检材采集与保存方式对DNA提取效率的影响

目的 研究检材采集与保存方式对DNA提取效率的影响。方法 使用生物检材采集与保存套管棉签、尖头棉签和普通医用棉签采集血样,分别放置于生物检材采集与保存套管或纸质物证袋中保存1周。剪取全部血样于96孔板中,用磁珠法结合自动化工作站提取DNA,以ABI7500型荧光定量PCR仪定量。结果 生物检材采集与保存套管采集保存的血样所提取的DNA浓度平均为(2.54±0.63)ng/μL,而尖头棉签、普通医用棉签采集并分别用纸袋保存的血样提取的DNA浓度平均为(2.06±0.44)ng/μL和(0.93±0.59)ng/μL。结论 生物检材采集与保存套管较之于尖头棉签或普通医用棉签采集、纸袋保存方式,其获得的DNA浓度显著提高,DNA提取率高。     

通过枣核上唾液斑的DNA检验侦破盗窃案1例

1案情简介 2011年11月25日,某区某局三楼办公室发生盗窃案,侦查人员在现场发现吃剩的枣核数枚,分别包装、送检。 2检验过程及结果使用＂双棉签技术＂[1]提取枣核表面的唾液斑,放入1.5 mL Eppendorf管,用QIAamp DNA Investigator试剂盒（德国Qiagen公司）抽提DNA：加入ATL缓冲液180μL、PK 20μL,振荡混匀,56℃保温2h以上;加入AL缓冲液200μL、载体RNA（Carrier-RNA）2μL,70℃保温10min，     

砖块上脱落细胞DNA分型检验

<正>1案例检验1.1简要案情郑某,男,2013年11月被发现死于家中床上。经现场勘查及法医检验,郑某系被人用砖块打击头面部致颅脑损伤死亡。提取现场两块沾有血迹的砖块要求进行DNA检验,以提供犯罪嫌疑人分型信息。1.2 DNA检验DNA提取根据嫌疑人可能的持砖方式,用棉签擦拭砖块1、砖块2后剪取棉纤维,加入裂解液500μL,56℃1h,95℃30min;采用硅珠法提取DNA,提     

植绒棉签在案件检验中的应用3例

<正>1案例1.1案例1简要案情:某日,某地发生一起柴油盗窃案件,现场提取到数个矿泉水瓶,疑为嫌疑人所留。DNA提取与检验:勘查人员用30μL超纯水浸湿弯头4N6 FLOQSwabs誖植绒棉签(意大利COPAN公司)对瓶口进行擦拭。饮料瓶口呈弧形且有螺纹,弯头棉签可以与瓶口吻合,使瓶口的脱落细胞尽可能多地被转移。擦拭完的棉签直接插回独立包装的套管     

指甲末端异体DNA检测1例

1案例 1.1简要案情 某年6月18日21：45许，某辖区发生一起抢劫案。嫌疑人尾随受害人（女，23岁）至一施工路段，乘其不备，从后方捂住受害人口鼻部，并拖至路边的干沟中，将受害人的斜挎包抢走。案发后，法医立即剪取受害人指甲末端进行DNA检验。     

利用指甲缝中残留DNA破案1例

1案例资料1.1简要案情鲁某,女(怀孕6个月)。2004年10月某日,一人在家时被他人掐捂窒息死亡。根据尸体检验及案件调查分析,鲁某在与罪犯搏斗时,手指甲抓刮到罪犯皮肤,指甲缝可能留有罪犯皮肤表皮细胞组织。笔者先对死者指甲进行DNA检验,并检出一男性DNA。案件排查中,同乡张某突然失踪,故采集张某父母的血样送检。经检验,鲁某指甲缝中残留男性DNA与张某父母的血样符合遗传关系,从而锁定张某为重大嫌疑对象,抓捕后取张某血样进行DNA鉴定,结果认定张某与指甲缝检材分型一致。在证据面前张某对犯罪事实供认不讳。1.2DNA检验鲁某、张某及其…     

游离缘指甲DNA检验1例

在法医日常检案中,指甲DNA检验需要拔取整枚指甲,消化指甲的甲体或甲根部分才能得到满意的DNA检验结果。甲体的前部DNA分型效果差,因此指甲的游离缘(free margin of nail),即指甲前缘延伸到离开甲床的部分,通常不作为核DNA检验的样本。     

1例土埋2年半尸体的指甲DNA检验

在日常检案中,DNA检验人员通常根据尸体的腐败程度来决定提取那种检材以及采取何种方法得到足够的遗传信息。据高俊薇等[1]报道,当检验腐败尸体的心血、肌肉等组织无法得到STR分型结果时,拔取其指甲进行STR分型往往能得到满意的效果。指甲检验成功率与保存环境有关,土埋1个月以上尸体的指甲DNA经有机法提取成功率不高。本例在处理一起土埋2年半、完全白骨化的尸体时,以指甲作为检验对象,分别以有机法、硅珠法和磁珠法对经Chelex-100提取后的模板DNA进行纯化浓缩,并对其效果进行比较。一、样本来源2005年7月中旬,在距本市某内陆河入海…     

510份指甲擦拭物结果分析

<正>目前,指甲擦拭物已经成为法医DNA实验室的一种常见检材。当指甲垢中检出异体DNA时,往往可以对案件提供有价值的信息。涉及案件多为故意杀人、故意伤害、抢劫、强奸、猥亵等。笔者对本实验室近三年指甲擦拭物检验情况进行梳理分析,为同行做该类检材的DNA鉴定提供参考。1材料与方法本室近三年日常检案工作中受理的含指甲擦拭物检验项目的案件79起,涉及指甲擦拭物510余份。     

DNA IQ^TM SYSTEM在疑难指甲DNA检验中的应用

目的探索DNA IQTMSYSTEM在疑难指甲DNA提取中的应用。方法 15份疑难指甲采用Chelex方法检验没有成功获得STR分型图谱,采用DNA IQTMSYSTEM提取法并纯化,采用Identifiler PLUS试剂盒进行复合扩增,产物经ABI3130XL型DNA基因分析仪检测。结果成功获得15例疑难指甲的STR基因座DNA分型。结论 DNA IQTMSYSTEM方法能快速、有效提取疑难指甲DNA进行STR分型。     

阴茎拭子DNA检出女性成分1例

正1案例资料1.1简要案情刘某,女,已婚。2014年某日在一工地宿舍被欧某强奸,后即刻报案。提取了刘某阴道拭子、欧某阴茎拭子及两人的口腔拭子进行DNA检验。1.2 DNA检验刘某的阴道拭子经抗人精金标检测试剂条检测为阳性,剪取适量放入1.5m L Eppendorf中,加入800μL TNE,80μL 10%SDS,10μL 1%PK,37℃消化过     

提取痕量检材DNA破获凶杀案1例

1案例2006年7月北京市某区发生一起入室杀人案,死者为女性(21岁),经法医尸体检验,鉴定为外力致机械性窒息死亡。提取以下五种生物检材并进行检验,现场插线板所连接电线上潜在的人体脱落细胞、死者指甲末端、死者阴道棉球拭子、死者心血和犯罪嫌疑人静脉血。用去离子水湿润的无菌脱脂棉,反复擦拭插线板所连接电线,小体系Chelex法[1]提取电线擦拭物和指甲甲缘附着物的DNA,用两步分离法去除阴道棉球拭子女性成分后,显微镜检,仅检见一个精子,用酚-氯仿法[2]提取精子DNA。PCR扩增采用PowerPlex!16System试剂盒(Promega公司美国),并用ABI-3…     

指甲微量生物物证的提取

指甲缝处于手指的末端,在受害者与犯罪嫌疑人进行抓挠、扭打等激烈抵抗或徒手搏斗的过程中,犯罪嫌疑人的皮肤组织或微量血液经常会被刮附遗留在死者的双手指甲缝内。准确提取到死者双手指甲缝内脱落皮屑细胞并送DNA实验室检出犯罪嫌疑人的DNA数据,将为案件侦破提供关键线索和科学     

口腔拭子DNA检验的实时定量研究

目的寻求提高口腔拭子的DNA检验效率的方法。方法对来源于不同个体或同一个体不同擦拭次数的口腔拭子用Chelex-100或磁珠法提取的DNA用实时定量PCR技术进行定量,同时用Identifiler复合扩增系统在ABI3100遗传分析仪上对这些DNA样品进行STR分型。结果在建立的Identifiler系统8μl扩增体系中,3个月内的口腔拭子用Chelex-100法提取的DNA模板1μl量较3μl量扩增效果好,磁珠法提取的DNA模板用量大小对复合扩增检测影响较小。结论用棉签擦拭颊粘膜5次制备口腔拭子,取其头部的约1/4用200μlChelex-100法提取DNA,然后用1μl模板进行复合扩增,是提高口腔拭子的DNA检验效率的简便可行的方法,但陈旧口腔拭子用磁珠法提取更能保证复合扩增分型成功。     

1例土埋2年半尸体的指甲DNA检验

在日常检案中，DNA检验人员通常根据尸体的腐败程度来决定提取那种检材以及采取何种方法得到足够的遗传信息。据高俊薇等报道。当检验腐败尸体的心血、肌肉等组织无法得到STR分型结果时，拔取其指甲进行STR分型往往能得到满意的效果。指甲检验成功率与保存环境有关．土埋1个月以上尸体的指甲DNA经有机法提取成功率不高。本例在处理一起土埋2年半、完全白骨化的尸体时，以指甲作为检验对象，分别以有机法、硅珠法和磁珠法对经Chelex-100提取后的模板DNA进行纯化浓缩。并对其效果进行比较。     

活体指甲缝内生物检材的提取1例

1案例 谢某,女,某日被人拉上车,遭到暴力抢劫。法医在给谢某验伤时,得知谢某在挣扎过程中曾抓过嫌疑人手臂,便提取了谢某右手指甲缝内附着物送作DNA检验。经检验,在受害人指甲缝内检测到一男性基因成分,并比对此前该地区发生的一宗轮奸案及多宗抢劫案,成功锁定了案犯。     

腌制2年的生物检材STR检验1例

腌制过的生物检材在DNA检案中比较少见。作者遇到一例腌制2年多的尸块，并对不同部位检材（深层肌肉组织、部分肋软骨、指甲）进行STR检验，最终通过检验指甲成功得到无名尸体的STR分型，并进行了亲缘关系鉴定。现报道如下。     

移液器使用不当导致DNA分型Ladder污染原因初探

在法医DNA分型检验中,如出现与等位基因标准对照物（Ladder）一样的等位基因,应注意Ladder污染[1]。本文对由于移液器使用不当,造成其头部或管道内壁DNA蓄积而导致Ladder污染原因进行分析,希望为相关检验提供借鉴。1材料与方法1.1样本 收集本实验室扩增区生物安全柜内5支日常使用的移液器（量程分别为200μL、100μL、20μL、10μL和2μL）,分别用超纯水清洗,取其清洗液为样本（共5份）,取用日常使用的移液器分装的PowerPlex 18D System试剂盒（简称PP18D）内的扩增混合物、引物和试剂盒内扩增用超纯水为样本（共3份）,以上共计8份样本为待测DNA模板。     

应用Y-STR侦破偏远山区强奸杀人案1例

正1案例资料1.1简要案情及现场情况2009年9月1日9时许,某偏远山区何某(女,52岁,寡妇)被发现死于自家房间内,尸体俯卧地面,上衣前襟被掀至双侧乳房下方,后面被掀至背部,现场有打斗痕迹。提取死者指甲及阴道拭子进行DNA检验。1.2 DNA检验及破案情况死者指甲及阴道拭子经检验,检出两名男性DNA分型。在与有关嫌疑人进行Y-STR检验比对后发现,有2名赖姓男子Y-STR分型与阴道内提取检     

大便STR分型检验1例

1案例资料1.1简要案情2012年5月8日,蒋某报案称其住处1台笔记本电脑、1部手机及3 000元人民币被盗。现场勘查在该住宅楼顶天台发现新鲜大便,怀疑为嫌疑人所留。1.2 DNA提取及检验检材提取取消毒无菌棉签2个,沿同一方向轻轻转动擦拭粪便表面,提取后阴干、4℃保存待检。DNA提取使用德国QIAGEN公司EZ1DNA Investigator试剂盒。剪取棉签表面约1/3大小,加入