种分离单个细胞的新技术,对于微量口腔上皮细胞的STR-DNA分型是可行的。     

单克隆抗A、抗B抗体的简易提纯和标酶

本文运用辛酸提取法,对小鼠腹水中的单克隆抗 A、抗 B 抗体进行纯化,并用辣根过氧化物酶(HRP)加以标记,获得纯度好,抗体活性强,酶标克分子比值符合要求的酶环单克隆抗 A、抗 B抗体。     

免疫酶斑点法检测人精浆P30及封闭物选择

<正> 免疫酶斑点法是免疫学检验中常用的方法,国外法医界有用以检测种属和血型等。但目前在我国法医学界尚未被普遍应用。本文作者用斑点法检测人精浆p30;并对斑点法中所需的封闭的牛血清白蛋白(BSA)和鸡蛋清的封闭效果进行了比较,以获得简便、实用的检测人精浆p30的斑点法。     

混合斑中精子DNA抽提方法的改进

目的改善混合斑中精子DNA的抽提效率。方法对不同条件下的混合斑采用不同方法提取精子DNA,进行PCR扩增及STR分型。结果联合运用Chelex法和商品化试剂盒进行精子DNA抽提,可比普通Chelex法快速、准确。结论Chelex法与商品化试剂盒的联合运用可提高混合斑DNA分型的成功率。     

利用DNA数据库串并和Y-STR检测破获凶杀案

近年来,随着上海地区"法庭科学DNA数据库"的建设,其串并案件、锁定罪犯的作用日益凸显.在侦破各类凶杀命案和其他刑事案件中发挥了极其重要的作用.     

PCR扩增循环数增加对低拷贝模板STR分型的影响

低拷贝模板(low copy number,LCN)最初由Gill等[1]定义为低于100pg的DNA模板量.但Budowle等人[2]认为LCN定义为"正常分析随机阈值以下的任何结果的分析和解释"更为合适.应用低于试剂盒规定的最小DNA模板量进行STR扩增检验,并对结果加以分析解释,被定义为低拷贝模板STR分型[3].     

PCR扩增循环数与低拷贝模板DNA的STR分型

目的探讨PCR扩增循环数对低拷贝模板DNA的STR分型的影响。方法模板DNA(9947A)的不同扩增用量(含低拷贝模板量),采用ProfilerPlus试剂盒,扩增循环数分别为28、30、32、34、38次,3100型基因分析仪(ABI,美国)检测结果。结果循环数从28次增至38次,模板DNA量最低检出量可从0.25ng减少至0.0312ng;先循环28次后,每反应加0.3μlAmpliTaqGoldDNA聚合酶,再循环6次较1次34个循环的检测灵敏度高,相当于1次38个循环的效果。结论增加PCR扩增循环数,可能影响低拷贝模板DNA的STR分型。     

免疫酶斑点法同步检测人精液中P30及ABH物质的研究及其应用

本文用免疫酶斑点法同步检测人精液中前列腺特异性抗原P30及ABO血型,并与常规的精子检出法和中和法进行比较。结果表明用免疫酶斑点法同步检测人精液申特异蛋白P30和ABO血型,可以替代常规的精子检出法和中和法在实际检案中应用。     

汗潜指印的STR分型检测

目的探索汗潜指印的荧光STR复合扩增检测的方法。方法采用Chelex-100和Microco-100浓缩柱,提取汗潜指印中DNA,STR复合扩增荧光电泳检测。结果 105例汗潜指纹STR分型可明确判读5个以上基因座的占30.3％,个体之间的差异、捺印指印时用力大小以及指印遗留在客体上时间的长短均影响检测成功率。结论该汗潜指印的DNA提取方法步骤简单,方法较为稳定,使单枚汗潜指印可望获得DNA分型。     

3种提取胶带粘面汗潜指印中DNA的方法比较

目的比较胶带粘面汗潜指印中DNA提取的方法。方法分别采用硅珠法、QIAMicrokit法、硅珠-QIAMicrokit法提取胶带粘面的汗潜指印中DNA,STR复合扩增,荧光电泳检测。结果用QIAMicrokit法、硅珠-QIAMicrokit法提取胶带粘面汗潜指印中DNA,检测成功率分别为21%和36%。硅珠法检测未获成功。结论硅珠-QIAMicrokit法提取胶带粘面汗潜指印中的DNA比QIAMicrokit法,检验时间更短,检测成功率更高。